> 超声波提取10min、12000r/min离心10min、0.22ym微孔膜过滤、UPLC-Q-TOF分析。
[0014]实施例2茶树新梢组织的儿茶素组分分析前处理
在编好号的2mL离心管中加入提取试剂(0.5mL80%甲醇+1%甲酸)和2粒直径为5mm的钢珠，盖好盖子;对每个编号的离心管(已加入提取试剂和钢珠)进行称重并记录，即样品管第一次计重;然后将以上编号并装入提取试剂和钢珠的离心管放入_20°C预冷30min;使用微量药匙取100 mg左右样品小心装入预冷后的样品管中；将球磨仪适配器放入-20°C预冷30min，将样品管装入球磨仪适配器中，采用微量球磨仪30 Hz，研磨30 s;对加入样品的样品管二次称重，并记录重量，与样品管第一次计重取差值即为样品净重;按照样品净重及固定料液比10mg:1mL提取试剂的比例计算所需提取试剂的体积，并使用微量加液器配平每管样品的料液比；超声波提取10!11；[11、120001'/111；[11离心10111；[11、0.2241]1微孔膜过滤、即]^分析。
[0015]实施例3微量药匙的设计
微量药匙由取样器I和手柄2构成，取样器I为中空圆筒状，空腔即为样品仓，用于盛装样品，取样器I的上端开口，其侧壁上部设有长条形的开口槽3，方便观察样品仓中所盛装样品的情况;取样器的下底面的中央设有具内螺纹的调节孔4。手柄2由圆形的定量片6和与定量片6固定连接的调节杆7组成，调节杆7靠近的定量片6的一端设有与调节孔4相配合的调节螺纹8，使用时，将调节杆7从取样器I开口端插入，并穿过调节孔4，此时，定量片6位于取样器I的腔体内，调节杆7远离定量片6的一端穿过调节孔4并伸出到取样器I的外侧。为了实现半定量取样，在取样器I的侧壁上设有刻度5，将定量片6调节到相应的刻度位置时，即量取所相应体积的样品。作为优选，该微量半定量取样装置的规格最好设计为如下:取样器I的内径为3 mm，长度为25 mm，调节杆7的直径为2 mm，长度为100 mm，开口槽3的开口宽度为取样器周长的1/6，定量片6的直径为3 mm;定量调节螺纹7的外径等于调节孔4的内径，为2 mm。
[0016]使用时，一只手捏住取样器I的外侧，另一只手转动手柄2的调节杆7，调节样品仓大小至相应刻度。持调节杆7g取样品粉末，使得药匙储样槽中全部装满样品，小心倒入天平中的称量纸上，称量计重，重复称量下一个样品。
【主权项】
1.一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法，其特征在于主要包括如下步骤: 1)样品管准备:在编好号的离心管中加入提取试剂和钢珠，盖好盖子； 2)样品管第一次计重:对加入提取试剂和钢珠的离心管进行称重并记录； 3)样品管预冷:将以上装入提取试剂和钢珠的离心管放入-20°C预冷30min; 4)半定量取样:使用微量药匙取固定体积样品小心装入预冷后的样品管中； 5)精细研磨:将球磨仪适配器放入_20°C预冷30min，将样品管装入球磨仪适配器中，采用微量球磨仪进行研磨，研磨频率为30Hz，时间为30s; 6)样品管二次计重:对加入样品的样品管二次称重，并记录重量，与样品管第一次计重取差值即为样品净重； 7)微量配平:按照样品净重及固定料液比计算所需提取试剂的体积，并使用微量加液器配平每管样品的料液比； 8)震荡提取、离心、过滤、分析:根据实验要求采用超声浸提、离心、并过滤后进行分析。2.根据权利要求1所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法，其特征在于:所述的离心管规格为2mL离心管，加入的钢珠直径为5mm，每个离心管加入2粒。3.根据权利要求1所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法，其特征在于:步骤I)中提取试剂加入量为0.5ml。4.根据权利要求1所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法，其特征在于:步骤4)中的微量药匙由取样器(I)和手柄(2)构成，所述的取样器(I)为中空圆筒状，上端开口，其侧壁上部设有开口槽(3)，取样器的下底面设有具内螺纹的调节孔(4);取样器(I)的侧壁上设有刻度(5);所述的手柄(2)由圆形的定量片(6)和与之固定连接的调节杆(7)组成，定量片(6)位于取样器(I)的腔体内，调节杆(7)靠近的定量片(6)的一端设有与调节孔(4)相配合的调节螺纹(8)，调节杆(7)另一端穿过调节孔(4)并伸出到取样器(I)的外侧。5.根据权利要求2所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法，所述定量取样器(I)的内径为3 mm，长度为25 _，调节杆(7)的直径为2 mm，长度为100 mm,开口槽(3)的开口宽度为取样器周长的1/6，定量片(6)的直径为3 mm;定量调节螺纹(7)的外径等于调节孔(4)的内径，为2 _。6.根据权利要求1至5中任意一项所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法在提取茶树新梢组织的代谢组学分析前处理上的应用。7.根据权利要求1至5中任意一项所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法在茶树新梢组织的儿茶素组分分析前处理上的应用。8.根据权利要求6所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法在提取茶树新梢组织的代谢组学分析前处理上的应用，其特征在于提取试剂为80%甲醇(重量)和1%甲酸(重量)的混合液。9.根据权利要求7所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法在茶树新梢组织的儿茶素组分分析前处理上的应用，其特征在于提取试剂为80%(重量)甲醇和1%(重量)甲酸的混合液。
【专利摘要】一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法，其特征在于主要包括如下步骤：1）样品管准备；2）样品管第一次计重；3）样品管预冷；4）半定量取样；5）精细研磨；6）样品管二次计重；7）微量配平；8）震荡提取、离心、过滤、分析。本发明不仅大大简化了实验操作过程，提高了工作效率，而且该方法对于环境要求低，可以在任何室温进行操作，不影响实验结果，实验结果一致性强，结果稳定性高。
【IPC分类】G01N1/28
【公开号】CN105571918
【申请号】CN201610030284
【发明人】张群峰, 石元值, 马立锋, 伊晓云, 刘美雅, 倪康, 阮建云
【申请人】中国农业科学院茶叶研究所
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年1月18日