一种胃痞消颗粒的含量测定方法与流程

本申请涉及药物含量测定，特别涉及一种胃痞消颗粒的含量测定方法。

背景技术：

1、胃痞消颗粒为德众药业研发的一种中药复方制剂，主要由太子参、石斛、三七、莪术、郁金、白芍、白花蛇舌草等11味中药材组成，具有益气养阴，化瘀解毒、行气止痛的功效，用于慢性萎缩性胃炎见胃痛灼热、痞满嘈杂、乏力纳差、口干苦、大便干结等辨证为“气阴两虚兼痰热内结证”者，临床疗效显著，深受患者欢迎。

2、胃痞消颗粒法定标准为国家食品药品监督管理局标准颁布件(标准编号：ybz00752009)，其中收载了三七中三七总皂苷的含量测定方法。该检测方法采用高效液相色谱法紫外检测器，于203nm波长处测定三七皂苷r1、人参皂苷rg1和人参皂苷rb1的总含量；该方法采用乙酸乙酯回流除去产品中挥发油及其他脂溶性成分的干扰，以甲醇超声提取三七皂苷类成分，加三氯甲烷萃取除杂，再用水饱和的正丁醇萃取待测成分，用1％氢氧化钠溶液洗涤除杂，用正丁醇饱和的水溶液洗涤除去多余的氢氧化钠残留。再通过c18固相萃取小柱，分别用水、10％甲醇、30％甲醇洗脱除杂，最后用70％甲醇洗脱收集待测成分。

3、但经过多年操作实践，发现该方法存在以下不足：1、由于203nm检测波长是紫外末端吸收，胃痞消颗粒中所含多种中药化学物质在该波长处均有紫外吸收，对三个待测成分的测定干扰较大，故供试品溶液制备方法操作步骤极其繁琐，包含回流、超声、液液萃取、洗涤除杂和固液萃取等多个步骤，且具有相当操作难度，对检验操作人员提出较高要求，导致不同检验人员之间检验结果差异较大，方法重现性差。2、该供试品溶液制备方法耗费大量试剂和时间，人力物力成本高。3、该方法使用三氯甲烷除杂，三氯甲烷毒性较大，主要作用于人体中枢神经系统，对心、肝、肾有损害，被收录于世卫组织国际癌症研究机构公布的2b类致癌物清单中，且对环境有危害，对水体可造成污染，不利于人员健康和环境保护。4、待测成分的紫外吸收峰较小，待测成分峰附近的杂质峰较多，对色谱柱要求较高，测定准确度难以保证。5、固液萃取操作步骤中规定了某个具体型号的spe c18固相萃取小柱，该商品小柱存在市场供应不确定性，给上述方法的推广应用带来一定的难度。因此，胃痞消颗粒原法定质量标准的含量测定方法亟待改进。

技术实现思路

1、本申请的主要目的是提供一种胃痞消颗粒的含量测定方法，旨在解决现有技术中的胃痞消颗粒含量测定方法重现性和测定准确度相对较差，成本高，且不利于检测人员健康和环境保护的技术问题。

2、一种胃痞消颗粒的含量测定方法，包括以下步骤：

3、s1.取人参皂苷rg1、人参皂苷rb1、三七皂苷r1对照品制备混合对照品溶液；

4、s2.取胃痞消颗粒制备供试品溶液；

5、s3.分别对所述混合对照品溶液及所述供试品溶液进行高效液相色谱测定；

6、其中，步骤s3中的色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，以水为流动相b进行梯度洗脱，采用蒸发光散射检测器检测供试品溶液中三七皂苷r1、人参皂苷rg1和人参皂苷rb1的含量。

7、优选地，步骤s2包括如下步骤：取胃痞消颗粒研细后精密称定，置于容器中，向其中精密加入甲醇，密塞后称定重量，超声处理，放冷后再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液，蒸干，残渣加氨试液分次溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至另一容器中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得所述供试品溶液。

8、优选地，用水饱和的正丁醇提取时的提取次数≥3次。

9、优选地，所述超声处理的时间≥45min。

10、优选地，步骤s3中的梯度洗脱条件为：0-50min：流动相a15～25％，流动相b 85～75％；50-78min：流动相a 25～38％，流动相b 75～62％；78～90min：流动相a 38～80％，流动相b 62～20％；90～95min：流动相a 80～15％，流动相b20～85％；95～103min：流动相a15％，流动相b 85％。

11、优选地，步骤s3中采用的色谱柱可为如下色谱柱中的任一项：phenomenex lunalc(2)c18、ecosil c18 aq或kromasil 100-5c18，所述色谱柱的规格为4.6×250mm，5μm。

12、优选地，步骤s3中的色谱条件还包括：流速0.7～1.3ml/min，柱温25-35℃。

13、优选地，步骤s1包括如下步骤：精密称取人参皂苷rg1对照品、人参皂苷rb1对照品及三七皂苷r1对照品，加甲醇，摇匀，即得到含三七皂苷r1、人参皂苷rg1、人参皂苷rb1的混合对照品溶液。

14、优选地，步骤s3中，所述对照品溶液的进样量为5～10μl，所述供试品溶液的进样量为5～15μl。

15、本申请的胃痞消颗粒的含量测定方法具有如下有益效果：胃痞消颗粒药味组成繁多，所含中药成分复杂，本发明对色谱条件和供试品溶液的制备均进行了特殊改进。在色谱条件方面，以蒸发光散射检测器代替原来的紫外检测器，使待测成分的峰响应明显增大，待测成分附近的色谱杂质峰明显减少，改善了峰分离度，提高了测定准确度。在供试品溶液的制备方面，省去了乙酸乙酯回流、三氯甲烷除杂，氢氧化钠溶液和正丁醇饱和的水洗涤、c18小柱固相萃取洗脱等多个繁琐步骤。采用本方案改进之后的胃痞消颗粒含量测定方法操作简便，重现性好，测定结果准确度高，经系统方法学验证，表明可用于胃痞消颗粒的质量控制，确保产品质量安全，稳定可控。且本含量测定方法操作耗时短，利于提高检测效率，所用试剂较原方法大大减少，降低了人力物力成本，避免了使用三氯甲烷等毒性大的溶剂，有利于人员健康和环境保护；同时，所用的试剂耗材均为常规品种，没有品牌型号等特殊要求，有利于本方法的推广应用。

技术特征：

1.一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，步骤s2包括如下步骤：取胃痞消颗粒研细后精密称定，置于容器中，向其中精密加入甲醇，密塞后称定重量，超声处理，放冷后再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液，蒸干，残渣加氨试液分次溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至另一容器中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得所述供试品溶液。

3.如权利要求2所述的一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，用水饱和的正丁醇提取时的提取次数≥3次。

4.如权利要求2所述的一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，所述超声处理的时间≥45min。

5.如权利要求1所述的一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，步骤s3中的梯度洗脱条件为：0-50min：流动相a15～25％，流动相b 85～75％；50-78min：流动相a 25～38％，流动相b 75～62％；78～90min：流动相a 38～80％，流动相b 62～20％；90～95min：流动相a 80～15％，流动相b 20～85％；95～103min：流动相a15％，流动相b 85％。

6.如权利要求1所述的一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，步骤s3中采用的色谱柱可为如下色谱柱中的任一项：phenomenex luna lc(2)c18、ecosilc18 aq或kromasil 100-5c18，所述色谱柱的规格为4.6×250mm，5μm。

7.如权利要求1或6所述的一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，步骤s3中的色谱条件还包括：流速0.7～1.3ml/min，柱温25-35℃。

8.如权利要求1所述的一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，步骤s1包括如下步骤：精密称取人参皂苷rg1对照品、人参皂苷rb1对照品及三七皂苷r1对照品，加甲醇，摇匀，即得到含三七皂苷r1、人参皂苷rg1、人参皂苷rb1的混合对照品溶液。

9.如权利要求1所述的一种胃痞消颗粒的含量测定方法，其特征在于，步骤s3中，所述对照品溶液的进样量为5～10μl，所述供试品溶液的进样量为5～15μl。

技术总结
本申请涉及药物含量测定技术领域，特别涉及一种胃痞消颗粒的含量测定方法。该含量测定方法包括以下步骤：取人参皂苷Rg<subgt;1</subgt;、人参皂苷Rb<subgt;1</subgt;、三七皂苷R<subgt;1</subgt;对照品制备混合对照品溶液；取胃痞消颗粒制备供试品溶液；分别对混合对照品溶液及供试品溶液进行高效液相色谱测定；色谱条件包括：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以水为流动相B进行梯度洗脱，采用蒸发光散射检测器检测供试品溶液中三七皂苷R<subgt;1</subgt;、人参皂苷Rg<subgt;1</subgt;和人参皂苷Rb<subgt;1</subgt;的含量。该方法操作简便，重现性好，测定结果准确度高，经系统方法学验证，表明可用于胃痞消颗粒的质量控制，确保产品质量安全，稳定可控。

技术研发人员：招嘉文,曾嘉铨,周莹乐,张志华
受保护的技术使用者：国药集团德众（佛山）药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/17