一种Aminoquinol的新用图
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及医药领域，具体是一种Aminoquinol的新用途。
【背景技术】
[0002]原发性肝癌是危害人类健康的重要疾病之一，多次被我国政府列为研究和防治的重点。肝癌的治疗长期以来一种是一个世界性的难题。肝癌发病隐匿，患者就诊时多属中、晚期，而且肝癌是一种恶性程度高、浸润和转移性强以及极易耐药的恶性肿瘤，目前临床上治疗肝癌的化疗药物治疗效果都不是很理想，且外科手术治疗后存在70-90%的复发率，复发后的患者对化疗、放疗出现抵抗作用，因此寻找新型抗肝癌药物迫在眉睫。
[0003]细胞周期紊乱是恶性肿瘤形成的一个标志，细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)的激活与失活维持着细胞周期各时相有序进行。细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4，6是细胞周期Gl期前期的关键的调节因子，抑制细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4，6可以抑制肿瘤细胞的增生，也为一个很好的肿瘤药物靶点，所以筛选出可抑制细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4，6活性的药物即可抑制抑制肿瘤细胞的增生，发挥抗肝癌的功效。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种Aminoquinol用于制备治疗肝癌药物的新用途，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0005]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
[0006]一种Aminoquinol的新用途，所述Aminoquinol为勒点⑶K4/6抑制剂，具有抗肝癌作用，Aminoquinol用于制备治疗肝癌的抗癌药物。
[0007]作为本发明进一步的方案:所述Aminoquinol对肝癌细胞系HepG2和Huh7有抗癌效果，用3口]?/1、1(^]\1/1、3(^]\1/1浓度的41^110911丨1101干扰肝癌细胞系!1印62和!111117进行]\0'1'实验检测，呈现时间分别为2411、4811、7211，显示呈现时间及剂量依赖性抑制他?62和他117增加效果；所述Aminoquinol对膀胱癌细胞系RT112和SW780有抗癌效果，用3yM/L、10yM/L、30yM/L浓度的Aminoquinol干扰膀胱癌细胞系RT112和SW780进行MTT实验检测，呈现时间分别为24h、48h、72h，显示呈现时间及剂量依赖性抑制1^112和3￥780增加效果。
[0008]作为本发明再进一步的方案:通过流式细胞术检测3yM/L、IΟμΜ/L、30yM/L浓度条件下AminoquinoI干扰肝癌细胞HepG2和Huh7，干扰6h、12h、24h后，AminoquinoI增加了HepG2和Huh7停滞在Gl期的细胞，呈现时间及剂量依赖性具有增加的趋势，P〈0.05，随着Gl期细胞数量的增加，S期细胞数量减少。
[0009]作为本发明再进一步的方案:通过流式细胞技术检测3yM/L、IΟμΜ/L、30yM/L浓度条件下Aminoquinol干扰肝癌细胞Huh7和H印G2后细胞凋亡数量，呈现时间分别为24h、48h、72h，Aminoquinol增加了细胞的凋亡数量，显示呈现时间及剂量依赖性具有增加的趋势，P〈0.05ο
[0010]作为本发明再进一步的方案:用六111；[110911；[1101干扰肝癌细胞!111117及此口62，通过Western实验检测与细胞周期Gl期信号通路蛋白表达情况；用AminoquinoI干扰肝癌细胞HepG2和Huh7细胞后，对调节细胞周期Gl期信号通路的CDK2，4，6、cycl inD、pho-CDK4/6蛋白表达量的变化情况进行检测；结果显示Aminoquinol干扰肝癌细胞Huh7和HepG2后其⑶K4，6，cycl inDpho-CDK4和pho-CDK6蛋白表达量呈现剂量依赖性下降趋势，CDK2蛋白表达量无变化，Aminoquinol对CDK4/6具有抑制作用。
[0011 ]与现有技术相比，本发明的有益效果是:本发明通过一系列实验测试Aminoquinol对肝癌细胞系HepG2和Huh7的影响，表明Aminoquinol为靶点CDK4/6抑制剂，能增加HepG2和Huh7停滞在Gl期的细胞数量，减少S期细胞数量;能提高HepG2和Huh7细胞凋亡率;能抑制细胞周期Gl期信号通路的⑶K4，6、cyclinD、pho-⑶K4/6蛋白表达，具有抗肝癌作用，因此，Aminoquinol能用于制备治疗肝癌的抗癌药物；由于Aminoquinol已经是被FDA注册过的用来抗寄生虫病的药物，故缩短了后期的临床实验成本及药物开发的时间，大大节约了开发一个新的抗癌药物的成本和时间。
【附图说明】
[0012]图1为本发明中不同浓度Aminoquinol影响Huh7细胞增殖曲线图。
[0013]图2为本发明中不同浓度Aminoquinol影响HepG2细胞增殖曲线图。
[0014]图3为本发明中不同浓度Aminoquinol不同呈现时间影响Huh7细胞增殖曲线图。
[0015]图4为本发明中不同浓度Aminoquinol不同呈现时间影响HepG2细胞增殖曲线图。
[0016]图5为本发明中不同浓度Aminoquinol不同呈现时间影响RT112细胞增殖曲线图。
[0017]图6为本发明中不同浓度Aminoquinol不同呈现时间影响SW780细胞增殖曲线图。
[0018]图7为本发明中不同浓度Aminoquinol不同呈现时间Huh7在Gl期的细胞数量变化曲线图。
[0019]图8为本发明中不同浓度Aminoquinol不同呈现时间HepG2在Gl期的细胞数量变化曲线图。
[°02°] 图9为本发明中不同浓度Aminoquinol影响Huh7的细胞周期分布柱形图。
[0021 ]图10为本发明中不同浓度Aminoquinol影响HepG2的细胞周期分布柱形图。
[0022]图11为本发明中不同浓度Aminoquinol不同呈现时间Huh7的细胞凋亡数量变化曲线图。
[0023]图12为本发明中不同浓度Aminoquinol不同呈现时间HepG2的细胞凋亡数量变化曲线图。
[0024]图13为本发明中不同浓度厶111；[110911；[1101抑制!111117和!16口62中001(2，4，6、05^1;[110、pho-CDK4和pho-CDK6蛋白表达效果图。
[0025]图14为本发明中不同浓度Aminoquinol抑制Huh7和HepG2中CDK2蛋白表达柱形图。
[0026]图15为本发明中不同浓度Aminoquino I抑制Huh7和HepG2中cy c IinD蛋白表达柱形图。
[0027]图16为本发明中不同浓度Aminoquinol抑制Huh7和HepG2中CDK6蛋白表达柱形图。
[0028]图17为本发明中不同浓度Aminoquinol抑制Huh7和HepG2中pro-CDK6蛋白表达柱形图。
[0029]图18为本发明中不同浓度Aminoquinol抑制Huh7和HepG2中pro-CDK4蛋白表达柱形图。
[0030] 图19为本发明中不同浓度Aminoquinol抑制Huh7和HepG2中CDK4蛋白表达柱形图。
【具体实施方式】
[0031 ]下面结合【具体实施方式】对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
[0032]—种Aminoquinol的新用途，所述Aminoquinol为勒点⑶K4/6抑制剂，具有抗肝癌作用，Aminoquinol用于制备治疗肝癌的抗癌药物。
[0033]该新用途的确定实验包括以下步骤:
[0034]I)用计算机idock软件针对靶点CDK4/6筛选出抗肝癌的候选CDK4/6抑制剂:
[0035]从FDA认证的包括在dbap和fda目录下ZINC药物数据库中4，914个药物进行分析且依据绑定的亲和强度值进行排序，从中找出且购买到9个打分最高的化合物进行下一步的实验，