ankG蛋白作为结直肠癌预后评估分子标志物的应用的制作方法

本发明涉及医学生物检测，具体ankg蛋白作为结直肠癌预后评估分子标志物的应用。

背景技术：

1、结直肠癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一，每年约有十万新发确诊病例，发病率及死亡率居消化系统第一位。随着人民生活水平的提高、饮食结构的改变、环境恶化及人口老龄化趋势的影响，结直肠癌的发病率呈上升趋势，较往年提高了2-4倍。虽然近年来手术、化疗、放疗、靶向治疗及免疫治疗取得了很大进步，但结直肠癌患者的五年生存率仍然不高，并存在术后复发和转移的可能。因此，寻找有效的结直肠癌预后评估分子标志物将有助于制定综合性、个体化治疗方案，提高患者预后水平。

2、锚蛋白g(ankyrin g，ankg)由ank3基因编码，目前ankg在结直肠癌中的作用及临床价值尚未见报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供ankg的新用途，具体是ankg蛋白作为结直肠癌预后标志物的应用，以及其在制备结直肠癌预后评估试剂盒中的应用。

2、本发明的另一个目的在于提供一种ankg蛋白在制备结直肠癌治疗药物中的应用。

3、在前期的研究中，本发明人发现结直肠特异性敲除ank3的小鼠在诱癌模型中结直肠肿瘤发生多于对照组，提示ankg具有抑癌作用；体内外功能实验表明ankg缺失可以促进结肠癌细胞增殖、迁移，而过表达ankg则抑制上述表型；通过免疫组化方法检测ankg蛋白在结直肠癌组织中的表达量，生存分析结果显示ankg低表达患者的总体生存期显著缩短。

4、因此，我们认为，ankg具备作为结直肠癌预后评估标志物和治疗药物的可能性。

5、检测ankg蛋白表达量的试剂在制备结直肠癌预后评估试剂或试剂盒中的应用。

6、作为本发明的一种优选，所述的检测ankg蛋白表达量的试剂为特异性识别人ankg蛋白的抗体。

7、作为本发明的进一步优选，所述的检测ankg蛋白表达量的试剂为ankg单克隆抗体或多克隆抗体。

8、ankg蛋白或其激动剂在制备治疗结直肠癌的药物中的应用。

9、ankg蛋白或其激动剂在制备抑制结肠癌细胞增殖、迁移的药物中的应用。

10、一种结直肠癌预后评估试剂盒，包括特异性识别人ankg蛋白的抗体、免疫组化实验试剂等。

11、免疫组化实验试剂包括：二甲苯、无水乙醇、1％bsa封闭液、edta抗原修复液、3％h2o2甲醇液、ankg兔抗人单克隆抗体、hrp标记的羊抗兔二抗、苏木素染液、苏木素分化液和dab显色剂。

12、有益效果：

13、本发明首次研究了ankg在结直肠癌组织中的表达与患者预后的关系，发现ankg高表达的结直肠癌患者总体生存期较长，预后较好。因此，本发明的ankg可以作为结直肠癌预后评估标志物，通过检测ankg在结直肠癌组织中的表达水平，可以辅助结直肠癌患者预后的评估，对于结直肠癌病人术后监控和治疗也具有重要的指导意义。

14、本发明人发现结直肠特异性敲除ank3的小鼠在诱癌模型中结直肠肿瘤发生多于对照组，提示ankg具有抑癌作用；体内外功能实验表明ankg缺失可以促进结肠癌细胞增殖、迁移，而过表达ankg则抑制上述表型。

技术特征：

1.检测ankg蛋白表达量的试剂在制备结直肠癌预后评估试剂或试剂盒中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的检测ankg蛋白表达量的试剂为特异性识别人ankg蛋白的抗体。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的检测ankg蛋白表达量的试剂为ankg单克隆抗体或多克隆抗体。

4.ankg蛋白或其激动剂在制备治疗结直肠癌的药物中的应用。

5.ankg蛋白或其激动剂在制备抑制结肠癌细胞增殖、迁移的药物中的应用。

6.一种结直肠癌预后评估试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括特异性识别人ankg蛋白的抗体、免疫组化实验试剂等。

技术总结
本发明公开了ankG蛋白作为结直肠癌预后评估分子标志物的应用。本发明人发现结直肠特异性敲除ank3的小鼠在诱癌模型中结直肠肿瘤发生多于对照组，提示ankG具有抑癌作用；体内外功能实验表明ankG缺失可以促进结肠癌细胞增殖、迁移，而过表达ankG则抑制上述表型；通过免疫组化方法检测ankG蛋白在结直肠癌组织中的表达量，生存分析结果显示ankG低表达患者的总体生存期显著缩短。因此检测ankG蛋白表达量的试剂可在制备结直肠癌预后评估试剂或试剂盒中应用。ankG蛋白或其激动剂可在制备治疗结直肠癌的药物中应用。

技术研发人员：陈程,褚晓源,刘小北,吴美娟,赵雨璐
受保护的技术使用者：中国人民解放军东部战区总医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/22