同时检测感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法
【专利摘要】本发明提供了一种测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，旨在提供一种测定准确、操作简单的测定感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法；该方法是：量取本品1ml置20ml容量瓶中，加体积比1：1的甲醇和乙腈其溶解，蒸干溶剂，用乙腈定容至20ml刻度线，混匀过滤膜，取滤液入超高效液相色谱仪进行检测；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
同时检测感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法
技术领域
[0001] 本发明提供一种测定黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，具体地说，是一种同 时检测感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 感冒止咳糖浆由黄芩、金银花、葛根等9味药材加工而成，收载于《卫生部药品标 准》中药成方制剂第三册，具有解表清热、止咳化痰之功效，用于感冒或流感、头痛鼻塞、肢 痛等症。黄芩具有清热燥湿、泻火解毒等作用，用于肺热咳嗽，高热烦咳等证。原标准仅以性 状、检查项目评价其质量，而无对黄芩质量进行控制的指标。黄芩主含黄酮类化合物，是黄 芩的主要有效成分，黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素均为黄芩中的黄酮类化合物，现在还没有同 时控制这三个成分的方法。
【发明内容】
[0003] 针对上述不足，本发明的目的是提供一种测定准确、操作简单的测定感冒止咳糖 浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0005] -种同时检测感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法，该方法依次包 括下述步骤：
[0006] 1)量取本品1ml置20ml容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腈其溶解，蒸干溶剂，用 乙腈定容至20ml刻度线，混匀过滤膜，取滤液入超高效液相色谱仪进行检测；
[0007] 2)超高效液相色谱法进行分析时的参数设置如下：
[0008] 所述的分析柱ACE Excel 2C18-PFP，规格为4.6wnX 250mm，5wn，流速0.8ml ? min-1，柱温30°C，检测波长276nm，进样量为2yL;流动相A为乙腈，流动相B为0.1 %磷酸溶液;梯 度洗脱程序：〇~2.5min，5%A、95%B;2.5-5.1min，30%~70%A、70%~30%B;5.1-12min， 90%A、10%B;在 2%A、98%B 下平衡 lmin。
[0009] 进一步的，上述的同时检测感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法，所 述的滤膜为〇. 22微米的滤膜。
[0010] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案建立了高效液相色谱同时测定感冒止咳 糖浆中黄芩三个成分黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法，能与其他物质完全分离，且峰 形好，测定准确、操作简单，可作为感冒止咳糖浆中黄芩的质量控制指标。
【具体实施方式】
[0011] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0012] 本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶 质为固体的均为质量浓度。
[0013] 实施例1
[0014] -种同时检测感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法，该方法依次包 括下述步骤：
[0015] 1)量取本品1ml置20ml容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腈其溶解，蒸干溶剂，用 乙腈定容至20ml刻度线，混匀过0.22微米滤膜，取滤液入超高效液相色谱仪进行检测；
[0016] 2)超高效液相色谱法进行分析时的参数设置如下：
[0017] 所述的分析柱ACE Excel 2C18-PFP，规格为4.6wnX 250mm，5_，流速0.8ml ? min-1，柱温30°C，检测波长276nm，进样量为2yL;流动相A为乙腈，流动相B为0.1 %磷酸溶液;梯 度洗脱程序：〇~2.5min，5%A、95%B;2.5-5.1min，30%~70%A、70%~30%B;5.1-12min， 90%A、10%B;在 2%A、98%B 下平衡 lmin。
[0018] 为了验证本法明提供的技术方案，按照同法制备缺黄芩的的阴性对照品，按照上 述方法制备对照品溶液，在同样的谱条件进样检测。结果阴性供试品在黄芩苷、黄芩素、汉 黄芩素峰位置无吸收峰，表明处方中的其他成分对黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量测定无 阴性干扰。
[0019] 将同一份对照品溶液重复进样6次，按峰面积计算黄芩苷的RSD为0.96 %，黄芩素 的RSD为0.89%，汉黄芩素的RSD为0.93%，结果表明：仪器精密度良好。
[0020] 精密称取黄芩苷对照品15.4 lmg置10ml容量瓶中，黄芩素12.12mg、汉黄芩素 16.40mg分别置100ml容量瓶中，均加乙腈使溶解并稀释至刻度，混匀即得，作为对照品储备 液。并用移液管精密量取上述三样对照品储备液各lml，加到50ml容量瓶中并加乙腈制成 lml含30.8yg黄芩苷、2.42yg黄芩素和3.28yg汉黄芩素的混和溶液，作为对照品溶液。
[0021] 按上述色谱条件分别精密吸取上述对照品溶液0.2、1、2、3、5iil注入色谱仪，测定， 以峰面积积分值为纵坐标(Y)，对照品进样量(ng)为横坐标(X)绘制标准曲线，得柚皮苷的 回归方程为:Y = 321.1X+4.13(r = 0.9996);橙皮苷的回归方程为:Y = 253.6X+3.65(r = 0.9997);黄芩苷的回归方程为：Y= 220.9X-3.2(r = 0.9998)。结果表明：柚皮苷在33.6~ 840ng范围内，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系;橙皮苷在19~476ng范围内，进样 量与峰面积积分值呈良好的线性关系;黄芩苷在24~600ng范围内，进样量与峰面积积分值 呈良好的线性关系
[0022] 按照上述方法进行测定，按外标法以峰面积计算含量，其结果如下表所示：
[0023]样品测定结果(n = 3)
[0025]从上表中可以看出本发明提供的技术方案检测结果重复性好，为感冒止咳糖浆中 黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法的提供新的方法。
【主权项】
1. 一种同时检测感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法，其特征在于，该方 法依次包括下述步骤： 1) 量取本品Iml置20ml容量瓶中，加体积比1:1的甲醇和乙腈其溶解，蒸干溶剂，用乙腈 定容至20ml刻度线，混匀过滤膜，取滤液入超高效液相色谱仪进行检测； 2) 超高效液相色谱法进行分析时的参数设置如下： 所述的分析柱ACE Excel 2C18-PFP，规格为4·6μπιΧ250_，5μπι，流速0.8ml ·π?η-1，柱 温30°C，检测波长276nm，进样量为2yL;流动相A为乙腈，流动相B为0.1 %磷酸溶液;梯度洗 脱程序：〇~2.5min，5%A、95%B;2.5-5.1min，30%~70%A、70%~30%B;5.1-12min，90% A、10%B;在 2%A、98%B 下平衡 lmin。2. 根据权利要求1所述的同时检测感冒止咳糖浆中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法， 其特征在于，所述的滤膜为0.22微米的滤膜。
【文档编号】G01N30/02GK105929067SQ201610259721
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月25日
【发明人】陈学松, 林冬杰, 李亚, 梁慧敏, 李澄
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所