一种细胞计数芯片的制作方法

本技术涉及分析检测的，尤其是涉及一种细胞计数芯片。

背景技术：

1、对样本中的细胞计数是生物医药领域尤其是医学检测领域的常见需求，常用于对血液中的红细胞、白细胞和血小板进行计数，也用于检测一些样本中的细菌、真菌、酵母菌等微生物的数量。目前对细胞进行计数的主要方法有计数板法和库尔特原理细胞计数法。

2、以采用牛鲍氏计数设计原理的细胞计数板为例，当需要对血液样本中的红细胞进行计数时，检测人员先将待测血液加入至红细胞稀释液中混匀，然后使用盖玻片盖住细胞计数板上的计数池，将稀释的红细胞滴加至盖玻片与计数板之间的间隙中，通过液体毛细现象对计数池进行充池，样本中的红细胞在计数池中静置沉淀于计数池底面，检测人员使用显微镜对计数板底面的红细胞进行观察计数；当需要对血液中的白细胞进行计数时，与上述操作不同的是，检测人员将待测血液滴在能溶解红细胞的白细胞稀释液中混匀，然后将样本充池至计数池中，利用显微镜观察计算沉于计数板底面的白细胞数量；当需要对血小板的数量进行计数时，检测人员将待测血液定量加至能溶解红细胞的血小板稀释液中混匀，然后将样本充池至计数池中，利用显微镜观察计算沉降于计数板底面的血小板的数量。

3、库尔特原理细胞计数法的检测原理是：悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔管时，取代相同体积的电解液，在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬间变化，产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目呈正比。库尔特原理的细胞计数法的产品为血细胞分析仪。血细胞分析仪具有结果准确、重复性好、操作简便等优势。

4、针对上述中的相关技术，发明人认为当需要对血液中的红细胞、白细胞和血小板都进行计数时，传统的牛鲍氏计数板法需要配置三种细胞稀释液，需要三个容器分别量取定量的细胞稀释液，将样本定量加入三种不同的稀释液中，然后对计数板进行三次充池后进行计数，这种方式操作繁琐、效率低下。而基于库尔特原理的血细胞分析仪的缺点是需要二十四小时开机、试剂包为大包装、仪器成本较高等。

5、为避免上述两种方法学在细胞计数方面的缺陷，在计数板方法基础上开发一款更简便、更规范、更可靠、效率更高、更易实现自动化的细胞计数芯片，适用于基层医疗机构、床旁、宠物医院等场景的细胞计数产品，特提出本发明。

技术实现思路

1、为了降低计数板法细胞计数的操作难度，从而有利于提高计数效率和有利于实现规范化、自动化，本技术提供一种细胞计数芯片。

2、本技术提供的一种细胞计数芯片，采用如下的技术方案：

3、一种细胞计数芯片，包括板体，所述板体上设有至少一个计数池，所述计数池连通有导液管，所述导液管远离所述计数池的一端连通有加样窗，液体样本滴加至所述加样窗后流经所述导液管流至所述计数池。

4、通过采用上述技术方案，板体对计数池、导液管以及加样窗进行承载， 当需要进行细胞计数操作时，检测人员只需将液体样本滴入加样窗中，液体样本进入加样窗后通过导液管流至计数池中进行计数，加样窗增大了检测人员将液体样本滴入计数池时的滴入面积，降低了加样本的操作难度，从而有利于提高技术效率，导液管能对液体流动进行控制，以确保样本对计数池充池的可靠性，同时有利于实现规范化和自动化。

5、优选的，在所述导液管和所述计数池之间设置有缓冲腔，所述缓冲腔的一端与所述导液管相连通，所述缓冲腔的另一端与所述计数池相连通。

6、通过采用上述技术方案，缓冲腔连接在导液管和计数池之间，在液体样本进入计数池之前，液体样本先在缓冲腔中进行缓存，当缓冲腔中的液体样本积累到一定量后再进入计数池中，有利于防止液体样本充池操作时气泡的产生，从而有利于提高计数的准确性。

7、优选的，所述加样窗、所述导液管、所述缓冲腔以及所述计数池中的一个或多个中预包埋有可溶解于液体样本的固体试剂。

8、上述技术方案中的固体试剂是指对血液样本中特定细胞成分进行计数所需的，在传统方法中需要用这些固体试剂配制成特定细胞计数稀释液，然后将样本加入此稀释液中，稀释液对血液样本进行特定作用后再进行特定细胞计数。在上述技术方案中，例如当需要对血液样本中的某种细胞进行计数时，检测人员只需将血液样本稀释至0.9%氯化钠中然后滴入加样窗中，细胞计数芯片在加样窗、导液管、缓冲腔、计数池中的一个或几个中预包埋特定细胞计数所需固体试剂，固体试剂溶于0.9%氯化钠稀中，0.9%氯化钠稀释变成特定细胞计数稀释液，使得流入计数池的血液样本可进行特定细胞计数，无需准备各种特定的稀释液并分别对样本进行定量稀释、充池等复杂操作，从而有利于提高工作效率。上述固体试剂对样本的作用机理包括但不限于溶解红细胞、溶解白细胞、染色、改变渗透压等。

9、优选的，所述板体位于所述计数池的部分采用透明材料制成，所述计数池的上方设有盖片，所述盖片固设于所述板体。

10、通过采用上述技术方案，板体位于计数池的部分采用透明材质制成，且盖片固设在板体上盖住计数池，便于检测人员使用显微镜对计数池中一定体积内的细胞进行观察计数，简化了需要使用盖玻片将计数池盖住的操作，使操作规范化、便于对计数池的显微自动成像观察。

11、优选的，所述导液管为一密闭管道，所述加样窗的上方开口呈池状设置。

12、通过采用上述技术方案，导液管一端与加样窗相连通，另一端与计数池相连通，导液管设置为密闭管道有利于控制液体的流动方向、速度和流量，加样窗设置为上方开口的池状，有利于提高检测人员将液体样本滴入加样窗中的便利性，且滴入加样窗中的液体样本只能通过导液管流入计数池中，对计数池进行充池的液体的量易于控制，提高充池的可靠性。

13、优选的，所述计数池和所述导液管的内表面具有亲水性。

14、通过采用上述技术方案，此设置有利于改善液体样本的流动性。

15、优选的，若干个所述导液管共用一个所述加样窗。

16、通过采用上述技术方案，当需要对血液样本中的多种细胞成分分别进行计数操作时，检测人员只需进行一次滴液加样操作，液体样本通过不同的导液管通入不同的计数池中，不同的导液管或计数池中预包埋不同的固体试剂，固体试剂溶于液体样本中，使得不同的计数池可以完成不同的特定要求的细胞计数，有利于提高计数操作的效率。

17、优选的，所述板体上还设置有血色素检测池，所述板体位于所述血色素检测池的部分采用透明材料制作，所述血色素检测池内预包埋有溶血素。

18、通过采用上述技术方案，血色素检测池内预包埋溶血素可以对血液进行血色素的检测，无需进行复杂的试剂配制及加注操作，板体位于血色素检测池的部分采用透明材料制作便于对血色素进行检测，血色素检测池的设置有利于提高细胞计数芯片的适用性。

19、综上所述，本技术包括以下至少一种有益技术效果：

20、1.通过设置计数池、导液管和加样窗，当需要进行细胞计数操作时，检测人员只需将液体样本滴入加样窗中，液体样本进入加样窗后通过导液管流至计数池中进行计数，加样窗增大了检测人员将液体样本滴入计数池时的滴入面积，降低了加样本的操作难度，从而有利于提高工作效率，导液管能对液体流动进行控制，确保样本对计数池充池的可靠性。

21、2.通过设置缓冲腔，缓冲腔连接在导液管和计数池之间，在液体样本进入计数池之前，液体样本先在缓冲腔中进行缓存，当缓冲腔中的液体样本积累到一定量后再进入计数池中，有利于防止液体样本充池操作时气泡的产生，从而有利于提高计数的准确性。

22、3.通过在加样窗、导液管、缓冲腔以及计数池中的一个或多个中预包埋固体试剂，当需要对样本中的特定细胞成分进行计数时，只需将血液样本滴入加样窗中，在液体样本流经导液管、缓冲腔、计数池的过程中，固体试剂溶于液体样本中使得样本被特定细胞稀释液稀释，从而使得计数池可以完成特定细胞的计数，无需进行复杂的细胞稀释液的配置、保存、稀释等操作，从而有利于提高效率。

23、4.若干个导液管共用一个加样窗，有利于进一步提高计数的工作效率。