残渣，暴 露大脑中动脉（位于嗅束及大脑下静脉之间）。将吸有50%氯化铁溶液（1111 〇1/1盐酸）1〇111 的小片定量滤纸敷在此段大脑中动脉上，约30miri待血管颜色变黑后取下滤纸，用生理盐 水冲洗局部组织，逐层缝合，回笼饲养。
[0077] 4、行为检测：在术后不同时间点（6h，24h)对动物进行行为评分。（1)提鼠尾离开 地面约一尺，观察前肢屈曲情况。如双前肢对称伸向地面，记为0分；如手术对侧前肢出现 肩屈曲、肘屈曲、肩内旋或既有腕肘的屈曲又有内旋者，记为1分。（2)将动物置于平滑地面 上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等且有力记为0分；如向手术对侧推 动时阻力下降者，记为1分。（3)将动物两前肢置一金属网上，观察两前肢的肌张力。双侧 肌张力对等且有力者为0分；手术对侧前肢肌张力下降记为1分。（4)提鼠尾离开地面约 一尺，动物有不停地向手术对侧旋转者，记为1分，否则记为〇分。根据以上标准评分，满分 为4分，分数越高，动物的行为障碍越严重。
[0078] 4、结果分析：对行为检测评分值进行组间比较，t检验。各化合物对MCAT大鼠神 经症状的影响结果见表2。
[0081] 表 2
[0082] 注：与模型组比较，***Ρ〈0· 001，**Ρ〈0· 01，*Ρ〈0· 05。
[0083] 结果显示，假手术组未见行为异常改变，模型组大鼠在术后6h、24h均出现偏瘫样 症状，主要表现为手术对侧前肢内收，肩内旋，前肢肌张力降低，肩抗力下降。与模型组相 比，各给药组大鼠在术后24h的神经症状均显著改善，并有明显的量效关系。与2-(1、4_戊 二醇）苯甲酸、2-(1、4_戊二醇）苯甲酸N，N'_二苄基乙二胺盐各给药剂量组相比，2_(1S、 4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸Ν，Ν' -二苄基乙二胺盐、2-(lS、4R-戊二 醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸Ν，Ν' -二苄基乙二胺盐各相应给药组效果更为优 异，有效剂量更小。
[0084] (二）对MCAT大鼠脑梗塞范围的影响
[0085] 动物经末次行为评分后，断头取脑。去掉嗅球、小脑和低位脑干，剩余部 份在4°C以下冠状切成5片。迅速将脑片置于TTC染液中（每5ml染液中含4 % TTC1. 5ml，1MK2HP040. lml)，37°C避光温孵30分钟，再取出，置于10%甲醛液中避光保存。 经染色后非缺血区为玫瑰红色，梗塞区为白色。将白色组织仔细挖下称重，以梗塞组织重量 占总脑重量的百分比作为脑梗塞范围。对结果进行组间比较，t检验，各化合物对MCAT大 鼠脑梗塞范围的影响结果见表3。
[0088] 表 3
[0089] 注：与模型组比较，林*P〈0· 001，林Ρ〈0· 01，*Ρ〈0· 05。
[0090] 结果显示，术后24h除假手术组无梗塞灶外，模型组和给药组大鼠均有不同程度 的梗塞灶。与模型组相比，化合物2-(1、4_戊二醇）苯甲酸和2-(1、4_戊二醇）苯甲酸， Ν' -二苄基乙二胺盐50~200mg/kg组；2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4S-戊二醇） 苯甲酸N，N'_二苄基乙二胺盐、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸N， Ν'-二苄基乙二胺盐25~100mg/kg组大鼠脑梗塞程度均明显改善，并有明显的量效关系。
[0091] 结果提示，与模型组相比，各给药组大鼠对缺血性脑损伤引起的脑组织梗塞症状 有明显改善作用，并有明显的量效关系。与2-(1、4_戊二醇）苯甲酸、2-(1、4_戊二醇）苯 甲酸N，N' -二苄基乙二胺盐各给药剂量组相比，2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4S-戊 二醇）苯甲酸N，N'-二苄基乙二胺盐、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯 甲酸Ν，Ν' -二苄基乙二胺盐各相应给药组效果更为优异，有效剂量更小。
[0092] 实施例2 :对大鼠动一静脉旁路血栓形成的影响本实施例选用：
[0093] -、动物
[0094] SD大鼠，雌雄各半，体重220~260g。
[0095] 二、药物与试剂
[0096] 受试药
[0097] 2-(1、4_戊二醇）苯甲酸、2-(1、4_戊二醇）苯甲酸N，N'_二苄基乙二胺盐、2_(1S、 4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸Ν，Ν' -二苄基乙二胺盐、2-(lS、4R-戊二 醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸N，N'-二苄基乙二胺盐。
[0098] 三、仪器
[0099] AEG-220型电子分析天平；Df-206型鼓风干燥箱。
[0100] 四、试验方法与结果
[0101] 1、分组见表4
[0104]表 4
[0105] 2、给药
[0106] 每天灌胃给药1次，连续给药3天，血栓模型组给予等量溶媒。末次给药后即进行 手术。
[0107] 2、造模方法
[0108] 将大鼠腹腔注射10%水合氯醛0. 35ml/100g麻醉，仰卧位固定，手术，分离右颈总 动脉和左颈外静脉。在l〇cm长的聚乙烯管中段放入一根事先称重的长8cm的0号手术线， 以生理盐水溶液充满，两端联结长约3cm充满生理盐水的插管。该管的一端插入左颈外静 脉后，另一端插入右颈总动脉。血液从右侧颈总动脉流至聚乙烯管内，再返流入左颈外静 脉，构成环路血流。l〇min后中断血流，迅速取出血栓称重，该重量减去丝线重、纸重即血栓 湿重；放入烘箱中60°C干燥24h，取出血栓称重，该重量减去丝线重、纸重即血栓干重。各组 间采用t-检验进行比较。按下列公式计算抑制率：
[0109] 抑制率=(模拟组血栓重量-给药组血栓重量）/模型组血栓重量*100%
[0110] 3、试验结果
[0111] 各化合物对大鼠动一静脉环路血栓的抑制作用（X ±SD)结果见表5。
[0114] 表 5
[0115] 注：与血栓模型组相比，*#Ρ〈0· 001，#Ρ〈0· 01，*Ρ〈0· 05。
[0116] 结果显示，与血栓模型组相比，各给药组大鼠的血栓湿重和干重均显著减少，并有 明显的量效关系。
[0117] 与2-(1、4_戊二醇）苯甲酸、2-(1、4_戊二醇）苯甲酸Ν，Ν' -二苄基乙二胺盐各 给药剂量组相比，2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸Ν，Ν' -二苄基乙 二胺盐、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸Ν，Ν' -二苄基乙二胺盐各 相应给药组效果更为优异，有效剂量更小。
[0118] 结果提示，上述2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸及其各自 的盐，对大脑中动脉血栓模型大鼠神经症状及脑梗塞范围的明显改善作用可能与其对血栓 形成的抑制作用有关。且上述2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸及其 各自的盐药效优于2-(1、4-戊二醇）苯甲酸及其盐，且有效治疗剂量更小。
【主权项】
1. 一种新化合物2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸，其特征在于， 其结构通式如下：式I :2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸式2 :2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸。2. 权利要求1所述的2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸的盐及2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸的 盐，其结构通式如下：式3 :2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸盐式4:2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸盐 其中η = 1或2或3, M为一价金属离子、二价金属离子、三价金属离子或是有机碱基。3. 如权利要求2中所述的2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸盐、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸 盐，其特征是M为一价金属离子锂、钠、钾，或二价金属离子镁、钙、锌、铁，或三价金属离子 铁、错；或有机碱基Ν，Ν' -二苄基乙二胺、苯胺、苯甲胺、苄氨、二甲胺、二乙胺、吗啉、吗啉、 葡甲胺、三甲胺、三乙胺、叔丁胺或其他有机碱基。4. 权利要求1或2或3中所述的2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸、2-(lS、4R-戊二醇）苯 甲酸、2-(lS、4S-戊二醇）苯甲酸盐、2-(lS、4R-戊二醇）苯甲酸盐在制备用于治疗和预防 心、脑缺血性疾病及改善心脑循环障碍、抗血栓的药物中的应用。5. -种用于治疗和预防心脑缺血性疾病及改善心脑循环障碍、抗血栓的药物组合物， 其特征是含有治疗有效量的权利要求1或2或3的化合物和药学上可接受的载体。
【专利摘要】本发明涉及一种新化合物及其用途，具体的为2-(1S、4S-戊二醇)苯甲酸、2-(1S、4R-戊二醇)苯甲酸、2-(1S、4S-戊二醇)苯甲酸盐、2-(1S、4R-戊二醇)苯甲酸盐，还涉及该类新化合物在预防和治疗心脑缺血性疾病及改善心脑循环障碍、抗血栓等方面的应用。在动物药效模型试验中，本发明的新化合物对大脑中动脉阻塞引起的脑组织损伤显示出优异的保护作用，表现在可使大脑中动脉血栓模型大鼠的神经症状明显改善，梗塞面积明显减少，并能明显抑制大鼠动-静脉旁路血栓形成，说明本发明化合物可有效抑制血栓形成，对心脑缺血性疾病具有较好的预防和治疗作用。
【IPC分类】C07C65/01, C07C211/27, C07C51/09, C07C209/00, A61K31/192, C07C51/41, A61P9/10, A61P7/02
【公开号】CN105523918
【申请号】CN201410512323
【发明人】不公告发明人
【申请人】米文君
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2014年9月28日