本技术属于生物医药，具体涉及蛋白组合物及肺癌早期诊断试剂盒。
背景技术：
：1、肺癌是我国及全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。肺癌的预后与其发展阶段紧密相关，局限性肺癌五年存活率为53％，而在出现转移的情况下五年存活率仅为4％。因此肺癌的早期筛查与早期诊断已成为延长患者生存期、挽救患者生命的关键，肺癌的早期发现和及时防治能显著提高患者的存活率和生活质量。2、肺癌早期诊断主要包括影像学检查和生物标记物检查等手段，生物标记物包括肺癌标记物(肺癌抗原)、循环肿瘤细胞(ctc)、表观遗传学(如dna甲基化)、ctdna及其他血液组分、肿瘤相关抗原自身抗体等。国家药品监督管理局(nmpa，原cfda)批准了多种肺癌体外诊断试剂盒，如全球首个肺癌循环肿瘤细胞检测试剂盒——cytoploraretm(靶向pcr ctc)、人类ros1基因融合检测试剂盒、egfr基因突变检测试剂盒、人类eml4-alk融合基因检测试剂盒、人类alk基因融合和ros1基因融合联合检测试剂盒、ngs肿瘤多基因检测试剂盒、凯保罗生物的联合低剂量螺旋ct进行早期肺癌检测的七种自身抗体检测试剂盒等。其中多为利用基因检测手段进行肺癌早期诊断，但是基因的表达受多种因素影响，通过检测基因仍然与实际表达存在一定的误差。这其中，利用自身抗体进行肺癌早期诊断值得重视。3、早在上世纪60年代，robert w.baldwin就已经证实在癌症发展的早期，人体免疫系统可以产生自身抗体。由于自身抗体的产生是免疫系统对肿瘤相关抗原的体液免疫反应，因此血清中自身抗体的水平远比常规的抗原水平高。并且，由于抗原-抗体反应的高特异性和高敏感性，即使在血清中有大量白蛋白干扰的情况下，自身抗体也较其它标志物更易准确检测到。换言之，肿瘤自身抗体比相应肿瘤抗原更容易被检测到。因此，通过检测肺癌自身抗体进行肺癌早期诊断具有更加广阔的前景。4、在相关技术中，如chapman等使用酶联免疫法比较了采用6个抗原蛋白(p53、ny-eso-1、cage、gbu4-5、annexin i和soqprt)和7个抗原蛋白(p53、ny-eso-1、cage、gbu4-5、soqprt、hud和mage a4)来检测肺癌患者和健康对照组血清中相应自身抗体的含量，结果显示采用6个自身抗体联合检测得到的敏感性和特异性分别为39％和89％，而采用7个自身抗体联合检测的敏感性和特异性分别为41％和91％。又如公开号为cn103869086a的中国发明专利记载了一种血清自身抗体检测试剂盒，该试剂盒包括选自p53、annexin1、cage、ny-eso-1、hud、cyclin d、pgp9.5、gbu4-5、mdm2、gage7、xage1b、soqprt、mage a1和mage a4等14种抗原蛋白中的五种或以上的组合的抗原蛋白，但是其发现gbu4-5、soqprt、hud、cyclind、ny-eso-1、annexin1、mage a1和xage1b相对应的抗体在中国正常人和肺癌患者中几乎没有区别，不适于在中国人中用作早期或辅助诊断的生物标志物，这样的差距有可能是由于检测人种的不同造成的差异，并具体公开了12种组合及其对应的敏感性和特异性，包括4～7个抗原蛋白的组合，其敏感性为27.5％～62.5％，特异性为74.5％～92.7％。当选取4个抗原蛋白(p53、ny-eso-1、p62、cage)时，其敏感性为27.5％，特异性为87.3％，因此并未采用4个抗原蛋白的技术方案。又如公开号为wo2018187228a1、wo2020069637a1和us20220003768a1的发明专利，记载了本技术人早期的研究成果，包括ethe1、p53、ctag1a、c1qtnf1、teqprt64、cldn2、nsg1和hras 8种抗原蛋白中的3～5种抗原蛋白的组合，进一步利用iga筛选了28种抗原蛋白与上述8种抗原蛋白组合，并对其中任意2～6种抗原蛋白的组合进行评估，公开了200种组合的结果，其中67种组合物辨别能力为高，67种为中等，其余为低。又如公开号为cn116482365a的中国发明专利记载了用于检测血清抗体的蛋白组合物及其应用，包括xage1a、rbpj、ceacam5、nsg1、tp53、ddx4、nudt14、pgk1、krt19、magec2和sult2b1共计11个抗原蛋白，将其任意两种或多种组合，当组合蛋白的数量为2时，选用xage1a和ceacam5两种蛋白效果最好(敏感性为45.45％，特异性为100％，平均值为72.73％)；当组合蛋白的数量为3时，选用xage1a、ceacam5和rbpj三种蛋白效果最好(敏感性为59.10％，特异性为94.74％，平均值为76.91％)；当选用全部11个蛋白时，其敏感性为86.36％，特异性为84.21％，平均值为85.29％。5、由此可见，抗原蛋白的选择，包括抗原蛋白种类和抗原蛋白数量，显著影响了肺癌早期诊断的敏感性和特异性。是否有其余更加适用的抗原蛋白？新的抗原蛋白组合是否具有临床意义？新的抗原蛋白组合是否能够提高肺癌早期诊断的敏感性和特异性？随着我国肿瘤发病率的逐年攀升，对高敏感性的、高通量的、可推广使用的自身抗体的检测方法成为业界急需解决的一个问题。技术实现思路1、1.要解决的问题2、本技术针对现有技术中基于肺癌自身抗体的肺癌早期诊断方法的敏感性和特异性需要进一步提高的问题，在前期研究的基础上，进一步筛选了肺癌相关抗原，并将筛选的肺癌相关抗原进行组合，并将其用于检测肺癌抗体，进一步用于肺癌的早期诊断。3、2.技术方案4、为了解决上述问题，本技术所采用的技术方案如下：5、本技术提供了蛋白组合物在制备用于肺癌早期诊断产品中的应用，该产品包含蛋白组合物，该蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53和mmrn2，该诊断产品利用蛋白组合物检测血清中肺癌自身igg抗体，从而用于肺癌早期诊断。6、进一步地，上述蛋白组合物还包括抗原蛋白qprt、krcc1、brsk2、serpinb3、mterf4、bcl7a、col5a2、trim33和grp中的任意一种或多种。7、进一步地，上述蛋白组合物还包括抗原蛋白qprt、krcc1、brsk2、serpinb3、mterf4、bcl7a、col5a2、trim33和grp中的任意一种。8、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和mterf4。9、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和qprt。10、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和brsk2。11、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和trim33。12、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和col5a2。13、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和krcc1。14、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和serpinb3。15、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和bcl7a。16、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和grp。17、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和mterf4，还包括抗原蛋白qprt、krcc1、brsk2、serpinb3、bcl7a、col5a2、trim33和grp中的任意一种或多种。18、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2和mterf4，还包括抗原蛋白qprt、krcc1、brsk2、serpinb3、bcl7a、col5a2、trim33和grp中的任意一种。19、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和brsk2。20、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和col5a2。21、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和qprt。22、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和trim33。23、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和krcc1。24、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和serpinb3。25、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和bcl7a。26、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和grp。27、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和brsk2，还包括抗原蛋白qprt、krcc1、serpinb3、bcl7a、col5a2、trim33和grp中的任意一种或多种。28、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4和brsk2，还包括抗原蛋白qprt、krcc1、serpinb3、bcl7a、col5a2、trim33和grp中的任意一种。29、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和col5a2。30、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和qprt。31、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和trim33。32、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和krcc1。33、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和serpinb3。34、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和bcl7a。35、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和grp。36、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和col5a2，还包括抗原蛋白qprt、krcc1、serpinb3、bcl7a、trim33和grp中的任意一种或多种。37、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2和col5a2，还包括抗原蛋白qprt、krcc1、serpinb3、bcl7a、trim33和grp中的任意一种。38、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2和qprt。39、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2和trim33。40、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2和krcc1。41、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2和serpinb3。42、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2和bcl7a。43、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2和grp。44、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2和qprt，还包括抗原蛋白krcc1、serpinb3、bcl7a、trim33和grp中的任意一种或多种。45、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2和qprt，还包括抗原蛋白krcc1、serpinb3、bcl7a、trim33和grp中的任意一种。46、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt和krcc1。47、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt和trim33。48、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt和serpinb3。49、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt和bcl7a。50、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt和grp。51、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt和krcc1，还包括抗原蛋白serpinb3、bcl7a、trim33和grp中的任意一种或多种。52、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt和krcc1，还包括抗原蛋白serpinb3、bcl7a、trim33和grp中的任意一种。53、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1和trim33。54、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1和serpinb3。55、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1和bcl7a。56、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1和grp。57、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1和trim33，还包括抗原蛋白serpinb3、bcl7a和grp中的任意一种或多种。58、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1和trim33，还包括抗原蛋白serpinb3、bcl7a和grp中的任意一种。59、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1、trim33和serpinb3。60、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1、trim33和bcl7a。61、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1、trim33和grp。62、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1、trim33和serpinb3，还包括抗原蛋白bcl7a和/或grp。63、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1、trim33、serpinb3和bcl7a。64、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1、trim33、serpinb3和grp。65、进一步地，上述蛋白组合物包括抗原蛋白ddx53、mmrn2、mterf4、brsk2、col5a2、qprt、krcc1、trim33、serpinb3、bcl7a和grp。66、进一步地，上述抗原蛋白ddx53是包括具有如seq id no:1所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:1有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:1所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，mshwapewkraeanprdlgaswdvrgsrgsgwsgpfghqgpraagsrepplcfkiknnmvgvvigysgskikdlqhstntkiqiingeseakvrifgnremkakakaaietlirkqesynsessvdnaasqtpigrnlgrndivgeaeplsnwdriraavvecekrkwadlppvkknfyieskatscmsemqvinwrkenfnitcddlksgekrlipkptcrfkdafqqypdllksiirvgilkptpiqsqawpiilqgidlivvaqtgtgktlsylmpgfihldsqpisreqrngpgmlvltptrelalhveaecskysykglksiciyggrnrngqiediskgvdiiiatpgrlndlqmnnsvnlrsitylvideadkmldmefepqirkilldvrprqtvmtsatwpdtvrqlalsylkdpmivyvgnlnlvavntvkqniivttekekraltqefvenmspndkvimfvsqkhiaddlssdfniqgisaeslhgnseqsdqeravedfksgnikilittdivsrgldlndvthvynydfprnidvyvhrvgyigrtgktgtsvtlitqrdskmagelikildranqsvpedlvvmaeqyklnqqkrhretrsrepgqrrkefyfls(seq id no:1)。67、进一步地，上述抗原蛋白mmrn2是包括具有如seq id no:2所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:2有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:2所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，milsllfslggplgwgllgawaqasstslsdlqssrtpgvwkaeaedtgkdpvgrnwcpypmsklvtllalcktekflihsqqpcpqgapdcqkvkvmyrmahkpvyqvkqkvltslawrccpgytgpncehhdsmaipepadpgdshqepqdgpvsfkpghlaavinevevqqeqqehllgdlqndvhrvadslpglwkalpgnltaavmeanqtghefpdrsleqvllphvdtflqvhfspiwrsfnqslhsltqairnlsldveanrqaisrvqdsavaradfqelgakfeakvqentqrvgqlrqdvedrlhaqhftlhrsiselqadvdtklkrlhkaqeapgtngslvlatpgagarpepdslqarlgqlqrnlselhmttarreeelqytledmratltrhvdeikelysesdetfdqiskverqveelqvnhtalrelrvilmekslimeenkeeverqllelnltlqhlqgghadlikyvkdcncqklyldldviregqrdatraleetqvslderrqldgsslqalqnavdavslavdahkaegeraraatsrlrsqvqalddevgalkaaaaearhevrqlhsafaalledalrheavlaalfgeevleemseqtpgplplsyeqirvalqdaasglqeqalgwdelaarvtaleqasepprpaehlepshdagreeaattalaglarelqslsndvknvgrcceaeagagaaslnasldglhnalfatqrsleqhqrlfhslfgnfqglmeanvsldlgklqtmlsrkgkkqqkdleaprkrdkkeaeplvdirvtgpvpgalgaalweagspvafyasfsegtaalqtvkfnttyinigssyfpehgyfrapergvylfavsvefgpgpgtgqlvfgghhrtpvcttgqgsgstatvfamaelqkgervwfeltqgsitkrslsgtafggflmfkt(seq idno:2)。68、进一步地，上述抗原蛋白qprt是包括具有如seq id no:3所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:3有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:3所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，mdaeglalllppvtlaalvdswlredcpglnyaalvsgagpsqaalwakspgilagqpffdaiftqlncqvswflpegsklvpvarvaevrgpahclllgervalntlarcsgiasaaaaaveaargagwtghvagtrkttpgfrlvekygllvggaashrydlgglvmvkdnhvvaaggvekavraarqaadfalkvevecsslqeavqaaeagadlvlldnfkpeelhptatvlkaqfpsvaveasggitldnlpqfcgphidvismgmltqaapaldfslklfakevapvpkih(seq id no:3)。69、进一步地，上述抗原蛋白krcc1是包括具有如seq id no:4所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:4有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:4所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，mkhskktydsfqdeledyikvqkarglepktcfrkmkgdyletcgykgevnsrptyrmfdqrlpsetiqtyprscnipqtvenrlpqwlpahdsrlrldslsycqftrdcfsekpvplnfnqqeyicgshgvehrvykhfssdnststhqashkqihqkrkrhpeegrekseeerskhkrkksceeidldkhksiqrkkteveietvhvsteklknrkekksrdvvskkeerkrtkkkkeqgqerteeemlwdqsilgf(seq id no:4)。70、进一步地，上述抗原蛋白brsk2是包括具有如seq id no:5所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:5有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:5所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，msnltpesspelakkswfgnfislekeeqifvvikdkplssikadivhaflsipslshsvisqtsfraeykatg gpavfqkpvkfqvdityteggeaqkengiysvtftllsgpsrrfkrvvetiqaqllsthdppaaqhlseppp papglswgaglkgqkvatsyessl(seq id no:5)。71、进一步地，上述抗原蛋白serpinb3是包括具有如seq id no:6所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:6有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:6所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，mnslseantkfmfdlfqqfrkskennifyspisitsalgmvllgakdntaqqikkvlhfdqvtenttgkaatyhvdrsgnvhhqfqklltefnkstdayelkianklfgektylflqeyldaikkfyqtsvesvdfanapeesrkkinswvesqtnekiknlipegnigsnttlvlvnaiyfkgqwekkfnkedtkeekfwpnkntyksiqmmrqytsfhfasledvqakvleipykgkdlsmivllpneidglqkleekltaeklmewtslqnmretrvdlhlprfkveesydlkdtlrtmgmvdifngdadlsgmtgsrglvlsgvlhkafvevteegaeaaaatavvgfgssptstneefhcnhpflffirqnktnsilfygrfssp(seq id no:6)。72、进一步地，上述抗原蛋白mterf4是包括具有如seq id no:7所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:7有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:7所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，maafgrqvldwhrlipltwacmarqtphlgeqrrttasllrklttasnggvieelscvrsnnyvqepecrrnlvqcllekqgtpvvqgslelervmsslldmgfsnahinellsvrrgaslqqlldiisefillglnpepvcvvlkkspqllklpimqmrkrssylqklglgegklkrvlyccpeiftmrqqdindtvrllkekclftvqqvtkilhscpsvlredlgqleykfqyayfrmgikhpdivkseylqysltkikqrhiylerlgryqtpdkkgqtqipnpllkdilrvseaeflartartsveefqvfkkllareeeesesstsddkrasldededdddeedndeddndeddddedddeaedndededddeee(seq id no:7)。73、进一步地，上述抗原蛋白bcl7a是包括具有如seq id no:8所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:8有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:8所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，msgrsvraetrsrakddikrvmaaiekvrkwekkwvtvgdtslriykwvpvtepkvddknknkkkgkdekcgsevttpenssspgmmdmhddnsnqssiadaspikqenssnsspapepnsavpsdgteakvdeaqadgkehpgaedasdeqnsqssmehsmnssekvdrqpsgdsglaaetsaisqdlegvppskkmkleasqqnseem(seq id no:8)。74、进一步地，上述抗原蛋白col5a2是包括具有如seq id no:9所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:9有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:9所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，mpgergrlgpqgapgqrgahgmpgkpgpmgplgipgssgfpgnpgmkgeagptgppgepgdpgpmgpigsrgpegppgkpgedgepgrngnpgevgfagspgargfpgapglpglkghrghkglegpkgevgapgskgeagptgpmgdpgtvgppgpvgergapgnrgfpgsdglpgpkgaqgergpvgssgpkgsqgdpgrpgepglpgargltgnpgvqgpegklgplgapgedgrpgppgsigirgqpgsmglpgpkgssgdpgkpgeagnagvpgqrgapgkdgevgpsgpvgppglagergeqgppgptgfqglpgppgppgeggkpgdqgvpgdpgavgplgprgergnpgergepgitglpgekgmagghgpdgpkgspgpsgtpgdtgppglqgmpgergiagtpgpkgdrggigekgaegtagndgarglpgplgppgpagptgekgepgprglvgppgsrgnpgsrgengptgavgfagpqgpdgqpgvkgepgepgqkgdagspgpqglagspgphgpngvpglkggrgtqgppgatgfpgsagrvgppgpagapgpagplgepgkegppglrgdpgshgrvgdrgpagppggpgdkgdpgedgqpgpdgppgpagttgqrgivgmpgqrgergmpglpgpagtpgkvgptgatgdkgppgpvgppgsngpvgepgpegpagndgtpgrdgavgergdrgdpgpaglpgsqgapgtpgpvgapgdagqrgdpgsrgpigppgragkrglpgpqgprgdkgdhgdrgdrgqkghrgftglqglpgppgpngeqgsagipgpfgprgppgpvgpsgkegnpgplgpigppgvrgsvgeagpegppgepgppgppgppghltaalgdimghydesmpdplpeftedqaapddknktdpgvhatlkslssqietmrspdgskkhpartcddlklchsakqsgeywidpnqgsvedaikvycnmetgetcisanpssvprktwwaskspdnkpvwygldmnrgsqfaygdhqspntaitqmtflrllskeasqnityicknsvgymddqaknlkkavvlkgandldikaegnirfryivlqdtcskrngnvgktvfeyrtqnvarlpiidlapvdvggtdqefgveigpvcfv(seq id no:9)。75、进一步地，上述抗原蛋白trim33是包括具有如seq id no:10所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:10有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:10所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，maenkgggeaesggggsgsapvtagaagpaaqeaeppltavlveeeeeeggragaeggaagpddggvaaassgsaqaasspaasvgtgvaggavstpapapasapapgpsagpppgppaslldtcavcqqslqsrreaepkllpclhsfclrclpeperqlsvpipggsngdiqqvgvircpvcrqecrqidlvdnyfvkdtseapsssdekseqvctscednasavgfcvecgewlcktcieahqrvkftkdhlirkkedvsesvgasgqrpvfcpvhkqeqlklfcetcdrltcrdcqllehkehryqfleeafqnqkgaienllakllekknyvhfaatqvqnrikevnetnkrveqeikvaiftlineinkkgksllqqlenvtkerqmkllqqqnditglsrqvkhvmnftnwaiasgsstallyskrlitfqlrhilkarcdpvpaangairfhcdptfwaknvvnlgnlvieskpapgytpnvvvgqvppgtnhisktpgqinlaqlrlqhmqqqvyaqkhqqlqqmrmqqppapvpttttttqqhprqaapqmlqqqpprlisvqtmqrgnmncgafqahqmrlaqnaaripgiprhsgpqysmmqphlqrqhsnpghagpfpvvsvhnttinptspttatmananrgptspsvtaielipsvtnpenlpslpdippiqledagsssldnllsryisgshlppqptstmnpspgpsalspgssglsnshtpvrppstsstgsrgscgssgrtaektslsfksdqvkvkqepgtedeicsfsggvkqektedgrrsacmlsspessltpplstnlhleseldalaslenhvkiepadmnesckqsglsslvngkspirslmhrsariggdgnnkdddpnedwcavcqnggdllccekcpkvfhltchvptllsfpsgdwictfcrdigkpeveydcdnlqhskkgktaqglspvdqrkcerlllylychelsiefqepvpasipnyykiikkpmdlstvkkklqkkhsqhyqipddfvadvrlifkncerfnemmkvvqvyadtqeinlkadsevaqagkavalyfedklteiysdrtfaplpefeqeeddgevtedsdedfiqprrkrlksderpvhik(seq id no:10)。76、进一步地，上述抗原蛋白grp是包括具有如seq id no:11所示的氨基酸序列的多肽，或是包括具有与序列seq id no:11有至少80％同源性且具有相同或基本相同功能的多肽，或是具有seq id no:11所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸而形成的具有相同或基本相同功能的多肽，mrgrelplvllalvlclaprgravplpagggtvltkmyprgnhwavghlmgkkstgesssvsergslkq qlreyirweeaarnllglieakenrnhqppqpkalgnqqpswdsedssnfkdvgskgkvgrlsapgsqr egrnpqlnqq(seq id no:11)。77、进一步地，上述至少80％同源性包括具有80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同源性。78、进一步地，上述抗原蛋白表达于酵母细胞中，并经过纯化获得。79、本技术还提供了上述抗原蛋白的制备方法，具体包括如下步骤：80、(1)采用gateway高通量克隆技术，将抗原蛋白的全长cdna克隆到酵母表达载体pegh-a中，构建gst融合蛋白的酵母表达质粒；81、(2)将酵母表达质粒转化到大肠杆菌细胞中，进行质粒扩增和纯化；对纯化的质粒进行酶切和dna测序验证，选取正确的质粒转化到酵母细胞中；82、(3)挑取转化好的酵母克隆，接种于sc-ura/glucose液体培养基中，30℃振荡培养20～24小时；转接至sc-ura/raffinose(棉子糖)液体培养基中，30℃振荡培养过夜；第二天测od600吸光度值大于1.0时，加入半乳糖至终浓度为2％，继续振荡培养过夜；离心收集酵母细胞，用无菌水洗2次；83、(4)加入裂解液和镍珠，振荡破碎细胞后，离心回收上清；在上清中加入glutathione sepharose 4b beads，混匀，4℃摇动1小时；离心收集beads，用洗液i和洗液ii各清洗3次；加入洗脱液，短暂震荡将beads重悬，4℃摇动1小时；离心，取上清，即获得抗原蛋白。84、进一步地，上述抗原蛋白的制备方法中，裂解液的成分包括：50mm tris,ph 7.5，100mm nacl，1mmegta，10％ glycerol，0.1％ tritonx-100，0.1％beta-mercaptoethanol(bme)，1mm pmsf(200mm in isopropanol)，50μmllnl(50mm in dmso)，1μm mg-132(50mmin dmso)，roche protease inhibitor tablets(without edta)1in 50ml。85、进一步地，上述抗原蛋白的制备方法中，洗液i成分包括：50mm tris,ph 7.5，500mm nacl，1mm egta，10％ glycerol，0.1％ tritonx-100，0.1％beta-mercaptoethanol(bme)，1mm pmsf。86、进一步地，上述抗原蛋白的制备方法中，洗液ii成分包括：50mm hepes ph 7.5，100mm nacl，1mm egta，10％ glycerol，0.1％beta-mercaptoethanol(bme)，1mm pmsf。87、进一步地，上述抗原蛋白的制备方法中，洗脱液成分包括：50mm hepes ph 8.0，100mm nacl，30％glycerol，40mm glutathione(reduced form)，0.03％ tritonx-100。88、本技术还提供了一种固相载体，该载体包被有上述任一所述的蛋白组合物。89、本技术还提供了上述蛋白组合物在制备用于肺癌早期诊断试剂盒中的应用，该试剂盒包含上述任一项的蛋白组合物，用于检测受试者血清中肺癌自身igg抗体，从而用于肺癌早期诊断。90、本技术还提供了一种用于肺癌早期诊断的试剂盒，该试剂盒包含上述任一的蛋白组合物，该试剂盒可以利用蛋白组合物检测受试者血清中肺癌自身igg抗体，从而用于肺癌早期诊断。91、进一步地，上述试剂盒所用的信号检测方法包括可见光显色法、化学发光法、荧光发光法。92、进一步地，上述试剂盒还包括显色剂、血清稀释缓冲液、洗液和终止液。93、本技术还提供了上述一种用于肺癌早期诊断的试剂盒在肺癌早期诊断中的应用。94、进一步地，上述应用包括如下步骤：95、s1：获取受试者血清样本；96、s2：使用试剂盒检测受试者血清样本中自身抗体的表达水平；97、s3：将检测的血清样本中自身抗体的表达水平与预设值比较，如大于预设值，则判断患有肺癌。98、本技术还提供了一种用于肺癌早期诊断的设备，该设备包括：99、样本获取模块，用于获取受试者血清样本；100、样本检测模块，包括上述任一用于肺癌早期诊断的试剂盒，用于检测受试者血清样本中自身抗体的表达水平；101、数据处理及结果输出模块：将样本检测模块检测的受试者血清样本中自身抗体的表达水平与预设值比较，大于预设值则输出患有肺癌的结果，其他则输出未患肺癌的结果。102、3.有益效果103、本技术与现有技术相比，其有益效果在于：104、(1)本技术提供的蛋白组合物及肺癌早期诊断试剂盒，其中抗原蛋白ddx53、mmrn2、qprt、krcc1、brsk2、serpinb3、col5a2和grp均为本技术新筛选的抗原蛋白，其中ddx53和mmrn2两个抗原蛋白的组合，用于检测抗体并进行肺癌早期诊断，其敏感性为58％，特异性为100％，能以较少的抗原蛋白达到相似或更优的效果。105、(2)本技术提供的本技术提供的蛋白组合物及肺癌早期诊断试剂盒，选用ddx53和mmrn2两个抗原蛋白的组合，或与抗原蛋白qprt、krcc1、brsk2、serpinb3、mterf4、bcl7a、col5a2、trim33和grp中的任意一种或多种组合，其敏感性与特异性的平均值(discriminative ability)为79％～93％，提高了肺癌早期诊断的敏感性和特异性。当前第1页12