生物标志物在制备诊断白塞氏病葡萄膜炎的产品中的应用

本发明涉及生物医药，具体涉及生物标志物在制备诊断白塞氏病葡萄膜炎的产品中的应用。

背景技术：

1、白塞氏病是慢性、复发性、多器官受累的血管炎性疾病。累及眼部时会导致白塞氏病葡萄膜炎的发生，白塞氏病葡萄膜炎是我国常见的葡萄膜炎类型之一，病因和发病机制尚未完全明确，治疗不及时可因视网膜血管闭塞、视网膜和视神经萎缩等原因致盲。早期诊断和治疗对保护患者视功能极为重要，鉴于白塞氏病葡萄膜炎是一种多因素疾病，开发新型生物标志物将有助于早期诊断和精准治疗。

2、蛋白质是执行生物体生命活动的基础，不同疾病的严重程度不同，这会导致体内蛋白质的组成和表达发生变化。蛋白质组学是涉及识别和量化细胞、组织或生物体中存在的全部蛋白质含量的技术的应用，在医学领域中，蛋白质组学技术被广泛应用于多个方面，其中包括检测诊断标记物、疾病机制研究以及药物研发与个体化治疗等。在临床上，血浆具有取材方便，非侵入性，创伤小的优点，可应用于实时动态个体化诊疗中。许多研究结果表明，血浆中含有丰富的蛋白质。然而，在实际应用中，由于存在高丰度蛋白质且蛋白丰度的动态波动范围较大，常导致检测结果不尽如人意。随着基于质谱（ms）的蛋白质组学技术和生物信息学的发展，越来越多的生物标志物被发现，目前的技术已经可以在血浆中识别超过1000种蛋白质，甚至可以超过5000种蛋白质。因此这一方法有助于发现患者血浆中随眼部变化发生改变的标志物，协助疾病的诊断，探究疾病的发病机制。

技术实现思路

1、本技术通过swath‐ms技术对包括健康对照、白塞氏病葡萄膜炎、后巩膜炎和vogt-小柳原田综合征（vkh）患者血浆中的蛋白质进行鉴定。通过生物信息学的方法筛选出潜在疾病标志物，进一步选择另一组样本队列，使用elisa试剂盒对其中两种标志物进行验证，spss构建诊断模型。结果显示，emilin1和/或lyz作为生物标志物诊断白塞氏病葡萄膜炎具有较高的灵敏度和特异度。

2、本发明的第一方面，提供了一种生物标志物或检测生物标志物的试剂在制备诊断或预后评估白塞氏病葡萄膜炎的产品中的应用。

3、所述的生物标志物包括emilin1和/或lyz。

4、优选的，所述的生物标志物还包括atp5po、hyi、preb或tti2中的一种或两种以上。

5、在本发明的一个具体实施方式中，所述的应用为：emilin1和/或lyz作为生物标志物在制备诊断或预后评估白塞氏病葡萄膜炎的产品中的应用。

6、所述的生物标志物为血浆中的生物标志物。

7、所述的生物标志物为蛋白。

8、在本发明的一个具体实施方式中，所述的应用为：血浆中的emilin1和/或lyz作为生物标志物在制备诊断或预后评估白塞氏病葡萄膜炎的产品中的应用。

9、检测生物标志物的试剂包括检测生物标志物的有无或含量的试剂。

10、所述的产品包括蛋白芯片、试剂盒、试纸、膜条或设备。所述的设备可以选自液相或质谱。

11、优选的，所述的产品包括检测生物标志物的试剂。进一步优选包括检测样本中蛋白生物标志物的有无或表达水平的试剂。

12、优选的，所述的样本为血浆样本。

13、所述的诊断或预后评估白塞氏病葡萄膜炎包括检测生物标志物的有无或含量。然后将其与阈值比较。所述的阈值为前期实验获得，即通过实验及数据分析白塞氏病葡萄膜炎与健康人或白塞氏病葡萄膜炎与其他类型眼病之间，生物标志物的差异程度确定阈值。

14、当本技术所述的生物标志物与阈值具有差异或显著差异（差异具有统计学意义，例如p<0.05，p<0.01，p<0.001，p<0.0001）则确定为疾病。例如：

15、a）emilin1高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

16、b）lyz高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

17、c）atp5po高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

18、d）preb高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

19、e）tti2高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

20、f）hyi低于阈值或显著低于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生。

21、本发明的第二方面，提供一种生物标志物在构建白塞氏病葡萄膜炎的诊断模型中的应用。

22、所述的生物标志物包括emilin1和/或lyz。优选的，所述的生物标志物还包括atp5po、hyi、preb或tti2中的一种或两种以上。所述的诊断模型包括检测生物标志物的试剂。

23、本发明的第三方面，提供一种白塞氏病葡萄膜炎的诊断模型，所述的诊断模型包括检测生物标志物的试剂。

24、本发明的第四方面，提供一种诊断或预后评估白塞氏病葡萄膜炎的方法，所述的方法包括检测受试者样本中的生物标志物。

25、优选的，检测生物标志物的有无或含量，例如蛋白的表达量。

26、所述的样本为血浆样本。

27、所述的方法还包括将检测的生物标志物的表达量与阈值比较。

28、当本技术所述的生物标志物与阈值具有差异或显著差异（差异具有统计学意义，例如p<0.05，p<0.01，p<0.001，p<0.0001）则确定为疾病。例如：

29、a）emilin1高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

30、b）lyz高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

31、c）atp5po高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

32、d）preb高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

33、e）tti2高于阈值或显著高于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；和/或，

34、f）hyi低于阈值或显著低于阈值表示白塞氏病葡萄膜炎的发生。

35、优选的，所述检测的方法可以选自质谱、液相、elisa。

36、本发明的第五方面，提供了一种诊断试剂盒，所述的诊断试剂盒包含检测生物标志物试剂。

37、本发明的第六方面，提供一种生物标志物在制备区分白塞氏病葡萄膜炎与后巩膜炎或与其他葡萄膜炎的产品中的应用。

38、所述的生物标志物包括emilin1和/或lyz。优选的，所述的生物标志物还包括atp5po、hyi、preb或tti2中的一种或两种以上。

39、生物标志物在白塞氏病葡萄膜炎中的表达量与在后巩膜炎或其他葡萄膜炎中的表达量具有显著差异（差异具有统计学意义，例如p<0.05，p<0.01，p<0.001，p<0.0001）。例如：

40、a）emilin1在白塞氏病葡萄膜炎中的表达量显著高于在后巩膜炎或其他葡萄膜炎中的表达量，表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；反之可能患有后巩膜炎或其他葡萄膜炎或健康，需进一步确定。和/或，

41、b）lyz在白塞氏病葡萄膜炎中的表达量显著高于在后巩膜炎或其他葡萄膜炎中的表达量，表示白塞氏病葡萄膜炎的发生；反之可能患有后巩膜炎或其他葡萄膜炎或健康，需进一步确定。

42、所述的其他葡萄膜炎包括vogt-小柳原田综合征、强直性脊柱炎引起的葡萄膜炎、fuchs综合征、交感性眼炎或特发性葡萄膜炎中的一种或两种以上。

43、本发明的第七方面，提供一种区分白塞氏病葡萄膜炎与后巩膜炎或与其他葡萄膜炎的方法，所述的方法包括检测受试者样本中生物标志物的表达量。

44、所述的其他葡萄膜炎包括vogt-小柳原田综合征、强直性脊柱炎引起的葡萄膜炎、fuchs综合征、交感性眼炎或特发性葡萄膜炎中的一种或两种以上。

45、所述的样本为血浆样本。

46、本发明所述的“诊断”是指以查明患者是否患有疾病或病症。

47、本发明所述的“预后评估”指评估患者对治疗的反应。

48、本发明所述的“受试者”为人。

49、本技术简写与全称对比见表1。

50、表1

51、

52、本发明的有益效果：（1）本发明通过swath-ms技术对健康对照、白塞氏病葡萄膜炎、后巩膜炎和vogt-小柳原田综合征患者血浆中蛋白质进行鉴定，结合生物信息学方法筛选出6种白塞氏病葡萄膜炎的生物标志物。（2）elisa进一步对生物标志物验证，emilin1和lyz在白塞氏病葡萄膜炎与后巩膜炎或vogt-小柳原田综合征或未患病的表达量显著不同，可以作为区分白塞氏病葡萄膜炎与后巩膜炎或与其他葡萄膜炎的生物标志物。（3）本发明筛选获得的emilin1和/或lyz作为生物标志物诊断白塞氏病葡萄膜炎具有较高的灵敏度和特异度，具有优异的临床诊断意义。