g，I 150 mg，Zn 2 000 mg。
[0029] 实施例3
[0030] 碱性蛋白酶用量的优化：
[0031] 以碱性蛋白酶为酶源对实施例1或2浒苔型复合饲料进行酶解试验，以总氨基酸含 量为判别指标对不同酶添加量对浒苔型复合饲料酶解效果进行评价（图1)，结果表明总氨 基酸随碱性蛋白酶用量的增加而增加，但在碱性蛋白酶添加量为8%。和10%。时差异不显著 (P〈0.05)，结合生产成本，确定碱性蛋白酶添加量为8%。为进行浒苔型复合饲料酶解的最适 添加量。
[0032] 实施例4
[0033]碱性蛋白酶酶解浒苔型饲料方法：向实施例1或实施例2所配置的干重I OOg饲料中 加入0.8ml碱性蛋白酶溶液，搅拌均匀，50°C反应时间为2.5h进行酶解反应，酶解完成后90 tC反应15min以对碱性蛋白酶进行灭活处理，然后自然冷却，获得酶解饲料。
[0034] 实施例5
[0035] 发酵条件优化，主要包括以下步骤：
[0036]①发酵菌株的扩大培养:酿酒酵母菌(编号为CICC1251)购自于中国工业微生物菌 种保藏管理中心，活化培养后经梯度耐盐筛选得到实验用菌株。将保存于斜面培养基的酿 酒酵母接种于YF>D液体培养基（yeast extract peptone dextrose medium，配方为1 %酵母 浸粉，2 %葡萄糖，2 %氯化钠，2 %大豆蛋白胨），置于37 °C、120rpm，恒温水浴摇床振荡培养， 根据该菌在该条件下的生长曲线（图2)，选取震荡培养IOh时的培养液作为发酵种子液。 [0037]②发酵条件的优化
[0038]以实施例4所获得的酶解饲料为底物，以实施例5所获得的发酵种子液为发酵菌， 以发酵后饲料中的还原性糖含量作为评判指标，探讨了饲料含水量（以干物质计，分别为 60%、70%、80% )、时间（I2h、24h、36h)、酿酒酵母种子液接种量(v/w，以干物质计，分别为 8%、12%、16% )三个因素对浒苔型刺参饲料发酵效果的影响（见表1)。由结果可知，9个实 验组中还原性糖的含量差异显著，其中，G7中还原性糖含量最高，而Gl中最低。采用极差法 对各组数据进行分析得出：三个实验因素中，对还原性糖含量变化作用影响大小的顺序分 别是时间、含水量和接种量，由此确定该饲料最优发酵条件为35 °C，16 %接种量(v/w)，80 % 含水量，反应时间为24h。
[0039]表1不同发酵条件对浒苔配合饲料还原性糖含量的影响
[0042] 实施例6
[0043] 浒苔型海参生物饲料(流体型）的制备：以实施例4所获得的酶解饲料为底物，以实 施例5所获得的发酵种子液为发酵菌，在35°C，16%接种量(v/w)，80 %含水量，发酵24h，发 酵期间每2h搅拌混匀1次，反应结束后-20°C~(TC低温保存，获得浒苔型海参生物饲料(流 体型）。
[0044] 实施例7
[0045] 浒苔型海参生物饲料(干粉型）的制备:对实施例6获得的浒苔型海参生物饲料(流 体型)在60°C烘干后，再用粉碎机进行粉碎，获得浒苔型海参生物饲料(干粉型）。
[0046] 实施例8
[0047] 浒苔型海参生物饲料对刺参生长、存活和免疫的影响
[0048] 根据浒苔型海参生物饲料的制备流程，制备以下6种饲料:①未处理组饲料:按照 实施例1配方制备未进行酶解发酵处理的饲料;②酶解饲料:按照实施例3制备的酶解饲料； ③发酵饲料：以实施例1制备饲料原料，未经酶解处理，以实施例5所获得的发酵种子液为发 酵菌，在35°C，16%接种量(v/w)，80%含水量，发酵24h，获得的发酵饲料;④流体型生物饲 料:按照实施例6制备的浒苔型海参生物饲料(流体型）；⑤干粉型生物饲料:按照实施例7制 备的浒苔型海参生物饲料(干粉型）；⑥对照组:从市场上购买的以鼠尾藻、马尾藻、石莼、扇 贝边为原料主要成分，经过超微粉碎所配制的刺参配合饲料。
[0049]选取平均体重为（1.92 ±0.02)g/头的健康刺参苗种，进行42d的投喂实验，统计投 喂不同类型饲料实验组刺参苗种的成活率、增重率、特定生长率并计算不同类型饲料的饵 料系数。由图3可以看出，投喂干粉型生物饲料组和流体型生物饲料组刺参苗种的存活率均 达到了 97.78%，显著高于其他4个实验组，酶解饲料组刺参苗种的存活率与对照组、未处理 组和发酵饲料组的存活率差异不大，存活率在90%~93%。各组饲料对刺参增重率、特定生 长率和饲料系数的结果(表2)可以看出，不同类型的海参饲料其促刺参生长效果的排序为 流体型生物饲料>干粉型生物饲料>发酵饲料>未处理组饲料>酶解饲料>对照组。流体 型生物饲料组刺参苗种获得了最高的增重率和特定生长率，且显著高于其他各组，而饵料 系数为1.12。干粉型生物饲料也获得了较好的增重率和特定生长率，其饵料系数为1.53。流 体型生物饲料和干粉型生物饲料的饵料系数显著低于其他各组，表明其具有良好的促生长 效果。由此，可以看出，添加浒苔的饲料可以显著提高刺参的生长，而以此为基础制备的生 物饲料可以更高效的提高刺参的存活率并显著提升刺参对饲料的利用率，因此，浒苔型生 物饲料具有广阔的应用前景。
[0050]表2投喂不同类型饲料对海参生长性能的影响
【主权项】
1. 一种浒苔型刺参生物饲料，其特征在于所述饲料的原料包括浒苔、石莼粉、豆柏、扇 贝边粉、葡萄糖、贝壳粉、维生素预混料和矿物质预混料，所述饲料的制备方法包括对上述 原料混合后先进行酶解再发酵的步骤。2. 根据权利要求1所述的一种浒苔型刺参生物饲料，其特征在于所述酶解所用的水解 酶为碱性蛋白酶;发酵所用的菌株为酿酒酵母。3. 根据权利要求1所述的一种浒苔型刺参生物饲料，其特征在于所述的酶解条件为酶 的用量为混合饲料干重的0.8% (重量比），pH9~11，含水量75% (重量比），反应温度为50 °C，反应时间为2.5h;酶解完成后对碱性蛋白酶进行灭活处理。4. 根据权利要求1所述的一种浒苔型刺参生物饲料，其特征在于所述的发酵条件:所用 酵母为处于生长曲线稳定期的液体培养的酿酒酵母，酿酒酵母培养液的用量为饲料干重的 16 % (重量比），发酵基质含水量80 % (重量比），反应温度为35 °C，反应时间为24h，发酵期间 每2h搅拌混匀1次，反应结束后-20°C~0°C低温保存。5. 根据权利要求1所述的一种浒苔型刺参生物饲料，其特征在于所述的原料按照干物 质重量比浒苔：石莼粉:豆柏：扇贝边粉:葡萄糖：贝壳粉:维生素预混料:矿物质预混料= 40:30:8:15:1:4:1:1 组成。6. 根据权利要求1所述的一种浒苔型刺参生物饲料，其特征在于所述的浒苔为鲜浒苔 浆或浒苔干粉，所述鲜浒苔浆为鲜浒苔经过漂洗、挤压后，用匀浆机进行匀浆处理得到;所 述的浒苔干粉为鲜浒苔烘干处理并粉碎得到。
【专利摘要】一种浒苔型刺参生物饲料及其制备方法，属于水产饲料领域，所述饲料的原料包括浒苔、石莼粉、豆粕、扇贝边粉、葡萄糖、贝壳粉、维生素预混料和矿物质预混料，所述饲料的制备方法包括对上述原料混合后先进行酶解再发酵的步骤。本发明饲料显著提高了刺参的生长率和存活率，提高了现有饲料资源的利用效率，达到了降低饲料和饲养成本的效果，减少了饲料和养殖产业所带来的环境污染。
【IPC分类】A23K20/189, A23K10/30, A23K10/12, A23K20/20, A23K10/26, A23K40/00, A23K20/174, A23K20/163, A23K10/18, A23K50/80
【公开号】CN105639209
【申请号】
【发明人】廖梅杰, 常青, 王印庚, 李猛, 李彬, 荣小军, 张正, 姜燕
【申请人】中国水产科学研究院黄海水产研究所
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年3月21日