色谱分析方法及其所用设备的制作方法

专利名称:色谱分析方法及其所用设备的制作方法
本发明是关于一种色谱分析方法及其在该方法中用到的设备。更明确地讲，本发明是关于这样一种色谱分析方法及其设备-应用这种方法，像蔗糖、及其衍生物等等糖化物的标本都可以在一个加入有填充剂的分离柱中展开，从而获得标本所含各种成份的色谱;然后，色谱再经过分析处理。
用于本发明色谱分析法的这种设备可以单独使用，或与一个液相色谱仪或一个气相色谱仪一起使用，或作为其中之一的一个内组件。
在通常使用的液相色谱仪中，标本是在加有填充剂的分离柱中由洗脱液展开，並分离成不同成份。当标本各成份通过分离柱时，由于各种成份在分离柱内的填充剂中具有不同的溶解性所引起的不同析出速度，从而导致了标本各成份的分离。分离出的成份接着送入测定器。在测定器中，测定出在单位时间内到达的成份数量，並记录在记录纸上，从而获得了有一系列峰值並对应于每一种成份的色谱(日本专利出版物NO.1994/1979。
分离柱内填充有一种细粉末，它由一种带有被金属元素置换的功能基的塑料，或一种多孔塑料构成。各成份的持着时间(retentiontime)和半宽或成份的洗脱持续时间。依金属元素或孔径大小的变化而变化。
根据各成份的持着时间可以区别出标本中的成份。通过测定每一种成份色谱的强度和测定器的输出量可以确定标本中各成份的浓度。
在应用这种分析方法时，首先要根据待分离的成份选择一种填充剂，这种选择是基于不同的成份应呈现不同的持着时间和半宽。在许多情况下，还要研究过去的分析案例，再选出可能适合的填充剂，並试用于新的分析中。例如，当有五种待分析的成份，就需要去研究与这些成份有关的持着分析表和半宽分析表，並在选择多种填充剂或分离柱时，考虑到使这五种成份的色谱不会重叠。
然而，这是一种易错的分析法，它完全依赖于数据，並且需要复杂专门的技术。当找不到适合的分析案例时，则必须在摸索和错误的基础上进行长时间的分析，这就极大地降低了工作效率。
本发明的目的是要提供一种色谱分析方法及其用于该方法中的一个设备，这种方法可以高效地选择出填充剂。
本发明的另一个目的是要提供一种色谱分析方法及用于该方法的一个设备，这种方法可以可靠地选择出填充剂。
本发明的又一个目的是要提供一种色谱分析方法和用于该方法的一个设备，这种方法可以选择与填充剂有关的数据，並可以显示图示色谱。
当通过测定标本所含各种成份的不同持着时间来分析标本时，本发明论及了一种使用色谱仪的分析方法，该方法根据各种待测物体成份与所存的各种填充剂有关的持着时间和半宽，显示出与待分析的特殊物体成份和特殊填充剂有关的图解色谱，选定的填充剂将被送入一个分离柱。
本发明进一步论及了色谱分析法所用到的一个设备，它包括一个用于存储各种待分析物体成份与各种填充剂有关的持着时间和半宽的装置;
一个用于备制与特殊填充剂有关的图解色谱的装置。
洗脱出的成份浓度随时间而变化。
从标本被送入到一种被洗脱出的成份浓度达到最大值Hmax时的时间叫做持着时间(Tr)(看图4)。
通常，被洗脱出的成份浓度随时间的变化是沿正态分布曲线或一条二次正态分布曲线运动。当从成份浓度最大值的50%这一点起，经过最大浓度，再到达最大浓度的50%另一点所需的时间W称作半宽(见图4)。洗脱持续时间一般由半宽W代表。
图解色谱是在一个色谱分析设备上显示的色谱，或是在一个与该分析设备相连接的记录器上显示的色谱。图解色谱等同于或非常近似于一个数据处理机的阴极射线管按照来自色谱侧定器的分析结果所显示的色谱。
图解色谱可以按照下述方法进行显示或合成。即，对各色谱的强度不断求和(图5);对各色谱的强度不求和(图6);函数程序中色谱函数被取作线性方程，从而获得一个三角形色谱(图7)。
用于色谱分析的这种设备可以单独使用，也可做为色谱数据处理机的一个内组件。
本发明中，先将待分析的物体成份与各种填充剂有关的持着时间和半宽都贮存起来，仍后选出有关的数据随色谱图示出来。因此，适合的填充剂可以很快选出。
根据显示的内容，操作员可以很快地选定合适的填充剂。有了加入适合色谱分析的填充剂的分离柱，分析可以高效地进行。
图1是本发明的一个实施例中，用于液相色谱分析的设备的基本构成。
图2是本发明的一个主要组件的结构。
图3(a)、3(b)、3(c)、3(d)和3(e)是本发明的一个实施例中的一组图解色谱。
图4是表示了持着时间和半宽的一个色谱示意图。
图5、6和7是显示图解色谱的示例。
图1中，泵2以一定速度将储存在液相色谱仪的一个洗脱液容器1内的一种洗脱液送入一个分离柱3。取样器4以预定量加入一种待测液体(标本)，取样器4装在泵2和分离柱3之间。标本和洗脱液一起被送入分离柱3，並在那里展开成各种成份，然后进入测定器5进行测定。测得的数据由数据处理机17进行处理。
下面叙述对蔗糖和蔗糖醇的各种成份的分析。首先，研究蔗糖的各种成份与各种填充剂有关的持着时间。同样，研究各成份的洗脱持续时间。在表1和表2中，给出了持着时间Tr和半宽W的示例。
装有填充剂的各种分离柱，GL-C600、GL-C613、GK-C614和GL-C615是用于分析的水型柱，並由日立化学有限公司(HifachiChemicalCo.Ltd)生产。
表1持着时间单位分钟
五种成份，(a1)、(a2)、(a3)、(a4)和(a5)是作为代表成份示例给出，並通过对它们的处理来描述实施例。当要分析从(a1)到(a5)的五种成份时，选择填充剂或装有填充剂的分离柱的方法，是必须使五种成份的色谱不会重叠。
因此本发明中，有借助计算机来显示图解色谱的系统，图2给出了该系统的范例。当待分析的物体成份和填充剂的种类通过键盘6输入后，由存储填充剂和待分析物体成份的半宽的半宽存储器7，产生出对应于半宽的常数。这些常数又经函数程序8转换成像正态分布曲线或二次正态分布曲线的函数。例如，产生的曲线9对应了成份(a1)的色谱。
通过键盘6的数据输入进入存有每一种填充剂和成份持着时间的持着时间存储器10，于是有关待分析物体成份的持着时间的数据就产生了。例如，产生的曲线11指示了将要显示的成份(a1)的图解色谱的位置。
色谱9和曲线11被送入色谱存储器12，在那里进行合成和存储。类似地，成份(a2)到(a5)的图解色谱都将存入该存储器。例如，有一组色谱13，当通过键盘输入的待分析物体成份被记录后，它们将由加法器14合成，然后在阴极射线管15上显示。
这样，就可以在阴极射线管15上直观地直接确定图解色谱之间是否有相互重叠。图解色谱还可以进一步由记录器16记录。
加法器14(multiplexer)有计算功能，它可以将各图解色谱在每一时刻的强度相加。例如，当成份(a1)的图解色谱与成份(a3)的图解色谱如图5所示有部分重叠时，则通过将强度不断相加得到的一个图解色谱就显示出来。
图3(a)到3(e)表示的情况是五种成份(a1)到(a5)要与其它各种成份一起进行分析。在图3(a)到3(e)中，分别用到了填充剂(A)、(B)、(C)、(D)和(E)。当使用了填充剂(A)时，如图3(a)所示，成份(a2)和(a4)的图解色谱没有完全分开。当使用了填充剂(B)时，如图3(b)所示，成份(a1)和(a5)的图解色谱重叠了。当使用了填充剂(E)时，成份(a2)和(a3)的图解色谱没有完全分开。
因此，选出了适合的填充剂(C)和(D)。但是，到最后一个成份被洗脱出来为止，填充剂D所需时间较短，即，使用填充剂(D)比使用填充剂(C)所需的分析时间短(看图3(C)和3(d))，则填充剂(D)是最佳的一种。于是，最佳填充剂就可快速、可靠地选出。
此外，还可以把分析器装入图1中的色谱仪数据处理机17中，並借助于数据处理机17的阴极射线管选择填充剂。
权利要求
1.一种分析标本的方法，是通过把标本送过一个装有填充剂的分离柱，根据与填充剂有关的标本成份的运动速度分离各成份，並把被分离的成份送到一个测定器以测定各成份的持着时间；一种色谱分析方法，其中根据存储的各种待分析物体成份与各种填充剂有关的持着时间和半宽，显示出与特殊填充剂和待分析的特殊物体成份有关的图解色谱。
2.根据权利要求
1所述的色谱分析方法，其中一个图解色谱是从一组图解色谱中选出;由那样选定的色谱所确定的一种填充剂，被送入一个分离柱去分析标本。
3.一种用于色谱分析的设备包括存储各种待分析物体成份的与要送入分离柱的各种填充剂有关的持着时间的装置;存储各种待分析物体成份的与各种填充剂有关的半宽的装置;输入待分析物体成份的特殊种类和填充剂的特殊种类的装置;根据送入所述输入装置的输入信息，备制与特殊填充剂有关的图解色谱的装置。
4.在一个分析设备中，包括装有一种填充剂的分离柱;一种要送入所述分离柱的载体;把所述载体送到分离柱的装置;一种要注入所述分离柱中的标本;测定从分离柱分离出的成份的装置;以及一个处理从所述测定装置送来的数据的数据处理机;一个色谱分析设备还包括存储待分析物体成份与填充剂有关的持着时间的装置;存储待分析物体成份与填充剂有关的半宽的装置;输入填充剂特殊种类和待分析物体成份特殊种类的装置;其中，所述数据处理机将响应输入给所述输入装置的输入信息，备制出与特殊填充剂有关的图解色谱。
专利摘要
在通过测量标本成份的持着时间来分析标本的方法中，有一种色谱分析方法，它根据存储的与各种填充剂有关的各种待分析物体成份的半宽和持着时间，显示与待分析物体成份和填充剂有关的图解色谱，填充剂将送入分离柱。本发明还论及了一种色谱分析设备。它包括存储与要送入分离柱的各种填充剂有关的待分析物体成份的持着时间和半宽的装置备制与特殊填充剂有关的图解色谱的装置；通过显示图解色谱可以快速、有效地选出适合于糖化物分析的填充剂。该分析设备可单独使用，也可作为色谱仪数据处理机的一个组件。
文档编号G01N30/02GK85101444SQ85101444
公开日1987年1月17日 申请日期1985年4月1日
发明者内野一, 浜野吉政 申请人:株式会社日立制作所