专利名称：色谱式电泳分离设备的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于分离蛋白质不同组分的色谱式电泳分离设备，属生物化学技术领域。
已有技术中有一种反向作用色谱电泳分离设备，该设备由O'Farrell提出(O'Farrell，P.HScience，vol，227，1586(1985)其电泳槽为细长柱，柱经仅为φ7mm，柱内装有多层不同规格的凝胶颗粒，其中上层为小孔凝胶，下层为大孔凝胶，可允许所有蛋白质进入。分离时，蛋白质被载流从上层凝胶颗粒间冲入下层凝胶颗粒内孔中，其下移速率将减慢，调整电场强度，使目标蛋白质在电场作用下向上迁移的速率与其被载流冲洗向下迁移的速率相同，此时其净迁移速率为零，在这两层凝胶接界处聚焦，而其余的蛋白质则因为电迁移速率与其下移的速率相异而不被聚焦，从柱上端或下端移出，从两层凝胶接界处即可获得产品。该设备的缺点是(1)小电极距离长，导致电泳时热效应严重，冷却负荷大，因而电泳柱很细，上样量很小，相应地，产量很低;(2)由于蛋白质电迁移速率低，要求与匹配的载流流量也较小，使得分离时间长，也导致分离产量低;(3)不能分离具有多个等电点的酶或蛋白质，且一次分离仅能获得一种产品，而其余组分都被稀释了，难以同时获得多种有效成分，应用范围有限。
本发明的目的是设计一种具有分离精度高，处理量大和适用范围广的分离设备，应用于工业生产中，用于基因工程产品，药用生物制品等具有重要价值的生物制品的最终纯化。
本发明的内容是色谱式电泳分离设备为一窄长形电泳槽，电泳槽中沿长度方向平行设置有阳极室、阴极室、隔离框、薄膜和腔室体。阳极室和阴极室为一具有一定厚度的薄板，薄板四周有螺孔，板中间开有一槽沟。薄板二端开有液体进出口，与槽沟相通，槽沟中设有电极。隔离框为一长方形框架，其厚度与薄膜厚度大致相等。腔室体为一具有一定厚度的薄板，薄板的四周有螺孔，薄板的中间挖有开通的长方形槽沟，薄板二端开有液体进出口，与长方形槽沟相通。阳极室、薄膜、隔离框、腔室体和阴极室依次相互重叠后，用螺栓螺母，通过阳极室、腔室体和阴极室四周的螺孔，将其固定在电泳槽体上。
图1是电泳槽结构示意图。
图2是阳极室、阴极室的结构示意图。
图3是图2的A-A向剖视图。
图4是隔离框和薄膜装配图。
图5是图4的B-B向剖视图。
图6是腔室体。
图7是图5的C-C向剖视图。
图8是本发明工作流程设备示意图。
下面结合附图，详细介绍本发明的内容。图1中，1是螺母，2是电泳槽体，3是阳极室，4是隔离框，5是薄膜，6是腔室体，7是阴极室，8是螺栓，11是电极线。图2和图3中，9是螺孔，10是槽沟，12和13是液体进出口，图4是隔离框和薄膜装配图。图5和图6中，14是腔室体上开通的长方形槽沟，15是液体进出口。在具体实施过程中，隔离框、薄膜和腔室体分别有三个以上其数目根据分离量要求而定。三者相互重叠后，由于腔室体两侧为薄膜，腔室体上的长方形槽沟就形成为一个腔室。腔室按功能可分为进样室和冲洗室，二者间隔排列。隔室框的厚度略小于薄膜的厚度，其作用是保护薄膜不受伤。
图8是本发明工作流程设备示意图。
如图所示，在中间的电泳槽中，最两端是阳极室和阴极室，其内部设置有电极，电极与电源相联，用于产生电泳分离的电场。电泳槽由薄膜、隔离框和腔室体等相互叠加后组成若干个腔室，这些腔室根据功能不同分为进样室和冲洗室。进行电泳分离时，首先用泵将电极液从贮液槽中抽出，输送到电极室中。电极液在循环回路中经过冷却点，使电极液温度保持在4℃～10℃。然后用泵将样品溶液从贮液槽输送进样品室，等样品室充满溶液后，将泵关闭。过3-5分钟后再用泵将冲洗液输送到冲洗室，将从样品室中通过薄膜先后进入冲洗室中的蛋白质冲出。最后经过紫外检测仪测室产品的紫外吸收情况，检测仪将会给出一个吸收光强度信号，此信号记录在紫外检测仪的记录仪上，与产品收集器的信号一一对应，产品收集器即为需要分离的目标产品液。
权利要求
1.一种色谱式电泳分离设备，其特征在于分离设备为一窄长形电泳槽，电泳槽中沿长度方向平行设置阳极室、阴极室、隔离框、薄膜和腔室体，所述的阳极室和阴极室为一具有一定厚度的薄板，薄板四周有螺孔，板中间开有一槽沟，薄板二端开有液体进出口，与槽沟相通，槽沟中设有电极；所述的隔离框为一长方形框架，其厚度与薄膜厚度相等；所述的腔室体为一具有一定厚度的薄板，薄板四周有螺孔，薄板中间挖有开通的长方形槽沟，薄板二端开有液体进出口，与长方形槽沟相通；所述的阳极室、薄膜、隔离框、腔室体和阴极室相互重叠后，用螺栓、螺母通过阳极室、腔室体和阴极室四周的螺孔，装其固定在电泳槽体上。
2.如权利要求1所述的设备，其特征在于其中所述的隔离框、薄膜和腔室体分别有3个以上。
全文摘要
本发明涉及一种用于分离蛋白质不同组分的色谱式电泳分离设备，属生物化学技术领域。该设备为一窄长形电泳槽，电泳槽中纵向平行设置有阳极室、阴极室、隔离室、薄膜和腔室体。阳极室和阴极室为一薄板，板中间开有槽沟，槽沟内设有电线，由此产生电场。腔室体为一薄板，中间挖有开通的槽沟，二侧贴有薄膜，使槽沟成为一腔室。需分离的样品液送入样品腔室中，在电场作用下，利用样品组分在薄膜中的电迁移率的不同，不同组分先后从膜中移出，达到分离目的。
文档编号G01N33/68GK1083488SQ93108630
公开日1994年3月9日 申请日期1993年7月16日 优先权日1993年7月16日
发明者袁乃驹, 刘铮, 朱德权, 丁富新 申请人:清华大学