一种醋酸甲羟孕酮原料药中杂质F的测定方法与流程

本发明属于药品分析领域，尤其涉及一种醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法。

背景技术：

1、醋酸甲羟孕酮又称安宫黄体酮，是一种孕酮受体激动剂，主要用于治疗痛经、功能性闭经、功能性子宫出血、先兆流产及习惯性流产、子宫内膜异位症、晚期乳腺癌、子宫内膜腺癌及肾癌等，除此之外，需要时可作为雌激素及孕激素补充剂，有一定的市场前景和应用价值。

2、在醋酸甲羟孕酮原料药合成工艺路线中，催化氢化是重要的一环，当催化氢化反应过头，就会生成醋酸甲羟孕酮杂质f，该杂质在生成后，很难通过精制的方式去除，杂质f结构为：

3、

4、从结构式看，该物质无明显共轭结构，几乎没有紫外吸收，采用传统的薄层-紫外检测法或高效液相色谱-紫外检测法在末端吸收波长处检测，耗时长，灵敏度低，干扰大，无法准确定量。因此对产品质量控制而言，能准确检测杂质f含量的分析方法是必不可少的。

技术实现思路

1、针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，该方法检测时间短，操作简便且能够精确测定杂质含量。

2、本发明的目的通过以下技术方案实现：

3、一种醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，包括如下步骤：

4、(1)取醋酸甲羟孕酮原料药为供试品，配置成溶液，得到供试品溶液；

5、(2)取杂质f为对照品，配置成溶液，得到对照品溶液；

6、(3)分别取步骤(1)所述供试品溶液和步骤(2)所述对照品溶液，注入液相色谱仪中进行检测对应的峰面积，并按照如下公式，计算得到供试品中杂质f的含量：

7、

8、其中，ms为对照品的质量，p为对照品的纯度，ai为供试品中杂质f的峰面积，vi为供试品溶液的稀释倍数，vs为对照品溶液的稀释倍数，as为对照品溶液中杂质f的峰面积，mi为供试品的质量；ms和mi的单位统一。

9、优选的，步骤(1)中，醋酸甲羟孕酮原料药配置成溶液的方式为：采用步骤(3)所述液相色谱仪的流动相作为溶剂配置成溶液。

10、优选的，步骤(2)中，杂质f配置成溶液的方式为：采用步骤(3)所述液相色谱仪的流动相作为溶剂配置成溶液。

11、优选的，步骤(3)中，液相色谱仪采集色谱的时间为醋酸甲羟孕酮原料药主峰保留时间的3倍。

12、优选的，步骤(3)中，液相色谱仪的检测条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温为25℃～35℃，等度洗脱，进样量为10～20μl。

13、优选的，色谱柱的长度为100mm，内径为4.6mm，填料粒径为3μm。

14、优选的，步骤(3)中，液相色谱仪的流动相由水和乙腈按照35～45：55～65的体积比混合得到。通过调整流动相中水与乙腈的比例，能够使色谱图中醋酸甲羟孕酮主峰的保留时间在4～6min，杂质f色谱峰保留时间在7.5～9.5min。

15、优选的，流动相由水和乙腈按照40：60的体积比混合得到。

16、优选的，所述流动相的流速为0.8～1.2ml/min。

17、优选的，步骤(3)中，液相色谱仪为电喷雾高效液相色谱仪，检测条件为：雾化器温度为30～40℃，载气为高纯氮气。

18、与现有技术相比，本发明的有益效果包括：

19、与现有的薄层色谱-紫外检测法或高效液相-紫外检测法相比，本发明提供的检测方法更加便捷，操作简单，避免使用一些易挥发毒性的展开剂，使用简单溶剂乙腈和水，等度洗脱，实现醋酸甲羟孕酮与杂质f的有效分离，采用电喷雾高效液相色谱仪(cad检测器)，通过检测物质电荷，确定物质含量，灵敏度高，重复性好，结果准确，避免由于物质没有明显紫外吸收，导致检测信号低，灵敏度低，无法准确定量的情况。

技术特征：

1.一种醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，步骤(1)所述醋酸甲羟孕酮原料药配置成溶液的方式为：采用步骤(3)所述液相色谱仪的流动相作为溶剂配置成溶液。

3.根据权利要求1所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，步骤(2)所述杂质f配置成溶液的方式为：采用步骤(3)所述液相色谱仪的流动相作为溶剂配置成溶液。

4.根据权利要求1～3任一项所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，步骤(3)所述液相色谱仪的流动相由水和乙腈按照35～45：55～65的体积比混合得到。

5.根据权利要求4所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，流动相由水和乙腈按照40：60的体积比混合得到。

6.根据权利要求4所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.8～1.2ml/min。

7.根据权利要求1～3任一项所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，步骤(3)所述液相色谱仪采集色谱的时间为醋酸甲羟孕酮原料药主峰保留时间的3倍。

8.根据权利要求7所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，步骤(3)所述液相色谱仪的检测条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温为25℃～35℃，等度洗脱，进样量为10～20μl。

9.根据权利要求8所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，色谱柱的长度为100mm，内径为4.6mm，填料粒径为3μm。

10.根据权利要求1所述醋酸甲羟孕酮原料药中杂质f的测定方法，其特征在于，步骤(3)所述液相色谱仪为电喷雾高效液相色谱仪，检测条件为：雾化器温度为30～40℃，载气为高纯氮气。

技术总结
本发明公开了一种醋酸甲羟孕酮原料药中杂质F的测定方法。取醋酸甲羟孕酮原料药为供试品，配置成溶液，得到供试品溶液；取杂质F为对照品，配置成溶液，得到对照品溶液；分别取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪中进行检测对应的峰面积，并按照如下公式，计算得到供试品中杂质F的含量：其中，ms为对照品的质量，P为对照品的纯度，Ai为供试品中杂质F的峰面积，Vi为供试品溶液的稀释倍数，Vs为对照品溶液的稀释倍数，As为对照品溶液中杂质F的峰面积，mi为供试品的质量；ms和mi的单位统一。本发明提供的检测方法灵敏度高，重复性好，准确度好。

技术研发人员：邹谨霜,田玉林,罗浩,魏宁,胡惠珊
受保护的技术使用者：华中药业股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17