一种注射用复方骨肽冻干制剂组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种注射用复方骨肽冻干制剂组合物及其制 备方法。
【背景技术】
[0002] 传统的复方骨肽制剂为健康猪四肢骨与全蝎经提取制成的复方骨肽溶液加适量 赋形剂制成的无菌冻干品，具有抗炎、镇痛、调节骨代谢和骨生长等作用。但是，传统的复方 骨肽冻干制剂的活性成分为小分子多肽类物质，在长期的保存过程中容易聚合成生物大分 子(即分子量大于11000道尔顿的高分子量物质)，继而导致溶解后澄明度低、注射时刺激性 大、易发生过敏等问题，影响本品的生物活性和用药安全。
[0003] 现有技术中，CN100377741C、CN101156872B、CN101732697B等均对传统的复方骨肽 制剂进行了一定程度的改进，但仍未对复方骨肽冻干制剂中的生物大分子问题提供有效的 解决方案。
[0004] 因此，开发一种多肽类物质含量高、总氮量高、高分子量物质含量低、稳定性高的 注射用复方骨肽冻干制剂组合物及其制备方法成为本领域技术人员的迫切需求。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是就是提供一种多肽类物质含量高、总氮量高、高分子量物质含量 低、稳定性高的注射用复方骨肽冻干制剂组合物。
[0006] 为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下： 本发明提供了一种注射用复方骨肽冻干制剂组合物，按重量计，组成如下： 骨肽 34重量份， 蝎肽 44重量份， 乳糖 0. 2-0. 4重量份， 谷氨酸 0. 3-0. 6重量份， 丙二醇 0. 3_0. 6重量份， 其中，乳糖、谷氨酸、丙二醇的重量比为1 :1. 5 :1. 5。
[0007] 其中，所述骨肽的制备方法如下： a. 前处理、粉碎、提取和脱脂：取健康新鲜或冷冻猪的四肢骨，热浸清洗后热压，搅拌 粉碎，去除肉质；提取2次，合并抽提液，静置，75_85°C下脱脂2次； b. 酸性沉淀、碱性沉淀：将脱脂后的提取液加入10%稀盐酸溶液，调节药液pH为 4±0. 5,煮沸60分钟；将药液降至室温，过滤除去沉淀，得酸沉滤液；调节酸沉滤液pH为 9±0. 5,煮沸60分钟，降至室温，过滤除去沉淀，得药液； c. 酶解、醇沉、浓缩：按药液体积的0. 3%添加胰酶；50°C保温2小时；煮沸、灭活30分 钟；将药液降至室温，过滤除去杂质得滤液；减压浓缩后加入95%乙醇，搅拌60分钟，静置； 滤除杂蛋白，得澄清液； d.脱色、过滤：加入药用炭吸附4小时，过滤得脱色液，经膜过滤后超滤，得骨肽原料 药液；取样检测含量，根据检测含量补加超纯水，控制骨肽含量不低于35.OOmg/ml，-10°C 以下保存。
[0008] 其中，所述蝎肽的制备方法如下： a. 粉碎、醇提：称取全蝎，粉碎；用乙醇提取，提取液过滤，得澄清液； b. 减压浓缩：在60±5°C下，浓缩，补加与浓缩液等量的超纯水，继续浓缩至无醇味， 停止浓缩，得浓缩液； c. 酸性沉淀、脱脂、中性沉淀：调节浓缩液pH至4. 0±0. 5,煮沸30分钟，冷却至室温； 滤纸过滤，得滤液A;调节滤液A的pH至7. 0±0. 5,滤纸过滤，得滤液B。
[0009] d.除热原、过滤：加入药用炭，使药用炭浓度为0. 5%，搅拌；煮沸30分钟，冷却至 30°C以下；过滤，得滤液C，滤液C的PH控制在6. 8~7. 0,经0. 22ym滤膜过滤，得蝎肽原 料药液；一l〇°C以下保存待用。
[0010] 其中，所述制剂组合物的制备工艺如下： a. 配液：按处方量依次加入骨肽原料药液、蝎肽原料药液至适量注射用水中，搅拌均 匀，然后再加入处方量的乳糖、谷氨酸、丙二醇，搅拌均匀，调节PH6. 5~7. 5,补加注射用水 至全量；加入针用活性炭，搅拌，吸附，过滤，分装于灭菌的西林瓶中，半加塞； b. 冻干：-40°C以下预冻，至完全冻结；缓慢升温至10°C，保温至水线完全消失；缓慢 升温至35°C~39°C，保温2~4小时，解析干燥，压塞出箱。
[0011] C?包装：乳铝塑组合盖，贴签，包装。
[0012] 基于上述技术方案，本发明取得了如下的有益效果和技术进步： 本发明的注射用复方骨肽冻干制剂组合物的多肽类物质含量高、总氮量高、高分子量 物质含量低、稳定性高。
【具体实施方式】
[0013]
【具体实施方式】仅为进一步解释或说明本发明，不应被解释为对本发明的任何限 制。
[0014] 实施例中所用原辅料均为市购。
[0015] 实施例1本发明的注射用复方骨肽冻干制剂组合物 处方： 骨肽 34g， 蝎肽 44g， 乳糖 〇. 2g， 谷氨酸 〇. 3g， 丙二醇 〇? 3g。
[0016] 制备方法： 骨肽的制备： a.前处理：取健康新鲜或冷冻猪的四肢骨，热浸（50~60 °C纯水）清洗至流出液清亮 无血色，罐内加两倍量水，1. 5kg/cm3热压45分钟。
[0017] b.粉碎：搅拌粉碎，去除肉。
[0018]C.提取和脱脂：继续升温到80°C，压力保持在0. 2±0. 02Mpa，提取2次，合并抽提 液，静置25分钟，保持温度75-85°C，脱脂2次。
[0019] d.酸性沉淀、碱性沉淀：将脱脂后的提取液，加入10%稀盐酸溶液，调节药液pH为 4±0. 5,煮沸60分钟。将药液温度降至室温，过滤除去沉淀，得酸沉滤液。在酸沉滤液中， 加入5mol/LNaOH溶液，调节药液pH为9±0. 5,煮沸60分钟，降至室温，过滤除去沉淀，得 药液。
[0020] e.酶解、醇沉、浓缩：酶解，按药液体积的0. 3%添加胰酶；50°C保温2小时；煮 沸、灭活30分钟；将药液温度降至室温，过滤除去杂质得滤液。减压浓缩后加入95%乙醇， 搅拌60分钟，静置，滤除杂蛋白，得澄清液。
[0021] f.脱色、过滤：加入药用炭吸附4小时。过滤得脱色液，经膜过滤后超滤，得骨肽 原料药液。取样检测含量，根据检测结果补加超纯水，控制骨肽含量不低于35. 00mg/ml。
[0022] g?保存：-10°C以下保存待用。
[0023] 蝎肽的制备： a.粉碎、醇提：称取全蝎，粉碎。第一次醇提：加入全蝎重量4倍量的乙醇，加热至微 沸30分钟，停止加热，抽出乙醇提取液。第二次醇提：加入3倍量的乙醇进行提取，加热至 微沸30分钟，停止加热，放出乙醇提取液。第三次醇提：在提取残渣中加入2倍量的乙醇进 行提取，加热至微沸30分钟，停止加热，放出乙醇提取液。合并三次提取液，过滤得澄清液。
[0024] b.减压浓缩：控制温度60±5°C，浓缩至提取液体积为总量的10±5%，回收蒸馏 的乙醇。补加与浓缩液同等量超纯水，分两次加入，继续浓缩至无醇味，停止浓缩，得浓缩 液。
[0025] c.酸性沉淀：用lmol/LHC1 或lmol/LNaOH调pH至 4. 0±0. 5,煮沸 30 分钟，冷 却至室温。
[0026] d.脱脂：滤纸过滤，得滤液A。
[0027] e.中性沉淀：用lmol/LNaOH溶液调节药液pH至7. 0±0. 5,滤纸过滤，