本发明涉及医疗检测，尤其涉及一种tos测定试剂、tos测定试剂的制备方法及tos测定方法。
背景技术：
1、tos(total oxidative status)是一种用于评估体内(或样本中)氧化应激水平的生化指标。它是通过测量生物样本中的氧化物质的总和，并以h2o2的当量浓度来反映机体内(或样本中)总的氧化物质水平。
2、体内的氧化物质主要包括活性氧(ros)和活性氮(rns)两大类。ross包括超氧阴离子(.o2-)、羟自由基(.oh)和过氧化氢(h2o2)等；rns包括一氧化氮(.no)，二氧化氮(.no2)和过氧化亚硝酸盐(.onoo-)等。由于氧化物质的繁杂多样性，直接测定机体tos水平比较困难，长期以来氧化应激状态是通过检测组织和生物体液中的氧化应激代谢产物来评价的。但是氧化物质对机体的损伤是非特异性的，主要氧化损伤dna、脂质及蛋白质等。总的来说，氧化物质损伤机体的生物分子后可产生大量特异性的氧化代谢产物，这是氧化应激作用于机体的结果。测量这些代谢产物可准确反映机体的氧化应激状态，但单独用某一种指标难免片面，因此传统检测方法需要综合考虑各种氧化代谢产物，无法检测总氧化状态。因此，本申请提出了一种tos测定试剂、tos测定试剂的制备方法及tos测定方法。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种tos测定试剂、tos测定试剂的制备方法及tos测定方法，以解决目前尚无自动或半自动检测总氧化态的方法学的问题。
2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、一种tos测定试剂，所述测定试剂包括r1试剂、r2试剂以及标准品，其中，
4、所述r1试剂为150μmo l/l二甲酚橙色原溶液，ph值为1.75；
5、所述r2试剂为5mmo l/l硫酸亚铁铵基质溶液，ph值为1.75；
6、所述标准品为100.0μmo l/l h2o2溶液；
7、所述r1试剂、r2试剂以及标准品分别盛装在不同的容器内。
8、优选的，所述r1试剂、r2试剂以及标准品的比例为r1试剂：r2试剂：标准品＝42：3：4。
9、本发明还公开了一种tos测定试剂的制备方法，用于配置上述的tos测定试剂，包括以下步骤：
10、取二甲酚橙四钠盐以及nac l溶于硫酸溶液中，并加入甘油以配置二甲酚橙终浓度为150μmo l/l、nac l终浓度为140mmo l/l、甘油终浓度为1.35mo l/l、ph＝1.75的r1试剂；
11、取硫酸亚铁铵以及邻联茴香胺溶于硫酸溶液中以硫酸亚铁铵浓度为5mmo l/l、邻联茴香胺终浓度为10mmo l/l的r2试剂；
12、取h2o2浓缩液加入到蒸馏水中以配置10.0mmo l/l的h2o2储备液，并在使用时，取h2o2储备液加入到蒸馏水中以配置所述标准品。
13、优选的，所述硫酸溶液的浓度为25mmo l/l。
14、优选的，所述r1试剂、所述r2试剂以及标准品的存放温度为4℃。
15、本发明还公开了一种tos测定方法，采用上述tos测定试剂，包括以下步骤：
16、按照预设比例配置tos测定试剂；
17、使用紫外分光光度计扫描硫酸亚铁铵基质溶液，得到吸收峰特征曲线，并根据生化分析仪滤光片的设置，确定测定方法的主波长和副波长；
18、在生化分析仪建立tos检测方案。
19、优选的，紫外分光光度计在280nm～750nm范围内，扫描硫酸亚铁铵基质溶液，主波长为560nm，副波长为800nm。
20、优选的，tos检测方案包括：
21、输入检测试剂、试剂配置比例以及主波长和副波长；
22、确定反应类型为正反应，反应时间为5min；
23、确定测定方法为两点终点法：样本与r1试剂混匀孵育5分钟后测定第1次吸光度a1，立即加入r2试剂，混匀孵育5分钟后测定第2次吸光度a2，计算a1和a2的差值δa＝a1-a2。
24、综上所述，本发明与现有技术相比具有以下有益效果：
25、本发明的实施例公开的tos测定试剂稳定性高，存储时间长，在测定总氧化状态时不需要现场配置试剂，同时可在各种型号的自动或半自动生化分析仪上实现tos批量检测，能够大大提高测定效率。
1.一种tos测定试剂，其特征在于，所述测定试剂包括r1试剂、r2试剂以及标准品，其中，
2.根据权利要求2所述的tos测定试剂，其特征在于，所述r1试剂、r2试剂以及标准品的比例为r1试剂：r2试剂：标准品＝42：3：4。
3.一种tos测定试剂的制备方法，用于配置权利要求1或2所述的tos测定试剂，其特征在于，包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的tos测定试剂的制备方法，其特征在于，所述硫酸溶液的浓度为25mmo l/l。
5.根据权利要求3所述的tos测定试剂的制备方法，其特征在于，所述r1试剂、所述r2试剂以及标准品的存放温度为4℃。
6.一种tos测定方法，采用权利要求1或权利要求2所述的tos测定试剂，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求8所述的tos测定方法，其特征在于，紫外分光光度计在280nm～750nm范围内，扫描硫酸亚铁铵基质溶液，主波长为560nm，副波长为800nm。
8.根据权利要求8所述的tos测定方法，其特征在于，tos检测方案包括：