末按料水比1:15加入蛋白酶5g/kg得蛋白混合液，蛋白混合液依次经用磷酸缓冲液调节pH值至6.0、48 ° C恒温水浴水解Ih、升温至65° C、按料水比1:10加入淀粉酶20g/kg酶解3h，酶解后的溶液依次经以5000r/min的转速离心lOmin、蒸馏水清洗沉淀3次、过滤沉淀、滤渣于48° C的干燥箱中干燥4h、粉碎、过100目筛即得柠檬非水溶性膳食纤维；步骤五，将步骤一中的柠檬汁、步骤三中的柠檬水溶性膳食纤维、步骤四中的柠檬非水溶性膳食纤维、稳定剂和白砂糖以一定比例混合调配成膳食纤维柠檬汁，膳食纤维柠檬汁再依次经43MPa的压力条件下均质两次、装罐、于91° C杀菌处理18min。所述稳定剂为CMC-Na和黄原胶，膳食纤维柠檬汁的各组分的混合比例按质量百分比设置为:柠檬汁:白砂糖:柠檬水溶性膳食纤维:柠檬非水溶性膳食纤维:CMC-Na:黄原胶=37:12:0.42:0.21:0.15:0.05。
[0017]制备马齿苋汁时:首先采用冷榨法榨取马齿苋汁，在马齿苋汁中加入0.05%的果胶酶并用塑料薄膜扎紧，在48° C的温度下水浴酶解4.5h，酶解后将马齿苋汁置于96° C中水浴灭酶18s，冷却，澄清备用。且马齿苋汁在澄清时，在马齿苋汁中加入0.07%的壳聚糖，并在48° C的温度下水浴1.5h，过滤，取澄清的马齿苋汁备用。
[0018]待白芍浆、膳食纤维柠檬汁和马齿苋汁制备完毕后，将茯苓、大麦、白萝卜籽、冬瓜依次进行混合、粉碎处理，并将粉碎后的混合粉料与白芍浆、膳食纤维柠檬汁、马齿苋汁混合，并向混合液中加入适量水，依次进行煎煮、过滤、除去渣滓得到滤液，然后再滤液中加入阿斯巴甜、维生素C、柠檬酸钠、柠檬酸，混合均匀即得到饮料。其检测方法为:
检测仪器与试剂:高效液相色谱仪、岛津LC-1OAT型栗、岛津SPD-1OAT型检测器、N2000色谱工作站、芍药苷峰由中国药品生物制品检定所提供；
色谱条件:色谱柱VP-ODS C18 (150mm X 4.6mm，5um);流动相:乙腈:水:冰醋酸=75:425:0.4 ;流速:1.0mL/min ;检测波长:230nm ;柱温:35° C ;进样量为5uL，色谱柱的理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000 ;
对照品溶液的制备:精密称取经五氧化二磷减压干燥36h的芍药苷对照品10mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度线，摇匀，精密量取ImL置1mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度线，摇匀，即得；
供试品溶液的制备:精密吸取10.0mL白芍马齿苋柠檬功能饮料置塞锥形瓶中，加入70%乙醇50mL，密塞，放置过夜，超声处理30min，摇匀，过滤，滤渣及滤器用70%乙醇20mL分3次-5次洗涤，洗液并入滤液中，蒸发至干，残渣加70%乙醇微热溶解，转移至25mL量瓶中，加70%乙醇至刻度线，摇匀，过滤，取续滤液，即得；
测定法:分别精密吸取上述两种对照品溶液和供试品溶液各5uL，注入高效液相色谱仪，测定，既得。
[0019]实施例3
一种白芍马齿苋柠檬功能饮料中芍药苷含量的检测方法，其中所述白芍马齿苋柠檬功能饮料的配方为，按重量份计:
白芍浆200份，膳食纤维柠檬汁510份，马齿苋汁610份，白砂糖240份，茯苓120份，大麦480份，白萝卜籽180份，冬瓜75份，柠檬酸2份，阿斯巴甜38份，维生素C18份，柠檬酸钠48份，水18000份。
[0020]其中，制备白芍浆时，将去皮称重后的白芍切片迅速放入亚硫酸氢钠0.05%、柠檬酸0.15%、抗坏血酸0.15%的混合液中护色20min，将白芍切片取出，并按照白芍切片:水=1:5的比例放入打浆机中制得白芍浆备用。
[0021]制备膳食纤维柠檬汁时，共可分五步走:步骤一，将新鲜无腐烂的柠檬洗净、去皮、去核、切薄片，将薄片柠檬放入榨汁机榨汁，将榨取的柠檬汁在89° C的温度下水浴9min，柠檬汁放入5° C的冰箱中密封保存备用；步骤二，柠檬皮切成小条并与步骤一中榨汁后的柠檬废渣依次经49° C的干燥箱中干燥5h、粉碎机粉碎、100目筛分5° C的冰箱中密封保存备用；步骤三，将步骤二中的粉碎粉末按料液比1:25加入蒸馏水得混合溶液，调节混合溶液PH值为2.4，混合溶液在84° C的环境中酸解lOOmin，冷却过滤，滤渣烘干备用，滤液以3400 r/min离心处理19min，取上清液，并用4倍上清液体积的无水乙醇沉淀，静置24h后过滤，滤渣于59° C的环境中干燥4h，粉碎并过100目筛得到柠檬水溶性膳食纤维；步骤四，将酸解烘干后的滤渣粉碎过100目筛，筛下粉末按料水比1:15加入蛋白酶5g/kg得蛋白混合液，蛋白混合液依次经用磷酸缓冲液调节PH值至6.0、49° C恒温水浴水解1.5h、升温至65° C、按料水比1:10加入淀粉酶20g/kg酶解4h，酶解后的溶液依次经以5000r/min的转速离心lOmin、蒸馏水清洗沉淀4次、过滤沉淀、滤渣于49° C的干燥箱中干燥5h、粉碎、过100目筛即得柠檬非水溶性膳食纤维；步骤五，将步骤一中的柠檬汁、步骤三中的柠檬水溶性膳食纤维、步骤四中的柠檬非水溶性膳食纤维、稳定剂和白砂糖以一定比例混合调配成膳食纤维柠檬汁，膳食纤维柠檬汁再依次经44MPa的压力条件下均质两次、装罐、于93° C杀菌处理19min。所述稳定剂为CMC-Na和黄原胶，膳食纤维柠檬汁的各组分的混合比例按质量百分比设置为:柠檬汁:白砂糖:柠檬水溶性膳食纤维:柠檬非水溶性膳食纤维:CMC-Na:黄原胶=43:13:0.52:0.28:0.17:0.03。
[0022]制备马齿苋汁时:首先采用冷榨法榨取马齿苋汁，在马齿苋汁中加入0.05%的果胶酶并用塑料薄膜扎紧，在49° C的温度下水浴酶解4.8h，酶解后将马齿苋汁置于98° C中水浴灭酶19s，冷却，澄清备用。且马齿苋汁在澄清时，在马齿苋汁中加入0.07%的壳聚糖，并在49° C的温度下水浴1.8h，过滤，取澄清的马齿苋汁备用。
[0023]待白芍浆、膳食纤维柠檬汁和马齿苋汁制备完毕后，将茯苓、大麦、白萝卜籽、冬瓜依次进行混合、粉碎处理，并将粉碎后的混合粉料与白芍浆、膳食纤维柠檬汁、马齿苋汁混合，并向混合液中加入适量水，依次进行煎煮、过滤、除去渣滓得到滤液，然后再滤液中加入阿斯巴甜、维生素C、柠檬酸钠、柠檬酸，混合均匀即得到饮料。其检测方法为:
检测仪器与试剂:高效液相色谱仪、岛津LC-1OAT型栗、岛津SPD-1OAT型检测器、N2000色谱工作站、芍药苷峰由中国药品生物制品检定所提供；
色谱条件:色谱柱VP-ODS C18 (150mm X 4.6mm，5um);流动相:乙腈:水:冰醋酸=75:425:0.4 ;流速:1.0mL/min ;检测波长:230nm ;柱温:35° C ;进样量为5uL，色谱柱的理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000 ;
对照品溶液的制备:精密称取经五氧化二磷减压干燥36h的芍药苷对照品10mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度线，摇匀，精密量取ImL置1mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度线，摇匀，即得；
供试品溶液的制备:精密吸取10.0mL白芍马齿苋柠檬功能饮料置塞锥形瓶中，加入70%乙醇50mL，密塞，放置过夜，超声处理30min，摇匀，过滤，滤渣及滤器用70%乙醇20mL分3次-5次洗涤，洗液并入滤液中，蒸发至干，残渣加70%乙醇微热溶解，转移至25mL量瓶中，加70%乙醇至刻度线，摇匀，过滤，取续滤液，即得；
测定法:分别精密吸取上述两种对照品溶液和供试品溶液各5uL，注入高效液相色谱仪，测定，既得。
[0024]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种白芍马齿苋柠檬功能饮料中芍药苷含量的检测方法，其中所述白芍马齿苋柠檬功能饮料的配方为: 白芍浆170-210份，膳食纤维柠檬汁450-520份，马齿苋汁550-620份，白砂糖200-250份，茯苓60-140份，大麦300-500份，白萝卜籽100-200份，冬瓜40-80份，柠檬酸1-2份，阿斯巴甜20-40份，维生素C10-20份，柠檬酸钠30-50份，水10000-20000份；将白芍浆、膳食纤维柠檬汁、马齿苋汁、茯苓、大麦、白萝卜籽、冬瓜混合，粉碎，加入水煎煮，过滤，除去渣滓，在滤液中加入阿斯巴甜、维生素C、柠檬酸钠、梓檬酸，得到饮料；其特征在于，其检测方法为: 检测仪器与试剂:高效液相色谱仪、岛津LC-10AT型栗、岛津SPD-10AT型检测器、N2000色谱工作站、芍药苷峰由中国药品生物制品检定所提供； 色谱条件:色谱柱VP-ODS C18 (150mm X 4.6mm，5um);流动相:乙腈:水:冰醋酸=75:425:0.4 ;流速:1.0mL/min ;检测波长:230nm ;柱温:35° C ;进样量为5uL，色谱柱的理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000 ; 对照品溶液的制备:精密称取经五氧化二磷减压干燥36h的芍药苷对照品10mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度线，摇匀，精密量取ImL置1mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度线，摇匀，即得； 供试品溶液的制备:精密吸取10.0mL白芍马齿苋柠檬功能饮料置塞锥形瓶中，加入70%乙醇50mL，密塞，放置过夜，超声处理30min，摇匀，过滤，滤渣及滤器用70%乙醇20mL分3次-5次洗涤，洗液并入滤液中，蒸发至干，残渣加70%乙醇微热溶解，转移至25mL量瓶中，加70%乙醇至刻度线，摇匀，过滤，取续滤液，即得； 测定法:分别精密吸取上述两种对照品溶液和供试品溶液各5uL，注入高效液相色谱仪，测定，既得。
【专利摘要】本发明公开了一种白芍马齿苋柠檬功能饮料中芍药苷含量的检测方法，属于药物含量检测技术领域中用于检测功能饮料中芍药苷的检测方法，其目的在于提供一种白芍马齿苋柠檬功能饮料中芍药苷含量的检测方法，从而严格控制功能饮料中芍药苷的含量，确保功能饮料的功效。其技术方案为：色谱条件：色谱柱VP-ODS？C18（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈：水：冰醋酸=75:425:0.4；流速：1.0ml/min；检测波长：230nm；柱温：35℃；进样量为5μl，色谱柱的理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000。本发明适用于检测功能饮料中芍药苷的检测方法。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105136919
【申请号】CN201510447826
【发明人】王江涛
【申请人】渠县金穗农业科技有限公司
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年7月28日