专利名称：Abo血型系统单克隆抗体分型试剂及其应用液的配制方法
技术领域：
本发明涉及一种鉴定人类血型，特别涉及一种代替人血清，鉴定人类血型的单克隆抗体分型试剂及其应用液的配制方法。
自1900年发现人类的ABO血型以来，对人类血型进行鉴定的试剂主要用人血清配制。这需要对大量的献血员进行筛选，不仅耗费大量宝贵的人血，筛选工作颇费工时，成本较高，而且由于献血员的个体差异，难以实现质量控制和标准化。不少学者曾先后对鱼类、蜗牛、扁豆等动、植物的组织浆液进行研究，但由于种种技术原因未能付诸于实际应用。
本发明的目的就是要克服上述缺陷，设计一种新型试剂以代替人血清用于血型鉴定。
本发明的技术方案用血型系统的A型、B型血液中的红细胞膜分别免疫BALB/C小鼠，与骨髓瘤SP2/O细胞融合，筛选出杂交瘤细胞，用有限稀释法进行克隆化后，注入同系小鼠腹腔诱生腹水，即得ABO血型系统单克隆抗体分型试剂。
其应用液的配制方法将小鼠腹水投入容器中进行稀释，稀释液配比0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。
本发明的效果在于配制出优质的ABO分型试剂，其单克隆抗体分型试剂的效价、亲合力均优于人血清分型试剂，而且成本低，其成本仅为人血清分型试剂的一半，原材料取之不尽、用之不竭，能够进行大批量工业化生产，能够实现质量控制和标准化，可以节省大量宝贵的人血，具有良好的经济效益和社会效益。
本发明的效果和优点将在下面的说明中得到进一步阐述。
实施例首先，选择抗原性强的A型献血员和B型献血员的血液中的红细胞膜，然后分别免疫BALB/C小鼠，产生抗A、抗B抗体的小鼠脾细胞，采用淋巴细胞杂交瘤技术，将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/O细胞进行融合，筛选出杂交瘤细胞，采用有限稀释法对杂交瘤细胞进行克隆化，获得抗A的49H和抗B的5D杂交瘤细胞系，然后将其保存在-8℃的液氮中。当需要使用时，将杂交瘤细胞从液氮中取出，注入到同系小鼠腹腔中诱生腹水，其腹水中含有所需的高效价抗A、抗B抗体。这样，就可以进行大批量工业化生产，勿需大量的人血液。
在常温常压下，抗A、抗B的腹水用稀释液稀释，稀释液为0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。1ml的腹水稀释1000倍，相当于2000ml人血液，可见其成本很低。将稀释后的应用液一滴与待鉴定的人血样一滴混合后进行反应，如与抗A抗体出现凝集，则血样为A型;如与抗B抗体出现凝集，则血样为B型;如与抗A、抗B抗体均出现凝集，则血样为AB型;如与抗A、抗B抗体均不凝集，则血样为O型。其鉴定方法与用人血清的方法相同。
配制抗A、抗B分型试剂应用液500ml，鉴定血型1亿人次，准确率达100%，可节省人血1000万ml。
权利要求
1.ABO血型系统单克隆抗体分型试剂，其特征在于A型、B型血液中的红细胞膜分别免疫BALB/C小鼠，产生抗A、抗B抗体的小鼠脾细胞，将此杂交瘤细胞，用有限稀释法进行克隆化后，注入同系小鼠腹腔，诱生腹水，即得ABO血型系统单克隆抗体分型试剂。
2.ABO血型系统单克隆抗体分型试剂的应用液的配制方法，其特征在于(1)将含ABO血型系统单克隆抗体分型试剂的小鼠腹水投入容器中;(2)进行稀释，稀释液配比0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。
全文摘要
本发明涉及一种鉴定人类血型，特别涉及一种代替人血清来鉴定人类血型的试剂及其应用液的配制方法。本发明采用杂交瘤技术，以血型系统的A抗原、B抗原，经过融合、筛选、克隆化，获得抗A、抗B抗体应用液。采用本发明之应用液一滴与血样一滴，即可迅速鉴定人血的血型，准确率达100％，其检测方法与人血清试剂相同。本发明可以通过大批量、工业化生产，免去从大量献血员所献血中分离人血清的方法，节约了大量宝贵的人血，具有良好的社会效果，而且本发明的试剂与人血清试剂相比，成本便宜一半，本发明之试剂生产的质控、标准化易于掌握、控制。
文档编号G01N33/53GK1092173SQ9311071
公开日1994年9月14日 申请日期1993年3月11日 优先权日1993年3月11日
发明者唐家琪 申请人:中国人民解放军南京军区后勤部军事医学研究所