中，采用D101大孔吸附树脂柱对其进行洗 脱，洗脱剂为乙醇与水的体积比为10:90,洗脱3个柱体积，收集洗脱液，命名为MM-1，备用；
[0087] S3.将步骤S2中收集到的流分MM-1用反相0DS柱层析进行洗脱，洗脱剂为甲醇-水 系统，其体积比为28:72，洗脱18个柱体积，按每3个柱体积收集一个流分的洗脱液，按顺序 收集 6 个流分，分别命名为:MM-11，MM-12，MM-13，MM-14，MM-15，MM-16备用；
[0088] S4.将步骤S3中的收集到的流分MM-13用制备液相分离，制备液相色谱柱为:YMC， 2 0mm* 2 5 0mm，流速：10m 1 /m i η，流动相为甲醇-水-乙酸系统，甲醇：水：乙酸的体积比为10: 90:0.01，按出峰顺序收集洗脱液，共收集4个流分，分别命名为MM-131，MM-13 2，MM-133，ΜΜ-134，备用；
[0089] S5.将步骤S4中收集到的流分ΜΜ-133用制备液相纯化，制备液相色谱柱为:YMC， 20mm*250mm，流速:5ml /min，流动相为甲醇-水-乙酸系统，甲醇:水：乙酸的体积比为15:85: 〇. 01，收集洗脱液，重结晶后得到所述苯丙素类化合物。
[0090] 将实施例1至实施例5制备得到的化合物进行质谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱 的检测，结果证明所得化合物为:3 羟基-4 '葡萄糖基-3-羟基丁酸甲酯。其结构式如式（I) 所示：
[0091]
[0092] 其质谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱的谱图数据如下：
[0093] HR-ES頂S显示[M+Na]+为m/z 397.1267,结合核磁特征，可得分子式为C16H22〇1Q，不 饱和度为6。
[0094] 4.12(t，2H)，3.56(m，lH)，1.14(s，3H)。
[0095] 13C-NMR( 150MHz，CD30D): 179 · 3(C-1 )，168 · 8(C-5，），150 · 1 (C-Γ )，144 · 7(C-3，）， 129.9(C-2'），116.4(C-4'），114.8(C-6'），103.6(C-1"），76.6-61.4(C2"-6"），42.9(C-2), 21.8(C-3),17.0(-CH 3)〇
[0096] 实施例6苯丙素类化合物盐的制备
[0097] 苯丙素类化合物盐酸盐的制备：
[0098]搅拌下将该苯丙素类化合物甲醇溶液中滴加饱和盐酸至pH值2-3,搅拌下滴加乙 腈，抽滤，干燥得到白色粉末固体，即为苯丙素类化合物的盐酸盐。
[0099]苯丙素类化合物磺酸盐的制备：
[0100]在含有该苯丙素类化合物、溶剂、磺酸、中性油和促进剂的反应体系中加入碱金属 的氢氧化物，加入溶剂、低级醇和助促进剂，通入二氧化碳，分离得到白色粉末固体，即为苯 丙素类化合物的磺酸盐。
[0101] 苯丙素类化合物钾盐或钠盐的制备：
[0102] 将溶于乙醇中的Κ0Η或NaOH加入该苯丙素类化合物中，搅拌下加热回流反应，冷制 室温，搅拌下滴加乙腈，抽滤，干燥得白色固体，即为该苯丙素类化合物的钾盐或钠盐。
[0103] 苯丙素类化合物铵盐的制备：
[0104] 搅拌下将该苯丙素类化合物甲醇溶液中滴加饱和氨水至pH值9-11，搅拌下滴加乙 腈，抽滤，干燥得到白色固体，即为苯丙素类化合物的铵盐。
[0105] 上述化合物盐的谱图数据：
[0106] 苯丙素类化合物盐酸盐：ESIMS显示m/z 410.62，核磁特征1!1-匪1?(60(^取， CD30D):7.40(dd，lH)，7.07(dd，lH)，6.77(dd，lH)，4.64(d，lH)，4.02(t，2H)，3·46(ι?，1H)， l.ll(s，3H)〇
[0107] 苯丙素类化合物磺酸盐：ESIMS显示为m/z 438.22，核磁特征咕-丽1?(6001〇^， CD30D):7.54(dd，lH)，7.13(dd，lH)，6.80(dd，lH)，4.83(d，lH)，4.10(t，2H)，3.54(m，lH)， 1.13(s，3H)〇
[0108] 苯丙素类化合物钾盐或钠盐：
[0109] 钾盐：ESIMS显示m/z 412 · 42，核磁特征1H-匪R(600MHz，CD30D): 7 · 55(dd，1H)， 7.11(dd，lH)，6.86(dd，lH)，4.83(d，lH)，4.11(t，2H)，3.56(m，lH)，1.14(s，3H)。
[0110] 钠盐：ES頂S显示m/z 396.54,7.51(dd，lH)，7.10(dd，lH)，6.87(dd，lH)，4.85(d， lH)，4.12(t，2H)，3.57(m，lH)，1.14(s，3H)。
[0111] 苯丙素类化合物铵盐:ESMS显示m/z 389.26，核磁特征1H-NMR(600MHz，CD30D): 7.46(dd,lH),7.17(dd,lH),6.80(dd,1H),4.84(d,1H),4.13(t,2H),3.51(m,1H),1.11(s, 3H)〇
[0112] 上述苯丙素类化合物的结构式如式(IV)~式(VI)所示。
[0113]
[0114]
[0115] 其中，式(IV)为制备得到的苯丙素类化合物盐酸盐，式（V)为制备得到的苯丙素 类化合物的其中一种磺酸盐，式（VI)为制备得到的苯丙素类化合物的其中一种钾盐，式 (W)为制备得到的苯丙素类化合物的其中一种钠盐，式(VI)为制备得到的苯丙素类化合物 的其中一种铵盐。
[0116] 实验例7应用试验
[0117] 本发明所述化合物以及盐对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞氧化应激与炎症的影 响。（为了实验过程中记录方便，以下将本发明所述的苯丙素类化合物标号为:药物MM-133， 即本发明中所述的药物MM-133即是指本发明式（I)所示苯丙素类化合物或其药学上可接受 的盐。）
[0118] 1材料与方法
[0119] 1.1药品及仪器
[0120] 脂多糖（lipopolysaccharide，LPS)，MTT购自 Sigma公司；小鼠巨·细胞Raw264 · 7 购自湘雅细胞库;PBS; DMEM高糖培养基、胎牛血清、青霉素与链霉素;全自动酶标仪;恒温 C02培养箱。
[0121] 小鼠白介素 l-f3(IL-1-f3)ELISA检测试剂盒，批号：2014/06(96T);小鼠白介素6 (IL-6)ELISA检测试剂盒，批号：2014/06(96T);小鼠肿瘤坏死因子-a(TNF-a)ELISA检测试 剂盒，批号：2014/06(96T);小鼠一氧化氮(NO)ELISA检测试剂盒，批号：2014/10(96T);小鼠 羟基自由基(OH)ELISA检测试剂盒，批号:2014/10(96T)。
[0122] 1.2药物制备
[0123] 首先用少量DMS0溶解，然后用DMEM稀释至一定的浓度，使终浓度中DMS0含量少于 1%0 〇
[0124] 1.3细胞培养
[0125] 小鼠巨噬细胞Raw 264.7培养于含10%热灭活（56°(：，3〇1^11)的胎牛血清卬83)、 10U/mL青霉素钠、100yg/mL链霉素的DMEM培养基中，37°C、5 % C02恒温培养箱中孵育生长。
[0126] 1.4细胞活力测定
[0127] 细胞活力通过MTT法来测定。将细胞制成细胞悬液接种于96孔板(1 X 104个/孔)孵 育24h，再同步化24h，然后将不同浓度的药物作用于细胞2h，然后再加入LPS(30yg/mL)刺激 24h，吸弃原培养基，每孔加入100yL的MTT(0.5mg/mL)继续孵育4h，吸弃培养基，每孔加入 150yL的DMS0，摇床振摇10min，在490nm处测定吸光度。
[0128] 1.5 N0含量测定
[0129] Raw 264.7细胞接种于96孔板24h，再同步化24h，然后将不同浓度的药物作用于细 胞2h，然后再加入LPS( 30yg/mL)刺激24h，最后收集上清液，并于lOOOOrpm离心5min，分装上 清并置于_80°C保存备用。通过小鼠 N0试剂盒测定N0含量。
[0130] 1.6炎症因子了陬-€[，几-10，几-6测量
[0131 ] 样品取1.5制备好的样品用于后续炎症因子测定。细胞产生TNF-α，IL-Ιβ，IL-6的 量通过小鼠 TNF-a，IL-Ιβ，IL-6试剂盒来测定。
[0132] 1.7 0H含量测定
[0133] 样品取1.5制备好的样品用于0H因子测定。通过0H试剂盒测定含量。
[0134] 1.8统计分析
[0135] 采用SPSS17.0软件，实验数据以（x±s表示;所得数据通过用单因素方差分析，方 差齐性用LSD检验，方差不齐用Dunnett T3检验。
[0136] 2实验结果
[0137] 2.1细胞活力
[0138] 药物对细胞活力的影响通过MTT法来评价。如图3所示，药物MM-133在1.50-13.50μ g/mL浓度范围内对Raw 264.7细胞活力没有显著影响；因此在此范围浓度下的药物浓度对 于后续实验是合适的。
[0139] 2.2药物抑制N0的产生
[0140] 如图4所示，通过LPS刺激R