一种黑老虎提取物的制备方法及在治疗非酒精性脂肪肝中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中草药提取技术领域，更具体地，涉及一种黑老虎提取物的制备方法 及在治疗非酒精性脂肪肝中的应用。
【背景技术】
[0002] 黑老虎为五味子科南五味子属植物冷饭团（Kadsuracoccinea)的根及蔓莖，亦名 臭饭团、过山龙藤、绯红南五味子等，主要分布于广西、广东、云南、贵州等地，民间常用于治 疗慢性胃炎、急性胃肠炎、风湿痹痛、跌打损伤和骨折等。现代药理研究表明，黑老虎具有抗 癌、抗HIV、抗炎、保肝、抗氧化等药理作用，其中木脂素类和三萜类成分研究报道较多。但未 见黑老虎对非酒精性脂肪肝治疗作用的研究报道。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种黑老虎提取物的制备方法。
[0004]本发明的另一个目的在于提供黑老虎提取物在制备治疗或预防非酒精性脂肪肝 药物中的应用。
[0005] 为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的： 一种黑老虎提取物的制备方法，包括以下步骤： 51. 黑老虎粉碎后，用6~12倍体积50~95%乙醇溶液提取1~3次，每次1~3h， 放冷后过滤，合并滤液，浓缩得稠膏； 52. 取稠膏悬浮于1~5倍体积的水中，用1~3倍体积石油醚-乙酸乙酯混合溶剂反 复萃取1~3次，合并有机溶剂萃取层，回收溶剂，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0006]本发明制备得到的黑老虎提取物主要含有kadsuralignanA、kadsuralignanB、 戈米辛R、schizanrinF、戈米辛E、冷饭团素等联苯环辛二稀型木脂素类成分，且这些有效 成分总含量在50~100%之间。
[0007] 乙醇溶液的提取时间决定了提取物中各种中药成分的差异，为了尽量多的提取到 联苯环辛二烯型木脂素类成分，优选地，用50~95%乙醇溶液每次提取的时间为2h。
[0008]优选地，所述石油醚-乙酸乙酯混合溶剂中乙酸乙酯的体积百分比含量为30~100%〇
[0009] 优选地，用8倍体积70%乙醇溶液提取2次。
[0010] 优选地，用2倍体积石油醚-乙酸乙酯混合溶剂反复萃取2次。
[0011] 黑老虎提取物在制备治疗或预防非酒精性脂肪肝药物中的应用。
[0012] 如上所述提取方法制备得到的黑老虎提取物在制备治疗或预防非酒精性脂肪肝 药物中的应用。
[0013] 非酒精性脂肪肝是指由于高脂饮食导致的脂肪肝。
[0014]利用不同的黑老虎组织进行提取，得到的提取物中联苯环辛二烯型木脂素类成分 总量差异比较显著，优选地，本发明使用黑老虎的根进行提取。黑老虎的果实提取物中联苯 环辛二烯型木脂素类成分总量要低于根的。
[0015] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果： 目前，国家药监局未有上市的治疗非酒精性脂肪肝的药物，本发明首次发现黑老虎提 取物可用于治疗非酒精性脂肪肝，治疗效果显著，克服了现有技术的空白，提供了一种潜在 的治疗非酒精性脂肪肝的药物，制备工艺简单，适合于应用生产。另外，本发明制备得到的 黑老虎提取物中联苯环辛二烯型木脂素类成分总含量在50~100%之间。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本 发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常 规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
[0017] 实施例1 一种黑老虎提取物的制备方法，包括以下步骤： 51. 将黑老虎的根粉碎后，用6倍体积50%(v/v)的乙醇溶液提取1次，提取时间为lh， 提取液放冷后过滤，滤液浓缩得稠膏； 52. 取稠膏悬浮于2倍体积的水中，用1倍体积石油醚-乙酸乙酯（其中乙酸乙酯占 50%)混合溶剂反复萃取1次，合并有机溶剂萃取层，回收溶剂，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0018] 利用紫外-可见分光光度法（以五味子酯甲为对照品)测得本实施例制得的黑老虎 提取物中联苯环辛二烯型木脂素类成分总含量为64%。
[0019] 实施例2 一种黑老虎提取物的制备方法，包括以下步骤： 51. 将黑老虎的根粉碎后，用8倍体积70% (v/v)的乙醇溶液提取2次，每次提取2h， 提取液放冷后过滤，合并滤液，浓缩得稠膏； 52. 取稠膏悬浮于3倍水中，用2倍体积石油醚-乙酸乙酯(其中乙酸乙酯占80%)混合 溶剂反复萃取2次，合并有机溶剂萃取层，回收溶剂，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0020] 利用紫外-可见分光光度法（以五味子酯甲为对照品)测得本实施例制得的黑老虎 提取物中联苯环辛二烯型木脂素类成分总含量为86%。
[0021] 实施例3 一种黑老虎提取物的制备方法，包括以下步骤： 51. 将黑老虎的根粉碎后，用12倍体积95%乙醇溶液提取3次，每次提取3h，提取液放 冷后过滤，合并滤液，浓缩得稠膏； 52. 取稠膏悬浮于5倍水中，用3倍体积石油醚-乙酸乙酯(其中乙酸乙酯占40%)混合 溶剂反复萃取3次，合并有机溶剂萃取层，回收溶剂，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0022] 利用紫外-可见分光光度法（以五味子酯甲为对照品)测得本实施例制得的黑老虎 提取物中联苯环辛二烯型木脂素类成分总含量为55%。
[0023] 对比例1 一种黑老虎提取物的制备方法，包括以下步骤： S1.将黑老虎的根粉碎后，用8倍体积70% (v/v)的乙醇溶液提取2次，每次提取4h， 提取液放冷后过滤，合并滤液，浓缩得稠膏； S2.取稠膏悬浮于3倍水中，用2倍体积石油醚-乙酸乙酯(其中乙酸乙酯占35%)混合 溶剂反复萃取2次，合并有机溶剂萃取层，回收溶剂，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0024] 利用紫外-可见分光光度法（以五味子酯甲为对照品)测得本实施例制得的黑老虎 提取物中联苯环辛二烯型木脂素类成分总含量为46%。
[0025] 对比例2 一种黑老虎提取物的制备方法，包括以下步骤： 51. 将黑老虎的根粉碎后，用8倍体积70% (v/v)的乙醇溶液提取2次，每次提取2h， 提取液放冷后过滤，合并滤液，浓缩得稠膏； 52. 取稠膏悬浮于3倍水中，用2倍体积石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(其中乙酸乙酯占 20%)反复萃取2次，合并有机溶剂萃取层，回收溶剂，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0026] 利用紫外-可见分光光度法（以五味子酯甲为对照品)测得本实施例制得的黑老虎 提取物中联苯环辛二烯型木脂素类成分总含量为42%。
[0027] 对比例3 一种黑老虎提取物的制备方法，包括以下步骤： 51. 将黑老虎的根粉碎后，用8倍体积35% (v/v)的乙醇溶液提取2次，每次提取3h， 提取液放冷后过滤，合并滤液，浓缩得稠膏； 52. 取稠膏悬浮于3倍水中，用2倍体积石油醚-乙酸乙酯(其中乙酸乙酯占50%)混合 溶剂反复萃取2次，合并有机溶剂萃取层，回收溶剂，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0028] 利用紫外-可见分光光度法（以五味子酯甲为对照品)测得本实施例制得的黑老虎 提取物中联苯环辛二烯型木脂素类成分总含量为36%。
[0029] 实施例4 以实施例1制备得到的黑老虎提取液来制备黑老虎保肝片，制备方法为：称取250g实 施例1的黑老虎提取物，加入250g硫酸钙、10g交联聚维酮混匀。以适量80%乙醇作润湿剂 制成软材，以14目筛制粒，于60°C温度下干燥后过12目