高分散性磁小体及其制备方法与流程

本发明属于功能性磁小体，具体涉及高分散性磁小体及其制备方法。

背景技术：

1、磁小体(bmp)是由趋磁细菌生物矿化产生的，一种由生物膜包被的，粒径在30-100nm之间的，由四氧化三铁或者四硫化三铁组成的纳米颗粒。磁小体由于具有生物相容性好、易于修饰、粒径均一等优点而广泛应用于生物医学领域。

2、然而目前的磁小体(bmp)的分散性不好，磁小体分散行不好会严重限制磁小体的应用。例如，当利用功能性磁小体(eg.抗体修饰的功能性磁小体)捕获病原微生物时，磁小体的分散性不好会导致部分抗体不能充分暴露，造成捕获能力降低。

技术实现思路

1、针对现有技术中存在的技术问题，本发明一方面提供了高分散性磁小体，所述高分散性磁小体的膜含有mn，所述mn占所述高分散性磁小体的膜的质量百分比为3％-7％。

2、作为改进，所述mn的化合价包括正2价和正7价。

3、作为进一步改进，所述高分散性磁小体的饱和磁化强度为22-23emu/g，优选的所述高分散性磁小体的饱和磁化强度为22.12emu/g。

4、作为进一步改进，所述高分散性磁小体由生物膜包被，粒径在30-100nm，由fe3o4或者fe3s4组成的纳米颗粒，所述高分散性磁小体还含有fe2o3。

5、本发明的另一方面提供了一种高分散性磁小体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6、1)菌体收集:将结束发酵培养的菌体置于容器内,配平后，以2300-2700rpm离心20-40min,弃上清液,菌体置于容器中于-70—-90℃保存，优选的，以2500rpm离心30min,菌体置于容器中于-80℃保存。

7、2)细胞破碎:将收集的菌体与pbs溶液以1:10-20(w/v)充分混匀后置于容器中,用超声波破碎仪超声20-40min,将烧杯底部贴上磁铁置于3-5℃吸附过夜，优选的，所述pbs溶液为10mm，用超声波破碎仪超声30min,将烧杯底部贴上磁铁置于4℃吸附过夜。

8、3)磁小体清洗:弃去容器中的上清液,将沉淀重新用pbs溶液重悬,再次利用超声波破碎仪中超声,重复此操作7-8次。

9、4)上清蛋白浓度测定:当超声上清液体特别清亮时,取适量上清液检测od260和od280并根据公式上清液蛋白浓度c(mg/ml)＝1.45od260-0.74od280，当蛋白浓度低于0.1mg/ml时,可视为磁小体纯化结束。

10、5)将纯化后的磁小体与kmno4共同孵育过夜,磁力吸附后经过pbs溶液清洗若干次，优选的，所述pbs溶液为10mm，ph＝7.4，清洗三次。

11、作为进一步改进，所述纯化后的磁小体与kmno4溶液的重量份之比为1-3：5-10，优选的，所述纯化后的磁小体与kmno4溶液的重量份之比为1：5。

12、作为进一步改进，所述kmno4溶液的浓度为1-10mg/ml，优选的，所述kmno4溶液的浓度为5mg/ml。

13、作为进一步改进，所述溶液包括pbs溶液。

14、作为进一步改进，所述pbs溶液的浓度为5-15mm，ph为6-8,优选的，所述pbs溶液的浓度为10mm，ph为7.4。

15、本发明的有益效果在于，获得了一种具有高分散性的磁小体。

技术特征：

1.高分散性磁小体，其特征在于，所述高分散性磁小体的膜含有mn，所述mn占所述高分散性磁小体的膜的质量百分比为3％-7％。

2.如权利要求1所述的高分散性磁小体，其特征在于，所述mn的化合价包括正2价和正7价。

3.如权利要求1所述的高分散性磁小体，其特征在于，所述高分散性磁小体的饱和磁化强度为22-23emu/g，优选的所述高分散性磁小体的饱和磁化强度为22.12emu/g。

4.如权利要求1所述的高分散性磁小体，其特征在于，所述高分散性磁小体由生物膜包被，粒径在30-100nm，由fe3o4或者fe3s4组成的纳米颗粒，所述高分散性磁小体还含有fe2o3。

5.高分散性磁小体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的高分散性磁小体制备方法，其特征在于，所述纯化后的磁小体与kmno4溶液的重量份之比为1-3：5-10，优选的，所述纯化后的磁小体与kmno4溶液的重量份之比为1：5。

7.根据权利要求6所述的高分散性磁小体制备方法，其特征在于，所述kmno4溶液的浓度为1-10mg/ml，优选的，所述kmno4溶液的浓度为5mg/ml。

8.根据权利要求5所述的高分散性磁小体制备方法，其特征在于，所述溶液包括pbs溶液。

9.根据权利要求8所述的高分散性磁小体制备方法，其特征在于，所述pbs溶液的浓度为5-15mm，ph为6-8,优选的，所述pbs溶液的浓度为10mm，ph为7.4。

技术总结
本发明提供高分散性磁小体，所述高分散性磁小体的膜含有Mn，所述Mn占所述高分散性磁小体的膜的质量百分比为3％‑7％，以及高分散性磁小体制备方法，将磁小体纯化；将所述纯化后的磁小体与KMnO<subgt;4</subgt;溶液孵育；将所述孵育后的磁小体用溶液清洗若干次，优选的，磁力吸附后经过溶液清洗三次，本发明的有益效果在于，获得了一种具有高分散性的磁小体。

技术研发人员：张金菊,蒙青林,吴浩然,于千力,张柳
受保护的技术使用者：国科融智（深圳）生物工程技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/5