七种代谢标志物的检测试剂在制备乳腺癌诊断和预后产品中的应用

本发明属于医学检验，具体涉及七种代谢标志物的检测试剂在制备乳腺癌诊断和预后产品中的应用。

背景技术：

1、最新的全球癌症统计报告(globocan)报道，在女性人群中乳腺癌(breastcancer,bc)占比已超过肺癌居所有癌症首位，2020年新发病例大约230万例，占全部新发癌症病例的11.7％，且女性乳腺癌已成为癌症死亡第五大原因，占全部癌症死亡病例的6.9％。目前，乳腺癌的筛查主要是通过乳腺x线和超声检查的方法。乳腺癌的诊断则需要结合患者临床表现、体格检查、影像学检查和组织病理学诊断等进行综合鉴别诊断。其中组织病理学诊断是乳腺癌确诊和治疗的重要依据，但是该技术方法需要对患者乳腺组织进行侵入性的活检。同时影像学上的筛查，也是基于组织形态学上的改变，常常使得检查位于癌症转移或是中晚期阶段，不能发挥癌症早期以及快速诊断的作用。因此，能够特异、快速、无创的筛查和诊断乳腺癌在疾病预防和临床治疗中显得尤为重要。

2、液体活检(liquid biopsy)，不仅为疾病的诊断和评估提供无创伤和最小疾病检测的方法，而且还能实时监测疾病进展和提供治疗疗效等信息，是一种可能替代组织活检的检测方法。目前，血液样本的液体活检已被广泛用于检测实体瘤和免疫系统疾病，但是基于尿液样本液体活检的潜力尚未得到充分挖掘。

3、代谢组学(metabolomics)，是一种测量生物体内代谢过程所有小分子产物的方法，是对独特细胞生理过程中的代谢谱进行的研究。尿液代谢组学主要是通过核磁共振或质谱(mass spectrometry,ms)对尿液中小分子进行广泛鉴定与分析，并筛选出特异性较高的生物标志物。目前已有多项研究表明，尿液中差异性代谢产物具有作为肿瘤早期筛查与诊断标志物分子的巨大潜力。

4、有鉴于此，发掘更多特异性高的乳腺癌生物标志物是本发明要解决的技术问题。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明提供了七种谢标志物的检测试剂在制备乳腺癌诊断和预后产品中的应用。

2、实现本发明的具体方案如下：

3、七种代谢标志物的检测试剂在制备乳腺癌诊断和预后产品中的应用，所述代谢标志物为庚醛、2-戊酮、2,2-二甲基-丙酸、3,4,5,6,7,8-六氢-2(1h)-萘酮、甲基异丙基二硫醚、二甲基硅烷二醇、十甲基-环五硅氧烷，pubchem cid依次为8130、7895、6417、572673、123494、11137539、10913；

4、所述检测试剂用于检测样品中所述代谢标志物的含量。

5、进一步的，所述样品为受试者的尿液。

6、更进一步的，通过气相色谱/质谱分析的方法在尿液中检测七种代谢标志物的含量。

7、更进一步的，所述检测试剂包括h2so4和内标物，所述内标物为4-methylpentan-2-ol的标准品，pubchem cid为7910。

8、更进一步的，所述h2so4和4-methylpentan-2-ol分别以水溶液的形式存在，h2so4的浓度为5m，4-methylpentan-2-ol的浓度为0.8mg/ml。

9、更进一步的，所述乳腺癌诊断和预后产品为试剂盒。

10、更进一步的，所述试剂盒包括所述检测试剂。

11、基于同一个发明构思，本发明还提供了一种乳腺癌诊断和预后试剂盒，所述试剂盒用于检测所述的代谢标志物，所述试剂盒包括h2so4和内标物，所述内标物为4-methylpentan-2-ol的标准品，pubchem cid为7910。

12、进一步的，所述试剂盒中，h2so4和4-methylpentan-2-ol分别以水溶液的形式存在，h2so4的浓度为5m，4-methylpentan-2-ol的浓度为0.8mg/ml。

13、本发明具有如下有益效果：

14、本发明研究首次发现，相对正常健康人对照，乳腺癌患者的尿液中庚醛、2-戊酮、2,2-二甲基-丙酸、3,4,5,6,7,8-六氢-2(1h)-萘酮、甲基异丙基二硫醚、二甲基硅烷二醇、十甲基-环五硅氧烷共计7种化合物的联合诊断指数显著升高，可以区分乳腺癌和健康对照，其特异度91.2％、灵敏度100％、auc值＝0.975、cut-off值＝0.274。给予乳腺癌患者治疗后，再次建模计算七种代谢物联合评估疗效指数，可以进行乳腺癌治疗疗效的评估，治疗后1个月，其特异度95.1％、灵敏度81.8％、auc值＝0.944、cut-off值＝0.569，该指标在乳腺癌患者治疗后1、3个月显著上调，逐步趋于健康对照水平，可以作为乳腺癌治疗疗效的评价指标。该结果为乳腺癌的早期诊断、动态监测和预后判断提供特异性的、迅速的、无创伤性的检测手段，具有广泛的临床应用价值。本发明试剂盒中的检测试剂可单次与受试者尿液混合，而同时高精度的定量检测多种代谢标志物，本发明的测试样品取样方便，对病人无任何痛苦，本发明的问世，将为乳腺癌的筛查和预后起到积极的作用。

技术特征：

1.七种代谢标志物的检测试剂在制备乳腺癌诊断和预后产品中的应用，其特征在于，所述代谢标志物为庚醛、2-戊酮、2,2-二甲基-丙酸、3,4,5,6,7,8-六氢-2(1h)-萘酮、甲基异丙基二硫醚、二甲基硅烷二醇、十甲基-环五硅氧烷，pubchem cid依次为8130、7895、6417、572673、123494、11137539、10913；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述样品为受试者的尿液。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，通过气相色谱/质谱分析的方法在尿液中检测七种代谢标志物的含量。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测试剂包括h2so4和内标物，所述内标物为4-methylpentan-2-ol的标准品，pubchem cid为7910。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述h2so4和4-methylpentan-2-ol分别以水溶液的形式存在，h2so4的浓度为5m，4-methylpentan-2-ol的浓度为0.8mg/ml。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述乳腺癌诊断和预后产品为试剂盒。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括所述检测试剂。

8.一种乳腺癌诊断和预后试剂盒，其特征在于，所述试剂盒用于检测权利要求1所述的代谢标志物，所述试剂盒包括h2so4和内标物，所述内标物为4-methylpentan-2-ol的标准品，pubchem cid为7910。

9.根据权利要求8所述的一种乳腺癌诊断和预后试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中，h2so4和4-methylpentan-2-ol分别以水溶液的形式存在，h2so4的浓度为5m，4-methylpentan-2-ol的浓度为0.8mg/ml。

技术总结
本发明属于医学检验技术领域，具体涉及七种代谢标志物的检测试剂在制备乳腺癌诊断和预后产品中的应用。所述代谢标志物为庚醛、2‑戊酮、2,2‑二甲基‑丙酸、3,4,5,6,7,8‑六氢‑2(1H)‑萘酮、甲基异丙基二硫醚、二甲基硅烷二醇、十甲基‑环五硅氧烷，PubChem CID依次为8130、7895、6417、572673、123494、11137539、10913；本发明的研究结果表明，相对正常健康人对照，乳腺癌患者尿液中的七种代谢标志物联合诊断指数升高，可将其作为尿液标志物预测乳腺癌的发病，七种代谢标志物联合评估疗效指数在治疗后升高，可以评价乳腺癌治疗效果。该结果为乳腺癌的早期诊断、动态监测和预后判断提供特异性的、迅速的、无创伤性的检测手段，具有广泛的临床应用价值。

技术研发人员：刘培军,谭潭,王博,刘洁,李亚昭
受保护的技术使用者：西安交通大学医学院第一附属医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15