一种利用HPLC测定医药中间体酰氯亚氨基二苄中杂质含量的方法与流程

本发明属于药物分析，更具体地说，涉及一种利用hplc测定医药中间体酰氯亚氨基二苄中杂质含量的方法。

背景技术：

1、亚氨基二苄甲酰氯是合成卡马西平的关键中间体，卡马西平主要用于治疗癫痫，也常用于治疗外周神经痛、狂躁抑郁和心率失常等疾病，在临床上一般用作治疗癫痫的首选药物。

2、根据酰氯亚氨基二苄制备工艺中亚氨基二苄为关键原料，亚氨基二苄本身即为卡马西平特定杂质，且其残留会参与后续反应形成工艺杂质，对卡马西平的质量造成影响，故对其进行严格控制(不得过0.15％)。因此，提供一种测定中间体酰氯亚氨基二苄中杂质含量的方法对于原料药的生成和贮存具有重要意义。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的上述问题，本发明所要解决的技术问题在于提供一种利用hplc测定医药中间体酰氯亚氨基二苄中杂质含量的方法，使用该液相色谱法能够快速、有效、准确和可靠的分离检测出酰氯亚氨基二苄中杂质亚氨基二苄，有利于提高酰氯亚氨基二苄的产品质量。

2、为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：

3、一种利用hplc测定医药中间体酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，包括以下步骤：

4、1)配置供试品溶液、对照溶液和系统适用性溶液；

5、2)设置液相色谱检测条件：采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相由a相和b相组成，其中a相为三乙胺、甲酸和水的混合溶液，b相为甲醇和甲酸的混合溶液，进行梯度洗脱；

6、3)分别精密吸取供试品溶液、对照溶液和系统适用性溶液，注入液相色谱仪，开始检测并记录色谱图；

7、4)绘制标准曲线，得到标准曲线方程，计算医药中间体酰氯亚胺基二苄中杂质含量。

8、作为优选，所述步骤1)中，对照溶液的制备方法为：精密量取供试品溶液，加稀释剂稀释成每ml含酰氯亚氨基二苄0.2ug的溶液，作为对照溶液；系统适用性溶液的制备方法为：称取酰氯亚氨基二苄样品和亚氨基二苄对照品，用稀释剂超声溶解并稀释成每ml含亚氨基二苄0.3μg和酰氯亚氨基二苄0.2mg的溶液，作为系统适用性溶液。

9、作为优选，所述稀释剂为甲醇。

10、作为优选，所述步骤2)中，色谱柱的规格为250mm×4.6mm，填料粒径为5μm，柱温为35℃。

11、作为优选，所述步骤2)中，a相中三乙胺、甲酸和水的体积比为0.5:0.5:1000，b相中甲醇和甲酸的体积比为1000:0.25。

12、作为优选，所述步骤2)中，a相与b相的体积比为30:70，梯度洗脱流速为1ml/min。

13、作为优选，所述步骤3)中，液相色谱仪的检测波长为206nm。

14、作为优选，所述步骤4)中，根据色谱图，以峰面积a为纵坐标、浓度c为横坐标作线性回归方程，亚氨基二苄的线性方程为a＝101.83c+0.2744，酰氯亚胺基二苄的线性方程为a＝83.014c-0.4609。

15、作为优选，亚氨基二苄的线性浓度范围为0.0601～0.6013μg/ml，定量限为0.0601μg/ml，检测限为0.0150μg/ml；酰氯亚氨基二苄的线性浓度范围为0.0603～0.6033μg/ml，定量限为0.0608μg/ml，检测限为0.0152μg/ml。

16、相比于现有技术，本发明的有益效果为：

17、1)本发明的方法专属性良好，同时对色谱条件参数发生微小变化时对酰氯亚氨基二苄有关物质杂质分离与检查结果没有影响，耐用性良好；

18、2)本发明使用该液相色谱法能够快速、有效、准确和可靠的分离检测出中间体酰氯亚氨基二苄中有关物质，有利于提高中间体酰氯亚氨基二苄的产品质量。

技术特征：

1.一种利用hplc测定医药中间体酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的利用hplc测定医药酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，所述步骤1)中，对照溶液的制备方法为：精密量取供试品溶液，加稀释剂稀释成每ml含酰氯亚氨基二苄0.2ug的溶液，作为对照溶液；系统适用性溶液的制备方法为：称取酰氯亚氨基二苄样品和亚氨基二苄对照品，用稀释剂超声溶解并稀释成每ml含亚氨基二苄0.3μg和酰氯亚氨基二苄0.2mg的溶液，作为系统适用性溶液。

3.根据权利要求2所述的利用hplc测定医药酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，所述稀释剂为甲醇。

4.根据权利要求1所述的利用hplc测定医药酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，所述步骤2)中，色谱柱的规格为250mm×4.6mm，填料粒径为5μm，柱温为35℃。

5.根据权利要求1所述的利用hplc测定医药酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，所述步骤2)中，a相中三乙胺、甲酸和水的体积比为0.5:0.5:1000，b相中甲醇和甲酸的体积比为1000:0.25。

6.根据权利要求1所述的利用hplc测定医药酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，所述步骤2)中，a相与b相的体积比为30:70，梯度洗脱流速为1ml/min。

7.根据权利要求1所述的利用hplc测定医药酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，所述步骤3)中，液相色谱仪的检测波长为206nm。

8.根据权利要求1所述的利用hplc测定医药酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，所述步骤4)中，根据色谱图，以峰面积a为纵坐标、浓度c为横坐标作线性回归方程，亚氨基二苄的线性方程为a＝101.83c+0.2744，酰氯亚胺基二苄的线性方程为a＝83.014c-0.4609。

9.根据权利要求9所述的利用hplc测定医药酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，其特征在于，亚氨基二苄的线性浓度范围为0.0601～0.6013μg/ml，定量限为0.0601μg/ml，检测限为0.0150μg/ml；酰氯亚氨基二苄的线性浓度范围为0.0603～0.6033μg/ml，定量限为0.0608μg/ml，检测限为0.0152μg/ml。

技术总结
本发明公开了一种利用HPLC测定医药中间体酰氯亚胺基二苄中杂质含量的方法，属于药物分析技术领域。本发明包括以下步骤：1)配置供试品溶液、对照溶液和系统适用性溶液；2)设置液相色谱检测条件：采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，进行梯度洗脱；3)分别精密吸取供试品溶液、对照溶液和系统适用性溶液，注入液相色谱仪，开始检测并记录色谱图；4)绘制标准曲线，得到标准曲线方程，计算医药中间体酰氯亚胺基二苄中杂质含量。本发明的方法专属性良好，同时对色谱条件参数发生微小变化时对酰氯亚氨基二苄有关物质杂质分离与检查结果没有影响，耐用性良好。

技术研发人员：高政,徐伟
受保护的技术使用者：江苏慈星药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/5/10