一种无精子症的诊断性标志物及其在无精子症诊断中的应用和试剂盒

本发明涉及生物，具体涉及一种无精子症的诊断性标志物及其在无精子症诊断中的应用和试剂盒。

背景技术：

1、生物标志物是临床中广泛用于诊断、疗效评估和预后预测的工具，同时具有生物学的物质性以及和人体生理病理关联的计量性。生物标志物包括诊断性标注物和预后性标志物。其中，诊断性标注物是用于检测或确认疾病状态，或识别疾病亚型的生物标志物。在临床研发中，诊断性标志物正成为极为重要的工具，有助于精准发现获益/风险人群、指导伴随诊断开发、优化研发策略，提高研发的成功率。以小分子物质作为诊断性标志物具有检测方便的优势。基于最新的研究进展以及对代谢组学技术的应用，探索精浆代谢小分子作为无精子症的诊断性标志物具有巨大潜力。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种精浆样本中的无精子症的诊断性标志物，并提供这种诊断性标志物辅助诊断无精子症的应用，以及用于以液质联用仪检测这种诊断性标志物的试剂盒。

2、为达到上述目的，本发明的申请人通过代谢组学分析了80例健康男性及116例无精子症患者的精浆样本，进行生物标志物的筛查，并将各种小分子生物标志物与无精子症进行关联性分析，从而发现13-羟基十八二烯酸协同对无精子症的有无具有指示作用。

3、从而，第一方面，本发明提供了13-羟基十八二烯酸作为无精子症的诊断性标志物的应用，待测个体提供的检测样本为精浆。

4、第二方面，本发明提供了13-羟基十八二烯酸在无精子症诊断中的应用，检测精浆中13-羟基十八二烯酸的有无，检测结果为精浆中不含13-羟基十八二烯酸时，所述待测个体患有无精子症，检测结果为精浆中含有13-羟基十八二烯酸时，所述待测个体不患无精子症。

5、可选地，所述检测精浆中13-羟基十八二烯酸的有无的方法为以液质联用仪进行检测。

6、可选地，所述检测精浆中13-羟基十八二烯酸的有无的方法为内标法，内标物包括：

7、内标a，肌酐﹑缬氨酸、烟酸、胸腺嘧啶、戊二酸、l-苯基丙胺酸、n-乙酰对氨基酚、马尿酸八种物质的氘标同位素内标；

8、内标b，十五烷酸的氩标同位素内标；

9、内标c，二十四烷酸的氘标同位素内标。

10、第三方面，本发明提供了一种用于无精子症的辅助诊断的试剂盒，用于上述应用，所述试剂盒包括检测13-羟基十八二烯酸的试剂。

11、可选地，所述检测13-羟基十八二烯酸的试剂适用于通过质谱法和内标法进行定性和定量检测。

12、可选地，所述检测13-羟基十八二烯酸的试剂包括13-羟基十八二烯酸标准品和所述内标物。

13、可选地，所述检测13-羟基十八二烯酸的试剂还包括流动相，所述流动相包括

14、流动相a：含0.1％的甲酸的水；

15、流动相b：含0.1％的甲酸的乙腈。

16、可选地，所述试剂盒还包括色谱柱。

17、根据本发明的第一方面，以精浆作为检测样本，具有取样简单无创、检测样本成分稳定的优势。通过发现并研究无精子症的诊断性标志物，有望提供一种更客观的方法来评估男性生育能力，并深入理解无精子症发生的机制。以13-羟基十八二烯酸作为无精子症的诊断性标志物，其与疾病结局关联强，能够有效地提高无精子症诊断的敏感性和特异性。

18、根据本发明的第二方面，通过检测生物标志物在精浆中的含量，判断个体是否患有无精子症，能够有效提高无精子症的检测效率，降低不孕不育病因筛查的难度。

19、进一步地，以液质联用法检测13-羟基十八二烯酸的有无，样本处理技术简单，仪器分析迅速准确，且采用设备为常见设备，常用于临床诊断，适用范围较广。

20、进一步地，内标法对进样量不严格要求，测定的结果也较为准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了进样量、仪器不稳定等变化所引起的误差，只对欲分析的组分峰做校正，有助于提高检测的准确度。

21、根据本发明的第三方面，检测试剂盒有助于提高13-羟基十八二烯酸的含量检测的效率，降低检测中相关试剂的差异，提高实验数据的重复性。

22、上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。

技术特征：

1.一种无精子症的诊断性标志物，其特征在于，所述诊断性标志物为13-羟基十八二烯酸，且待测个体提供的检测样本为精浆。

2.一种如权利要求1所述的诊断性标志物在无精子症诊断中的应用，其特征在于，检测精浆中13-羟基十八二烯酸的有无，检测结果为精浆中不含13-羟基十八二烯酸时，所述待测个体患有无精子症，检测结果为精浆中含有13-羟基十八二烯酸时，所述待测个体不患无精子症。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测精浆中13-羟基十八二烯酸的有无的方法为以液质联用仪进行检测。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测精浆中13-羟基十八二烯酸的有无的方法为内标法，内标物包括：

5.一种用于无精子症的辅助诊断的试剂盒，其特征在于，用于权利要求4所述应用，所述试剂盒包括检测13-羟基十八二烯酸的试剂。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述检测13-羟基十八二烯酸的试剂包括13-羟基十八二烯酸标准品和所述内标物。

7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述检测13-羟基十八二烯酸的试剂还包括流动相，所述流动相还包括：

8.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还包括色谱柱。

技术总结
本发明提供了一种与无精子症相关的诊断性标志物13‑羟基十八二烯酸。本发明中，应用13‑羟基十八二烯酸检测男性精浆中13‑羟基十八二烯酸的有无，可对无精子症进行辅助诊断，进而对患者进行病情监测。以精浆做为检测样本对无精子症进行辅助诊断，具有无创、高效和高灵敏度的优势。本发明还提供了一种用于以液质联用仪进行内标法检测13‑羟基十八二烯酸含量的试剂盒，能够有效降低检测所需的准备时间，且有助于提高检测的重复性。

技术研发人员：沙家豪,袁艳,王嘉琛,陈敏健,杨晓玉
受保护的技术使用者：南京医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/29