一种鱼腥草滴眼液的质量控制方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种质量控制方法，具体涉及一种鱼腥草滴眼液的质量控制方法。
【背景技术】
[0002] 鱼腥草为三白草科多年生草本植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的带根全 草，有名侧耳根、紫蕺、猪鼻孔、九节莲等，其新鲜植株破碎后有刺鼻的腥臭味，广泛分布于 我国中部、东南及西南各省区，尤以湖南、湖北、四川、江苏等省居多。鱼腥草具有清热解毒、 消痈排脓、利尿通淋的功效，临床用于肺痈吐脓、痰热喘咳、热痢、热淋、痈肿疮毒等症。研究 表明，鱼腥草中含有挥发性成分、黄酮类、有机酸、留醇类、生物碱类等成分。鱼腥草主要以 嫩茎叶和地下茎工作蔬菜食用，全株可鲜用或晒干入药，已经被国家卫生部正式确定为"既 是药品，又是食品"的极具开发潜力的资源之一，日益受到人们的关注。
[0003] 鱼腥草滴眼液是经过水汽蒸馏制备而得，主要成分为其挥发性成分。现有技术关 于鱼腥草滴眼液质量控制的项目有形状、pH值、甲基正壬酮的薄层鉴别及甲基正壬酮的含 量测定。但是由于鱼腥草滴眼液的主要成分为鱼腥草提取液，而提取液中的有效成分复杂， 只对甲基正壬酮进行鉴别和含量测定，检测手段过于简单，相对于目前药品质量控制的要 求有较大的差距。故现有质量控制方法不能有效控制鱼腥草滴眼液的质量，从而影响产品 的生产和保证质量。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种鱼腥草滴眼液的质量控制方 法，该方法操作简便、精密度和灵敏度高、稳定性好，确保了鱼腥草滴眼液的质量的安全、均 一、稳定、有效、可控。
[0005] 本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种鱼腥草滴眼液的质量控制方法，它 包括以下步骤：
[0006] SI.甲基正壬酮的薄层鉴别
[0007] 取甲基正壬酮对照品，加无水乙醇制成每1ml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液10 μ 1及供试品溶液20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层 板上，点成条斑，以环己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液，供 试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
[0008] S2.甲基正壬酮的含量测定
[0009] 色谱条件与系统适用性试验：ΗΡ-50+毛细管柱；程序升温：初始温度为70°C，保持 5分钟；以每分钟5 °C的速率升至140 °C，保持5分钟，再以每分钟20°C的速率升至250 °C ; 进样口温度：230°C ;检测器：FID ;检测器温度：280°C ;载气：N2;载气流速：1.0ml/min ;分流 比：5:1 ;理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000 ;
[0010] 对照品溶液的制备：取甲基正壬酮对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml 含25 μ g的溶液，即得；
[0011] 供试品溶液的制备：精密量取待测样品25ml，通过已预处理好的C8固相萃取小 柱，用乙酸乙酯-乙醇的混合溶液洗脱，收集洗脱液约I. 8ml，置2ml量瓶中，加乙酸乙 酯-乙醇的混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得；
[0012] 测定法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2 μ 1，分别注入气相色谱仪，测定， 即得；
[0013] 本品每1ml含鲜鱼腥草以甲基正壬酮计，不得少于4. 0 μ g ;
[0014] S3.特征图谱
[0015] A.参照物溶液的制备：取α -松油醇对照品、4-萜品醇对照品、甲基正壬酮对照 品、乙酸龙脑酯对照品适量，精密称定，分别加无水乙醇制成每1ml含25 μ g的溶液，即得；
[0016] B.供试品溶液的制备：精密量取待测样品25ml，通过已预处理好的(：8固相萃取 小柱，用乙酸乙酯-乙醇的混合溶液洗脱，收集洗脱液约I. 8ml，置2ml量瓶中，加乙酸乙 酯-乙醇的混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得；
[0017] C.测定：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各2 μ 1，注入气相色谱仪，测定；
[0018] 供试品特征图谱中应呈现6个特征峰，其中4个峰应分别与α-松油醇对照品、 4-萜品醇对照品、甲基正壬酮对照品、乙酸龙脑酯对照品峰保留时间相一致；与甲基正壬 酮对照品相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，应在规定值的±5%之内； 规定值为：〇. 782 (峰 1)、0. 820 (峰 2)、0. 878 (峰 3)、0. 909 (峰 4)、1. 000 (峰 S)、1. 052 (峰 5) 〇
[0019] 进一步地，所述环己烷-乙酸乙酯中环己烷和乙酸乙酯的体积比为9:1。
[0020] 进一步地，所述乙酸乙酯-乙醇的混合溶液中乙酸乙酯和乙醇的体积比为7:3。
[0021] 进一步地，步骤S3中所述气相色谱仪的色谱条件为：色谱条件与系统适用性试 验：ΗΡ-50+毛细管柱；程序升温：初始温度为70°C，保持5分钟；以每分钟5°C的速率升至 140°C，保持5分钟，再以每分钟20°C的速率升至250°C。进样口温度：230°C ;检测器：FID ; 检测器温度：280°C ;载气：N2;载气流速：1.0ml/min ;分流比：5:1 ;理论板数按甲基正壬酮 峰计算应不低于8000。
[0022] 本发明具有以下优点：本发明按中国药典2010年版《中药质量标准分析方法验证 指导原则》对原标准各检测项目进行方法验证，对存在问题的项目进行完善；利用鱼腥草注 射液的研究基础，增加其他成分的鉴别（萜品醇等成分）；增加采用GC法对松油醇、乙酸龙 脑酯等的鉴别。按照要求，通过研究，更改了甲基正壬酮薄层鉴别中供试品溶液的制备方 法；参照鱼腥草注射液的研究内容，增加了 GC法对松油醇、乙酸龙脑酯、萜品醇等成分的鉴 另IJ，并建立该品种的特征图谱检查，以保证质量的均一稳定。因此，本发明提供一种鱼腥草 滴眼液的质量控制方法，该方法操作简便、精密度和灵敏度高、稳定性好，确保了鱼腥草滴 眼液的质量的安全、均一、稳定、有效、可控。
【附图说明】：
[0023] 图1为甲基正壬酮的TLC鉴别图；
[0024] 图2为甲基正壬酮的TLC鉴别图（天津铝箱板）；
[0025] 图3为甲基正壬酮的TLC鉴别图（青岛海洋预制板）；
[0026] 图4为甲基正壬酮的TLC鉴别图（Merk板）；
[0027] 图5为甲基正壬酮的TLC鉴别图（手铺板）；
[0028] 图6为甲基正壬酮的TLC鉴别图，温度30°C、湿度55% ;
[0029] 图7为甲基正壬酮的TLC鉴别图，温度18°C、湿度75% ;
[0030] 图8为对照特征图谱，图中，峰3 :4_萜品醇；峰4 : α -松油醇；峰S :甲基正壬酮； 峰5 :乙酸龙脑酯；
[0031] 图9为甲基正壬酮标准曲线图。
【具体实施方式】
[0032] 下面结合附图及实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以 下所述：
[0033] 实施例1 :
[0034] 鱼腥草滴眼液的制法为：取鲜鱼腥草2000g进行水蒸气蒸馏，收集初馏液2000ml， 再进行重蒸馏，收集重蒸馏液1000ml，加入等量注射用水，再进行重蒸馏，收集精馏液 900ml，加入氯化钠7g、聚山梨酯805g及羟苯乙酯0. 3g，混匀，加注射用水使成1000ml，滤 过，灌封，即得。
[0035] 实施例2 :
[0036] 上述实施例1的鱼腥草滴眼液的质量控制方法，它包括以下步骤：
[0037] SI.甲基正壬酮的薄层鉴别
[0038] 取甲基正壬酮对照品，加无水乙醇制成每1ml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取对照品溶液10 μ 1及供试品溶液20 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层 板上，点成条斑，以环己烷-乙酸乙酯为展开剂，环己烷-乙酸乙酯中环己烷和乙酸乙酯的 体积比为9:1，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点；
[0039] S2.甲基正壬酮的含量测定
[0040] 色谱条件与系统适用性试验：ΗΡ-50+毛细管柱；程序升温：初始温度为70°C，保持 5分钟；以每分钟5 °C的速率升至140 °C，保持5分钟，再以每分钟20°C的速率升至250 °C ; 进样口温度：230°C ;检测器：FID ;检测器温度：280°C ;载气：N2;载气流速：1.0ml/min ;分流 比：5:1 ;理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000 ;
[0041] 对照品溶液的制备：取甲基正壬酮对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml 含25 μ g的溶液，即得；
[0042] 供试品溶液的制备：精密量取待测样品25ml，通过已预处理好的C8固相萃取小 柱，用乙酸乙酯-乙醇的混合溶液洗脱，收集洗脱液约I. 8ml，置2ml量瓶中，加乙酸乙 酯-乙醇的混合溶液稀释至刻度，乙酸乙酯和乙醇的体积比为7:3,摇勾，即得；
[0043] 测定法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2 μ 1，分别注入气相色谱仪，测定， 即得；
[0044] 本品每1ml含鲜鱼腥草以甲基正壬酮计，不得少于4. O μ g ;
[0045] S3.特征图谱
[0046] A.参照物溶液的制备：取α -松油醇对照品、4-萜品醇对照品、甲基正壬酮对照 品、乙酸龙脑酯对照品适量，精密称定，分别加无水乙醇制成每1ml含25 μ g的溶液，即得；
[0047] B.供试品溶液的制备：精密量取本品25ml，通过已预处理好的C8固相萃取小柱 (IOOmg :1ml)，用乙酸乙酯-乙醇（7:3)的混合溶液洗脱，收集洗脱液约1.8ml，置2ml量瓶 中，加上述混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得。