一种猪小肠薄膜分离纯化积雪草总皂苷的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种猪小肠薄膜分离纯化积雪草总皂苷的方法，属于积雪草总皂苷提取技术领域。
【背景技术】
[0002]积雪草是中国药典收载的常用中药，是伞形科植物积雪草(CentellaasiaticaLinn.)的全草，始载于《神农本草经》，列为中品，苦、辛、寒，归肝、脾、肾经，具有清热利湿，解毒消肿的功效。用于湿热黄疸，中暑腹泻，砂淋血淋，痈肿疮毒，跌打损伤。近年研究报道积雪草有促进伤口愈合，软化疤痕，抗牛皮癣，抗抑郁，抗乳腺增生，抗肝纤维化，抗癌，治疗水肿，保肝等作用。
[0003]目前，从积雪草中提取分离积雪草总苷及积雪草苷的工艺有采用水或低碳醇热渗滤、热回流、超声提取和采用乙醇浸泡等方法进行提取，浸泡和渗滤的提取方法需要溶剂的倍量大，提取时间长，生产效率低。热回流提取，需要提供大量的热能，增大了生产的能耗，同时也大大增加了生产成本，而超声提取提取效率较高，需要增大设备的投入。
【发明内容】
[0004]本发明主要解决的技术问题:针对目前通过水或低碳醇热渗滤、热回流等方法提取的积雪草总皂苷纯度低，提取率低，且需要大量的溶剂，增加了生产成本，提供了一种猪小肠薄膜分离纯化积雪草总皂苷的方法，本发明首先将积雪草药材通过粉碎过筛，与乙醇溶液进行混合，利用超声辅助提取以及离心分离，得到积雪草预提取液，再利用石油醚对其萃取，得到积雪草总皂苷粗品，接着将其与氨基甲酸乙酯搅拌混合形成积雪草脂质溶液注入进处理得到的肠系膜管，收集溶液，旋转蒸发，即可。本发明提取的积雪草总皂苷含量和提取率均为较高，提取方法简单，可操作性强，且生产成本低。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案:
(1)选取晒制切片的积雪草药材，将其置于气流粉碎机中进行粉碎并对其过筛，制备得60?80目的积雪草药材粉末，将质量分数为75%的乙醇溶液和雪草粗粉按质量比10:1进行搅拌混合，待其混合均匀后，对其加热至60?70°C，并在1200?1500r/min速度，200?300W下进行超声辅助提取I?2h ;
(2)待超声辅助提取完成后，将混浊液在2000?3000r/min的转速下进行离心分离10?15min，取上层提取液减压浓缩至原有体积的1/5，制得积雪草预提取液，随后按积雪草预提取液和石油醚体积比1:1进行反复萃取，直至石油醚层无色透明后对其减压蒸干，待晶体完全析出，析出的晶体则是积雪草总皂苷粗品，备用；
(3)选取待宰杀的成年猪，禁食20?24h，使其自然饮水，随后待其宰杀完成后，打开腹腔，迅速取出幽门部位以上7?9cm处，长为10?15cm的十二指肠段，将所取的肠段置于O?5°C台氏液中进行浸泡10?15min ；
(4)待肠段浸泡完成后，在O?5°C台氏液中剥离肠系膜，待剥离完成后，用蒸馏水进行冲洗3?5次，用灌胃针对其进行翻转，并将肠系膜扎成小囊，一端扎紧，另一端固定在聚乙烯软管上，将37°C台氏液按肠系膜管体积1/10注入肠系膜管中，随后将其置于37°C恒温水浴台氏液中，对管内持续通入空气5?8h，保持其活性；
(5)按质量比1:4的比例，将步骤(2)制备的积雪草总皂苷粗品和氨基甲酸乙酯搅拌混合形成积雪草脂质溶液，随后注入肠系膜管中，注入量肠系膜管体积的1/2，随后将其置于370C的氨基甲酸乙酯溶液中，并通入空气保持其活性，在37°C下恒温反应20?24h，收集肠系膜外部氨基甲酸乙酯溶液，对其旋转蒸发，直至晶体完全析出即可制备得猪小肠薄膜分离纯化的积雪草总皂苷。
[0006]本发明的应用:将上述制备的100?150g积雪草总皂苷，用适量的注射用水对其分散后，将其置于真空干燥器中对其干燥，得积雪草总皂干粉，再取30?40g的聚乙二醇，加入至积雪草总干粉中，边加边搅拌，使其均匀，最后采用压制法，制成软胶囊。患有抑郁症等精神疾病者服用该软胶囊，每天一次，每次服用I?2粒即可，可以顺气、安神，解除精神疲劳，促进人体的新陈代谢、舒心益气、强身健体，可有效治愈抑郁症等精神疾病。
[0007]本发明的有益效果是:
(1)积雪草总皂苷含量和提取率均为较高，都达到98%以上；
(2)提取方法简单，可操作性强，且生产成本低。
【具体实施方式】
[0008]首先选取晒制切片的积雪草药材，将其置于气流粉碎机中进行粉碎并对其过筛，制备得60?80目的积雪草药材粉末，将质量分数为75%的乙醇溶液和雪草粗粉按质量比10:1进行搅拌混合，待其混合均匀后，对其加热至60?70°C，并在1200?1500r/min速度，200?300W下进行超声辅助提取I?2h ;待超声辅助提取完成后，将混浊液在2000?3000r/min的转速下进行离心分离10?15min，取上层提取液减压浓缩至原有体积的1/5，制得积雪草预提取液，随后按积雪草预提取液和石油醚体积比1:1进行反复萃取，直至石油醚层无色透明后对其减压蒸干，待晶体完全析出，析出的晶体则是积雪草总皂苷粗品，备用；接着选取待宰杀的成年猪，禁食20?24h，使其自然饮水，随后待其宰杀完成后，打开腹腔，迅速取出幽门部位以上7?9cm处，长为10?15cm的十二指肠段，将所取的肠段置于O?5°C台氏液中进行浸泡10?15min ;待肠段浸泡完成后，在O?5°C台氏液中剥离肠系膜，待剥离完成后，用蒸馏水进行冲洗3?5次，用灌胃针对其进行翻转，并将肠系膜扎成小囊，一端扎紧，另一端固定在聚乙烯软管上，将37°C台氏液按肠系膜管体积1/10注入肠系膜管中，随后将其置于37°C恒温水浴台氏液中，对管内持续通入空气5?8h，保持其活性；按质量比1:4的比例，将积雪草总皂苷粗品和氨基甲酸乙酯搅拌混合形成积雪草脂质溶液，随后注入肠系膜管中，注入量肠系膜管体积的1/2，随后将其置于37°C的氨基甲酸乙酯溶液中，并通入空气保持其活性，在37°C下恒温反应20?24h，收集肠系膜外部氨基甲酸乙酯溶液，对其旋转蒸发，直至晶体完全析出即可制备得猪小肠薄膜分离纯化的积雪草总皂苷。
[0009]实例I
首先选取晒制切片的积雪草药材，将其置于气流粉碎机中进行粉碎并对其过筛，制备得80目的积雪草药材粉末，将质量分数为75%的乙醇溶液和雪草粗粉按质量比10:1进行搅拌混合，待其混合均匀后，对其加热至70°C，并在1500r/min速度，300W下进行超声辅助提取2h ;待超声辅助提取完成后，将混浊液在3000r/min的转速下进行离心分离15min，取上层提取液减压浓缩至原有体积的1/5，制得积雪草预提取液，随后按积雪草预提取液和石油醚体积比1:1进行反复萃取，直至石油醚层无色透明后对其减压蒸干，待晶体完全析出，析出的晶体则是积雪草总皂苷粗品，备用；接着选取待宰杀的成年猪，禁食24h，使其自然饮水，随后待其宰杀完成后，打开腹腔，迅速取出幽门部位以上9cm处，长为15cm的十二指肠段，将所取的肠段置于5°C台氏液中进行浸泡15min ;待肠段浸泡完成后，在5°C台氏液中剥离肠系膜，待剥离完成后，用蒸馏水进行冲洗5次，用灌胃针对其进行翻转，并将肠系膜扎成小囊，一端扎紧，另一端固定在聚乙烯软管上，将37°C台氏液按肠系膜管体积1/10注入肠系膜管中，随后将其置于37°C恒温水浴台氏液中，对管内持续通入空气8h，保持其活性；按质量比1:4的比例，将积雪草总皂苷粗品和氨基甲酸乙酯搅拌混合形成积雪草脂质溶液，随后注入肠系膜管中，注入量肠系膜管体积的1/2，随后将其置于37°C的氨基甲酸乙酯溶液中，