1.一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法,其特征在于:所述待测溶液中适配体的浓度为8-15μmol/l。
3.根据权利要求1所述的一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法,其特征在于:所述缓冲液的浓度为10~50mmol/l,ph为6~9。
4.根据权利要求1所述的一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法,其特征在于:所述中性标记物为可的松。
5.根据权利要求1所述的一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法,其特征在于:所述电泳缓冲液中细胞色素c的浓度为0~14μmol/l。
6.根据权利要求1所述的一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法,其特征在于,步骤3)的具体过程为:第一次进样:采用1psi进样压力5s进样的方法向毛细管中进样;分离:将毛细管进样端插入缓冲液槽,施加0.8psi的压力15s,将待测溶液推入到毛细管位于毛细管电泳仪设备的恒温区,向毛细管两端施加-5kv的分离电压1~2min,使待测溶液向检测窗口迁移,但不能经过检测窗口;第二次进样:采用与第一次进样相同的方法向毛细管中进样,且对照溶液中中性标记物的浓度与待测溶液中中性标记物的浓度相同;检测:将毛细管进样端插入缓冲液槽,施加0.8psi压力,将两次进样的样品推向毛细管的检测窗口,工作站上出现三个峰,记录三个峰的出峰时间。
7.根据权利要求1所述的一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法,其特征在于,步骤3)中毛细管电泳参数为:进样压力为1.0psi,进样时间为5.0s,分离电压为-5kv,检测波长为260nm,柱温为25℃;每次进样前,使用含有相应浓度细胞素色素c的电泳缓冲液以10.0psi的压力冲洗毛细管5min。
8.根据权利要求1所述的一种测定适配体与蛋白质结合常数的毛细管电泳方法,其特征在于,步骤5)中毛细管电泳参数为:中性标记物为200μmol/l可的松,进样压力为1.0psi,进样时间为5.0s,推动压力为1.5psi,检测时间为5min,检测波长为260nm,柱温为25℃;每次进样前,使用含有相同浓度细胞素色素c的电泳缓冲液以压力10.0psi冲洗毛细管3min。