技术简介:
该发明提出了一种分析血清中拟柯托皮浓度的新装置。传统方法使用离子交换树脂,耗时且复杂。本发明采用高速液相色谱法分离拟柯托皮离子,并用次硫酸钠将其转化为自由基进行检测,简化了操作流程并提高了精度和选择性。
关键词:拟柯托皮分析,高速液相色谱,自由基化检测
专利名称:拟柯托皮分析装置的制作方法
本发明是一种能把存在于血清中的拟柯托皮定量分析出来的装置。
除草剂拟柯托皮(MethyIVioIogen),由于误用或误饮可引起人体发生中毒症状,因此在治疗过程中,必须测定血液中含拟柯托皮的浓度。
分析血液中的拟柯托皮的方法是,在15分钟之内往试样血液中添加500克三氯醋酸溶液,经离心分离取出表面澄清液后,在5分钟之内再往沉淀物中添加500克三氯醋酸溶液,然后离心分离,再次取出表面澄清液。用离子交换树脂混合这两种表面澄清液,然后把浓缩提取出来的拟柯托皮离子作成试样,再将这种试样采集到试管中去进行比色定量测定。
可是,由于采用了离子交换树脂,于是就产生了试样的浓缩提取不但费时,而且操作过程复杂的问题。
鉴于上述问题,本发明的目的是提供一种既简便又能迅速地对血清中的拟柯托皮进行分析的新式装置。
本发明的特点是用高速液相色谱法洗提血清中的拟柯托皮,然后将其变换成拟柯托皮自由基进行检测。
实施例下面将用图示的实施例对本发明进行详细的说明。
图1所示即本发明的实例,图中符号(1)是高速液体柱,其一侧是用泵(2)与移动相溶剂槽(3)相联,另一侧是不锈钢和具有耐腐蚀性的氟化乙烯树脂的管子组成的混合型螺旋管(4)与高速液体柱相联。5是在高速液体柱(1)和混合型螺旋管(4)的连接处用泵(6)连通的试剂槽,槽中装有0.5到2重量/体积的次硫酸钠(Na2S2O4)和苛性钠水溶液。7是由在混合型螺旋管(4)的出口处接上一个600nm或者是900nm左右的能检测可见光的吸光光度计和能打印出检测信号的显示仪器(8)组成的。另外,图中符号9表示接受从可见光吸光光度计排出来的试样的溶液槽,10表示试样的注入口。
对于这种结构的装置,要使其工作,必须预先往柱(1)中注入经蛋白质除去处理的血清试样,而试样中所含的拟柯托皮,与其他杂质分离后作为拟柯托皮离子从混合螺旋管(4)中排出,接受试剂槽(5)中次硫酸钠的作用。
通过上式反应,可生成拟柯托皮自由基。利用可见光吸光光度计(7)将所生成的拟柯托皮自由基检测出来,输出与其浓度成比例的水平信号。
把用饱和氯化铵溶液稀释拟柯托皮标准溶液而配制成的拟柯托皮标准溶液注入柱中进行分析,即可得到图2(1)所示的输出。
一方面,要往含有拟柯托皮的血液中添加500克三氯醋酸溶液,并在15分钟之内进行离心分离。取出表面澄清液后,再往沉淀物中加入500克三氯醋酸溶液,在5分钟之内进行离心分离,然后取出表面澄清液。把上述两种表面澄清液混合成的血清作为试样,将其注入柱中进行分析,则如同图(2)所示,能得到单峰性的峰值,而且还具有较高的选择性,不受血清中其他成分的影响,从而能夠分析拟柯托皮。
另一方面,在这个实例中,使用的试剂是次硫酸钠和苛性苏打溶液,即使使用NaBH4的水溶液和乙醇溶液也可起到同样的作用。
综上所述,采用本发明就可以利用高速液相色谱装置把血清中所含的拟柯托皮分离、提取出来。在管路中,由于还原剂的作用,完全不会受到血清中的杂质和空气中氧的影响,并可保持高度的选择性和高度的精确性,从而能分析血液中的拟柯托皮。另外,注入血清试样后,可以通过一般的高速液相色谱装置中的流动液进行分析,所以能使分析工作进行得既迅速又简便。
图1是本发明一实施例的装置的结构。图2(1)和(2)是表示利用上述装置所得分析结果的色层图。
1.高速液体柱2.移动相溶剂槽4.混合型螺旋管5.试剂槽7.可见光吸光光度计
权利要求拟柯托皮分析装置,该装置由以下几部分组成,从血清试样中洗提分离拟柯托皮离子的高速液相色谱装置,能收容将拟柯托皮离子自由基化的试剂的试剂槽,混合试剂槽中的试剂和从上述色层分离设备中排出的试样溶液的混合器以及检测混合器中溶液的可见光吸光光度计。
专利摘要本发明拟柯托皮分析装置由以下几部分组成,从血清试样中洗提分离拟柯托皮离子的高速液相色谱装置,能收容将拟柯托皮离子自由基化的试剂槽,混合试剂槽中的试剂和从上述色层分离设备中排出的试样溶液的混合器以及检测混合器中溶液的可见光吸光光度计。采用本发明的装置进行分析时不受血清中杂质和空气中氧的影响,并可保持高选择性和高精确度,而且使分析工作进行得既迅速又简便。
文档编号G01N33/52GK85101449SQ85101449
公开日1987年1月24日 申请日期1985年4月1日
发明者冈田荣二 申请人:株式会社岛津制作所