具有雪崩光电二极管的细胞仪精子性别感测装置的制作方法

文档序号:38208366发布日期:2024-06-06 18:43阅读:48来源:国知局


背景技术:

1、总的来讲,本技术涉及流式细胞仪。具体而言,本技术涉及用于在细胞仪中实施雪崩光电二极管以检测精子细胞的性别的技术。

2、流式细胞仪可以利用光检测来评估流动通过细胞仪的微粒(例如,细胞)的特性。在某些应用中,细胞仪可以检测细胞发射的光,包括荧光物、dna嵌合染料所发射的光。检测这样的发射的光的能力可以允许准确并且灵敏地区分细胞的某些特性。

3、一种这样的应用是判断精子细胞是具有两条x染色体(其可以产生雌性合子),还是替代地具有x染色体和y染色体(其可以产生雄性合子)。具有两条x染色体的精子细胞可以比具有x染色体和y染色体的精子细胞多大约3%的dna。通过识别精子细胞的染色体内容,有可能建立xx精子细胞或者xy精子细胞的相对较高纯度的群体。例如,可以通过保留期望的性别,并且杀死不期望的性别(或者通过分离两种性别)来生成这样的群体。可以使用充分高纯度的群体来对雌性动物(例如,牛科动物、马科动物、羊属动物、羊、猪、狗、猫、骆驼、大象、牛或水牛等)进行授精,从而具有相对较高的概率获得期望的雄性或雌性后代。

4、可以通过使用荧光染料(例如,dna嵌合染料)对精子细胞的dna进行染色来识别染色体的特性。可以迫使所染色的精子细胞在窄流或窄带中流动,并且经过诸如激光束的激励或辐射源。随着所染色的精子细胞(多个微粒)被辐射,多个微粒中的荧光染料发射响应性荧光。荧光的量可以至少部分地基于多个微粒中的每者中存在的至少一种微粒区分特性的相对量(例如,染色体的相对量)而变化。可以通过一个或多个光学元件接收荧光,一个或多个光学元件最终将所接收的光聚焦到诸如光电倍增管(“pmt”)的检测部件上。检测部件可以响应于所接收的光生成电、模拟信号。该模拟信号可以根据所接收的光的量而变化。之后,可以对这一信号进行处理(例如,通过处理器对其进行数字化和分析),以评估精子细胞的染色体内容。

5、在使用流式细胞仪执行这种类型的区分时,一个考虑事项可以是细胞仪的光感测部件的灵敏度。由已经用荧光物、dna嵌合染料进行染色的单个细胞发射的光的量(即,所发射的光子的数量)可以相对较低。因此,检测部件必须是足够灵敏的,以便既能做出检测,又能做得更多以便检测出不同细胞之间的某些特性的差异。

6、细胞仪技术可以实施pmt,从而为诸如确定精子细胞的染色体内容的应用实现足够的灵敏度。pmt的相对较大的光学信号增益(例如,10^7或更大)能够实现这一特定应用。例如,具有这样的光学增益的pmt能够感测足够低的水平的光发射,并且能够辨别出携带染色xx染色体和xy染色体的精子细胞之间的大约3%的总荧光差异。然而,pmt相对昂贵。一旦流式细胞仪已经被开启,它们还可能要求相对较长的时间周期来“热身”(在这一期间pmt不应被暴露到光下)。另外,pmt可能要求数千伏的电压。此外,在不使用时,pmt可能要求快门来阻挡光,因为正常的室内照明(如果暴露于其下)就能对pmt造成损伤和破坏。


技术实现思路

1、根据某些发明性技术,一种细胞仪包括:雪崩光电二极管、开关电源、滤波器和电压调整电路。开关电源包括反馈环。滤波器电连接于开关电源和雪崩光电二极管之间。电压调整电路至少部分地基于在滤波器和雪崩光电二极管之间所测量的电压来调整反馈环上的电压。

2、所述细胞仪还可以包括被配置为感测温度并且生成对温度数据进行编码的对应的温度信号的温度传感器,其中,电压调整电路还被配置为至少部分地基于温度数据以及在滤波器和雪崩光电二极管之间所测量的电压来调整反馈环上的电压。电压调整电路还可以被配置为至少部分地基于雪崩光电二极管的至少一种特性、温度数据以及在滤波器和雪崩光电二极管之间所测量的电压来调整反馈环上的电压。电压调整电路还可以被配置为至少部分地基于雪崩光电二极管的至少一种特性以及在滤波器和雪崩光电二极管之间所测量的电压来调整反馈环上的电压。电压调整电路可以包括:模数转换器,其被配置为将在滤波器和雪崩光电二极管之间所测量的电压转换成对测量的电压数据进行编码的数字测量信号;处理器,其被配置为至少对测量的电压数据进行处理,以生成数字调整信号;以及数模转换器,其被配置为将数字调整信号转换成调整电压,其中,所述调整电压影响反馈环上的电压。处理器可以被配置为至少对温度数据和测量的电压数据进行处理,以生成数字调整信号。处理器可以被配置为至少对温度数据、对应于雪崩光电二极管的至少一种特性的数据、以及测量的电压数据进行处理,以生成数字调整信号。雪崩光电二极管的至少一种特性可以包括击穿电压和对应于预定的光学增益的反向偏置电压的至少其中之一。所述细胞仪还可以包括:第一放大器,其被配置为对雪崩光电二极管的阳极处的电压进行放大,以形成第一放大电压;以及第二放大器,其被配置为对第一放大电压进行放大,以生成第二放大电压。所述电源可以包括dc/dc电源。雪崩光电二极管可以被布置为接收由多个微粒中的每者发射的一定量的荧光,所接收的荧光的量可以至少部分地基于所述多个微粒中的每者中存在的至少一种微粒区分特性的相对量而变化;并且雪崩光电二极管可以被配置为将所接收的荧光的量转换成基于所接收的荧光的量而变化的至少一个信号。

3、根据某些发明性技术,一种方法包括:在电源的输入电路处接收输入电压;用变压器将由输入电路供应的电压变换成变换的电压;在电源的输出电路处接收变换的电压;由输出电路生成输出电压;将对应于输出电压的反馈电压反馈给输入电路;在滤波器处接收输出电压;由滤波器生成滤波电压;在雪崩光电二极管处接收滤波电压;在电压调整电路处接收滤波电压;以及由电压调整电路至少根据滤波电压来调整反馈电压。所述方法还可以包括由温度传感器生成对应于测量的温度的温度信号,其中,所述的调整反馈电压还包括由电压调整电路至少根据滤波电压和测量的温度来调整反馈电压。所述的调整反馈电压还可以包括由电压调整电路至少根据滤波电压、测量的温度以及对应于雪崩光电二极管的特性的至少一个值来调整反馈电压。所述的调整反馈电压还可以包括由电压调整电路至少根据滤波电压以及对应于雪崩光电二极管的特性的至少一个值来调整反馈电压。所述的调整反馈电压还可以包括:用模数转换器将滤波电压转换成对滤波电压数据进行编码的数字测量信号;用处理器至少对滤波电压数据进行处理,以生成数字调整信号;由数模转换器将数字调整信号转换成调整电压;以及根据调整电压来调整反馈电压。所述的至少对滤波电压数据进行处理还可以包括至少对温度数据和滤波电压数据进行处理,以生成数字调整信号。所述的至少对滤波电压数据进行处理还可以包括至少对对应于雪崩光电二极管的至少一种特性的数据、温度数据以及滤波电压数据进行处理,以生成数字调整信号。雪崩光电二极管的至少一种特性可以包括击穿电压和对应于预定的光学增益的反向偏置电压的至少其中之一。所述方法还可以包括:用第一放大器对雪崩光电二极管的阳极处的电压进行放大,以形成第一放大电压;以及用第二放大器对第一放大电压进行放大,以生成第二放大电压。所述输入电路、变压器和输出电路可以包括dc/dc电源。

4、根据某些发明性技术,一种流式细胞仪装置包括:流室,其被配置为引导包括样本微粒的流体流通过微粒探询位置;激光器,其被配置为沿射束路径向微粒探询位置发射电磁辐射;雪崩光电二极管,其被配置为:接收来自探询位置的电磁辐射,以及输出指示所接收的电磁辐射的强度的时变模拟信号;至少一个放大器,其被配置为对时变模拟信号进行放大;模数转换器,其被配置为接收所放大的时变模拟信号,并且产生对应的数字化输出信号;以及处理器,其被配置为对数字化输出信号进行分析。

5、根据某些发明性技术,一种用于在精子细胞流动通过探询位置时分析流体流中含有的精子细胞的方法包括:从激光器发射电磁辐射;用由激光器发射的电磁辐射照射流体流以及其中含有的精子细胞;用雪崩光电二极管检测从探询位置发射的电磁辐射;由雪崩光电二极管生成指示所检测到的电磁辐射的强度的时变模拟信号;用模数转换器将时变模拟信号转换成对应的数字信号;以及由处理器对该数字信号进行分析,以确定流体流中的精子细胞的特性。

6、根据某些发明性技术,一种用于评估精子细胞的细胞核内的dna的量的方法包括:对精子细胞的细胞核内的dna进行染色;对精子细胞的细胞核内的所染色的dna进行辐射;以及用雪崩光电二极管检测从精子细胞的细胞核内的被辐射并染色的dna发射的荧光。所述方法还可以包括通过下述操作区分携带x染色体的精子细胞和携带y染色体的精子细胞:使用精子细胞的细胞核内的dna的所检测到的量来确定精子细胞的性别;以及基于所述的性别确定来区分多个精子细胞。精子细胞的特性可以包括精子细胞的细胞核内的dna的相应量。所述方法还可以包括基于既定精子细胞的细胞核内的dna的所确定的量对既定精子细胞灭活。所述灭活可以包括对既定精子细胞做出光学损害。所述方法还可以包括:形成多个液滴,其混入所述精子细胞之一;基于所述液滴中混入的所述精子细胞的所述性别区分特性使所述液滴中的每者有区别地带电;使所述液滴中的每者偏转;以及基于所述液滴中混入的所述精子细胞的所述性别区分特性有区别地收集所述液滴中的每者。

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