钠 1 Og/L，pH7 · 2，121°C 20min灭菌。
[0033] 高氏一号培养基：按质量百分数计，可溶性淀粉20%。、KN031 %。、NaC10.5%〇、 K2HPO4O · 5%〇、MgS〇4〇 · 5%〇、FeS〇4〇 · 01%〇、琼脂20g，7jU〇〇〇ml，pH7 · 2-7 · 4 〇
[0034] 发酵培养基:麸皮10g/L、豆饼粉6g/L、玉米粉10g/L。
[0035] 2 ·制备方法：
[0036] (1)将鸡粪和蘑菇菌渣按照质量比45:50混合，在湿度为60 %的条件下进行堆肥发 酵，当温度升到70°C后，每隔1-2天翻堆一次，发酵15天，得有机质。
[0037] (2) -级种子液制备:将山东链霉菌接种到高氏一号培养基，28 °C摇瓶培养50h，得 到山东链霉菌的一级种子液;将热噬淀粉芽孢杆菌接种到LB培养基上，32°C摇瓶培养18h， 得到热噬淀粉芽孢杆菌的一级种子液。
[0038] (3)二级种子制备:将山东链霉菌、热噬淀粉芽孢杆菌的一级种子液分别按体积分 数为4%的接种量接种到发酵培养基上进行培养，分别得到各株菌的二级种子液；山东链霉 菌二级种子液的培养条件为:28°C培养50h。热噬淀粉芽孢杆菌二级种子液的培养条件为： 32°C 培养 14h-24h。
[0039] (4)将步骤(3)制备的山东链霉菌、热噬淀粉芽孢杆菌的二级种子液分别按体积分 数为10%、5%的接种量接种到发酵罐中，发酵培养；山东链霉菌的发酵培养条件为28°C培 养6天。热噬淀粉芽孢杆菌的发酵培养条件为:32 °C培养36h。
[0040] (5)将步骤(4)中发酵培养后的山东链霉菌、热噬淀粉芽孢杆菌按体积比2:7混合， 将混合后的菌液按重量百分含量为15%加入到步骤（1)的初次堆肥发酵后的有机质中，进 行再次发酵，发酵温度为28-32 °C，每天翻堆一次，发酵6-7天即可结束。
[0041] (6)将步骤(5)中再次发酵后的培养物，低温干燥，装袋。
[0042] 本实施例制备的得到的微生物有机肥中，有效活菌数为5亿/克。
[0043 ]实施例2:本发明的微生物有机肥对草莓红中柱病的防治作用
[0044] 选取草莓红中柱病的发病田块，设计三个处理:处理1:对照(对照CK为施用普通有 机肥）；处理2:施用复合木霉菌(广州市微生物科技有限公司）；处理3:施用本发明实施例1 制备的微生物有机肥。
[0045]每个处理重复3次，施用量均为50Kg/亩，施用30天后进行统计分析。
[0046]测定方法：
[0047]病情指数和防治效果的测定:参照许博方法(许博.草莓根腐病的药剂防治效果。 江苏农业科学，2011.39(4): 131 · 132)
[0048]测定结果见表1.
[0049]表1不同处理对草莓红中柱病的防治效果
[0050]
[0051 ]由表1可知，采用本发明的微生物有机肥对草莓红中柱病的防效达79.1 %，与处理 1和处理2相比，对草莓红中柱病的防治效果最好。
【主权项】
1. 一种防治草莓红中柱病的微生物有机肥的生产方法，其特征在于，步骤如下： (1) 将粪料和蘑菇菌渣按质量比（30-60) :(40-70)混合，在湿度为40-70%的条件下进 行初次堆肥发酵，得有机质； (2) -级种子液的制备：将山东链霉菌、热噬淀粉芽孢杆菌分别接种到高氏一号培养 基、LB培养基上进行培养，分别得到各株菌的一级种子液； (3) 将步骤(2)制备的山东链霉菌、热噬淀粉芽孢杆菌的一级种子液分别接种到发酵培 养基上进行培养，分别得到各株菌的二级种子液； (4) 将步骤(3)制备的山东链霉菌、热噬淀粉芽孢杆菌的二级种子液分别接种到发酵罐 中，发酵培养； (5) 将步骤(4)中发酵培养后的山东链霉菌、热噬淀粉芽孢杆菌按体积比（1 -3): (5-10) 混合，将混合后的菌液按重量百分含量为10-20 %加入到步骤(1)的初次堆肥发酵后的有机 质中，进行再次发酵； (6) 将步骤(5)中再次发酵后的培养物，低温干燥，即得。2. 根据权利要求1所述的防治草莓红中柱病的微生物有机肥的生产方法，其特征在于， 步骤（2 )中，高氏一号培养基的组成为：按质量百分数计，可溶性淀粉20%。、KN031%〇、 NaCIO · 5%。、K2HP〇4〇 · 5%。、MgS〇4〇 · 5%。、FeS〇4〇 · 01%。、琼脂20g，水 1000ml，pH7 · 2-7 · 4。3. 根据权利要求1所述的防治草莓红中柱病的微生物有机肥的生产方法，其特征在于， 步骤(2)中，LB培养基的组成为:蛋白胨1 Og/L、酵母膏5g/L、氯化钠1 Og/L，PH7.2。4. 根据权利要求1所述的防治草莓红中柱病的微生物有机肥的生产方法，其特征在于， 步骤(2)中，山东链霉菌一级种子液的培养条件为:26-30°C摇瓶培养48-52h;热噬淀粉芽孢 杆菌一级种子液的培养条件为:3〇-34°C摇瓶培养14-18h。5. 根据权利要求1所述的防治草莓红中柱病的微生物有机肥的生产方法，其特征在于， 步骤(3)中，发酵培养基的组成为:麸皮5-20g/L、豆饼粉4-10g/L、玉米粉5-15g/L。6. 根据权利要求1所述的防治草莓红中柱病的微生物有机肥的生产方法，其特征在于， 步骤(3)中，山东链霉菌二级种子液的培养条件为:26-30°C培养48-52h;热噬淀粉芽孢杆菌 二级种子液的培养条件为:30-34°C培养14h-24h。7. 根据权利要求1所述的防治草莓红中柱病的微生物有机肥的生产方法，其特征在于， 步骤(4)中，山东链霉菌的发酵培养条件为26-30Γ培养4-8天;热噬淀粉芽孢杆菌的发酵培 养条件为:30-34°C培养24h-36h。8. 根据权利要求1所述的防治草莓红中柱病的微生物有机肥的生产方法，其特征在于， 所述热噬淀粉芽孢杆菌为中国高校微生物菌种目录编号为CICHMB1594的菌株。9. 权利要求1至8任一项所述的生产方法制备得到的微生物有机肥，其特征在于，微生 物有机肥中，有效活菌数2 5亿/g。10. 权利要求9所述的微生物有机肥在防治草莓红中柱病中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种防治草莓红中柱病的微生物有机肥及其生产方法，将山东链霉菌、热噬淀粉芽孢杆菌分别制备得到一级种子液、二级种子液，然后进行发酵培养，将发酵培养后的菌液按体积比(1-3)：(5-10)混合，将混合后的菌液加入到粪料和蘑菇菌渣的初次堆肥发酵后的有机质中，进行再次发酵，混合后的菌液的加入量为10-20％；将再次发酵后的培养物低温干燥，即得。本发明的微生物有机肥所选用的微生物菌株之间不存在拮抗作用，各菌株及其代谢产物能够协同作用，共同抑制植物病原菌的增殖，起到防治病虫害的作用，特别是对于草莓红中柱病的防治效果显著，见效快，不会产生抗药性。
【IPC分类】C05F17/00, C05F15/00
【公开号】CN105601358
【申请号】CN201510690715
【发明人】李德舜, 张海林, 李瑾
【申请人】李德舜
【公开日】2016年5月25日
【申请日】2015年10月22日