缘生替尼特征峰与顺丁烯二酸的质子 峰面积比的均值为3. 00,RSD为0. 2%，检查合格。
[0092] 实施例3 :本发明提供方法的线性及范围
[0093] 按照表3分别配置6个浓度的样品溶液；采用本发明提供的方法对检测各个溶液 中二对甲苯磺酸缘生替尼的含量进行检测，检测条件为：
[0094] 仪器：BrukerAV-400超导核磁共振谱仪；
[0095] 溶剂：氖代DMSO;
[0096] 脉冲宽度：Pl= 10. 0ys;
[0097] 脉冲延迟时间：D1 =Is;
[0098] 扫描次数：ns = 32 ;
[0099] 检测结果如表3所示：
[0100] 表3二对甲苯磺酸缘生替尼溶液的线性测试结果
[0101]
[0102] 本发明根据表3中数据，以二对甲苯磺酸缘生替尼与顺丁烯二丁酸的质量比为横 坐标（X)，二对甲苯磺酸缘生替尼特征峰与顺丁烯二丁酸的特征峰的积分面积比值为纵坐 标（Y)，做线性回归，如图4所示，图4为二对甲苯磺酸缘生替尼供试品溶液的线性回归曲线 图；二对甲苯磺酸缘生替尼供试品溶液的线性方程回归方程为：Y= 0. 1279X+0. 0207,线性 相关系数r= 0.9999。结果表明：核磁共振波谱法用于二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有 效成分的定量测定，线性关系良好。
[0103] 结果表明，二对甲苯磺酸缘生替尼在线性范围为3. 38mg/mL~41. 12mg/mL，符合 验证方案要求（线性范围：至少在进样浓度80%~120%的范围内），线性方程回归系数r 为0. 9998,符合验证方案要求（回归系数应不小于0. 999)
[0104] 实施例4
[0105] 配制6个实施例1制得的二对甲苯磺酸缘生替尼原料药的样品溶液，每个样品溶 液测定两次，用内标溶液计算主成份含量。结果为表4所示：
[0106] 表4二对甲苯磺酸缘生替尼溶液重复性的测定结果
[0107]
[0108] 从表4可以看出：6次测定结果，二对甲苯磺酸缘生替尼的平均含量为99. 2%，相 对标准偏差RSD为0. 001 %，符合验证方案的要求，证实该方法具有一定的精密度。
[0109] 实施例5
[0110] 考察二对甲苯磺酸缘生替尼原料供试品溶液随时间变化的规律，在常温环境下将 供试品溶液放置〇h、lh、2h、4h、6h、8h后，考察供试品溶液检查结果的变化情况，要求各时 间点检查结果的RSD不得大于2. 0%，为检测时供试品溶液的放置时间提供依据。
[0111] 表5耐用性考察一一溶液稳定性试验结果
[0114] 结论：加入内标的二对甲苯磺酸缘生替尼供试品溶液在常温8h内稳定。
[0115] 实施例6
[0116] 本实施例对实施例1制得的二对甲苯磺酸缘生替尼的含量进行检测，检测条件 为：
[0117] 仪器：BrukerAV-400超导核磁共振谱仪；
[0118] 溶剂：氘代DMS0;
[0119] 脉冲宽度：Pl= 10.Oys;
[0120] 脉冲延迟时间：D1 =Is;
[0121] 扫描次数：ns= 32;
[0122] 空白溶液：氘代二甲基亚砜；
[0123] 内标储备液的制备：称取顺丁烯二丁酸IOmg置于核磁样品管中，加入LOmL的氘 代DMSO溶解，摇匀作为内标储备液；
[0124] 将内标储备液用氘代DMSO进行稀释至浓度为lmg/L的顺丁烯二酸溶液，作为内标 工作液。
[0125] 本实施例将二对甲苯磺酸缘生替尼原料药IOmg置于核磁样品管中，加入浓度为 lmg/mL的顺丁烯二丁酸50yL，再加入0. 45mL的氘代DMSO溶解，摇匀作为样品溶液。本实 施例对样品溶液平行测定三次，测试结果如表6所示，表6为得到的二对甲苯磺酸缘生替尼 原料药的检测结果：
[0126] 表6二对甲苯磺酸缘生替尼原料药的核磁共振氢谱检测结果
[0127]
[0128] 对比例1
[0129] 本发明将实施例6得到的二对甲苯磺酸缘生替尼原料药进行高效液相色谱检测， 检测条件为：
[0130] 仪器：安捷伦高效液相色谱仪配备紫外检测器；
[0131] 色谱柱：WatersSymmetryC18 柱，250*4. 6mm, 5ym;
[0132] 流动相A:甲醇；
[0133]流动相BjJC;
[0134] 流动相比例：A:B= 72:28 ;
[0135]检测波长：240nm;
[0136]流速：1.OmT,/min；
[0137]进样量：IOyL;
[0138] 柱温：40°C;
[0139] 运行时间：25min。
[0140] 检测结果如表7所示，表7为比较例1的二对甲苯磺酸缘生替尼原料药的高效液 相检测结果：
[0141] 表7比较例1的二对甲苯磺酸缘生替尼原料药的高效液相检测结果
[0142]
[0143] 由以上实施例可知，本发明提供了一种二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有效成分 的定量检测方法，包括以下步骤：将二对甲苯磺酸缘生替尼原料药通过核磁共振谱仪进行 检测，得到二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有效成分的含量；所述检测的内标为顺丁烯二 酸。本发明提供的方法系统适用性强，具有良好的精密度，耐用性好；本发明为二对甲苯磺 酸缘生替尼原料药中有效成分的含量的测定提供了方法依据。实验结果表明：采用本发明 提供的方法，二对甲苯磺酸缘生替尼供试品溶液连续测定6次，主峰峰面积的RSD为0. 2%; 二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有效成分平均含量为99. 1%，相对标准偏差为0. 1%;耐用 性主要考虑溶液稳定性：供试品溶液在8h内稳定。并且，检测结果表明，采用本发明提供的 方法重复性RSD为0. 1%，线性回归系数为r= 0. 9998。
[0144] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有效成分的定量检测方法，包括以下步骤： 将二对甲苯磺酸缘生替尼原料药通过核磁共振谱仪进行检测，得到二对甲苯磺酸缘生 替尼原料药中有效成分的含量；所述检测的内标为顺丁烯二酸。2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述顺丁烯二酸以顺丁烯二酸溶液 的形式作为内标； 顺丁烯二酸溶液中的溶剂为氘代二甲基亚砜。3. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述顺丁烯二酸和所述二对甲苯磺 酸缘生替尼原料药的质量比为0. 048~0. 052:10。4. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测中以化学位移为6. 28的特 征峰为顺丁烯二酸的定量峰。5. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测中以化学位移为5. 31的特 征峰为二对甲苯磺酸缘生替尼原料药的定量峰。6. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述核磁共振谱仪的脉冲宽度为 10. 0yS07. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述核磁共振谱仪的弛豫时间为 Is~18s〇8. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述核磁共振谱仪的扫描次数为32。9. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述二对甲苯磺酸缘生替尼原料药 进行检测前先溶解，所述溶解采用的溶剂为氘代二甲基亚砜。10. 根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述二对甲苯磺酸缘生替尼原料药 的质量和氖代二甲基亚砜的体积比为IOmg:0. 5mL。
【专利摘要】本发明提供了一种二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有效成分的定量检测方法，包括以下步骤：将二对甲苯磺酸缘生替尼原料药通过核磁共振谱仪进行检测，得到二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有效成分的含量；所述检测的内标为顺丁烯二酸。本发明提供的方法系统适用性强，具有良好的精密度，耐用性好；本发明为二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有效成分含量的测定提供了方法依据。实验结果表明：二对甲苯磺酸缘生替尼供试品溶液连续测定6次，主峰峰面积的RSD为0.2％；二对甲苯磺酸缘生替尼原料药中有效成分平均含量为99.1％，相对标准偏差为0.1％；供试品溶液在8h内稳定；采用此方法重复性RSD为0.1％，线性回归系数为0.9998。
【IPC分类】G01N24/08
【公开号】CN105223223
【申请号】CN201510767204
【发明人】萧伟, 仲艳, 李家春, 陈保来, 王志霞, 刘利, 黄文哲, 王振中
【申请人】江苏康缘药业股份有限公司
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年11月11日