耗的氢氧化钠标准溶液的体积(毫升数)。
[0023]酶活力的定义:在上述条件下，以水解Iumol青霉素G所需要的酶量，定义为I个酶的活力单位。以u表示。
[0024]液体酶活力(umol/ml)=1000V*N/(10.*VC)
其中，V:滴定消耗的氢氧化钠标准溶液体积(ml) ;N:标准氢氧化钠的浓度，(mol/L)；1:反应的时间(min ): VC:酶液的加入量(ml ) ; 1000:换算系数，Imo I = 1 OOOmmo 1 =lOOOOOOumolo
[0025]综上所述，本发明具有以下有益效果: 本发明所述的一种青霉素酰化酶的产生菌的培养方法能够培养出高活性的青霉素酰化酶产生菌，并且所培养出的产生菌所产生的青霉素酰化酶活性高。
【具体实施方式】
[0026]下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0027]下面以实施例对本发明进行详细说明。
[0028]实施例1:一种青霉素酰化酶的产生菌的培养方法，包括如下步骤:
①培养基制备:制备固体种子培养基、液体种子培养基或发酵种子培养基中的一种，在119°C下灭菌32分钟，备用；
②菌种活化:将细菌种子保存液或细菌种子保存块加入到培养基中，36.8°C下进行培养，待用；
③制备菌种培养平板:将自来水和培养皿在119°C下灭菌32分钟，备用；制备如步骤①中所述的固体种子培养基，在未凝固前，将I体积分数的固体培养基倒入灭菌后的培养皿中，摇匀，冷却凝固后备用；制备如步骤①中所述的固体种子培养基，并分成若干份在灭菌的试管中形成斜面；
④稀释种子液:制备如步骤②中活化后的所述的液体种子培养基，分别稀释1000倍、10000倍、100000倍及 1000000倍备用；
⑤种子液涂制并挑取:将步骤④中配置好的四种浓度的液体种子取0.0066体积分数分别滴加到不同的菌种培养平板中，使其涂布均匀，倒扣放置在培养箱中，并在36.8°C下培养50小时，挑取生长的菌落，将其置于步骤③中形成固体种子培养基形成斜面的试管中；
⑥菌种培养:将步骤⑤中的试管进行编号或直接放入培养箱中，在36.8°C下培养2天；
⑦摇瓶初筛选:将步骤⑥中的试管进行编号，初步培养后，将5%体积分数的固体种子培养基连带菌落接入摇瓶中进行发酵培养，所述摇瓶内设置有步骤①中所述的发酵种子培养基，培养过程中将摇床的转速调节至230转/分钟，在36.8°C下培养74小时，检测各瓶细菌所产生的青霉素酰化酶的活力；
⑧摇瓶复筛选:挑选经步骤⑦检测后青霉素酰化酶的活力排名在总数25%之前的固体种子培养基，并将与之对应的步骤⑥中所述试管筛选出来;重复步骤⑦的初步培养和发酵培养，再挑选经重复步骤⑦的初步培养和发酵培养检测后青霉素酰化酶的活力排名在总数50%之前的固体种子培养基，并将与之对应的步骤⑥中所述试管筛选出来，作为生产种子，将所述生产种子转接培养，形成母种。
[0029 ]步骤①中所述固体种子培养基由I质量份蛋白胨、0.6质量份酵母膏、0.9质量份氯化钠、1.9质量份琼脂以及9 5.2质量份的水混合制成。
[0030]步骤②中所述的菌种活化方法为将步骤①中所述的固体种子培养基装入试管或茄子瓶，摆成斜面，所述斜面的长度为所述试管的1/3，或，所述茄子瓶中的固体种子培养基顶端距离所述茄子瓶瓶颈的底端的距离为2 dcm;将储存的菌种放置于所述试管或所述茄子瓶内，并涂布均匀，36.8 °C下培养4天即可。
[0031]步骤⑦中所述的初步培养为用接种针取存储的菌种置于内含有步骤①中所述的液体种子培养基的三角瓶中，36.8°C下培养15.5小时。
[0032]步骤⑧中所述生产种子转接培养方法为小规模培养方法:在三角瓶中装入步骤①所述的发酵种子培养基50体积份，将2.6体积份的生产种子置于其中，在37.2 °C、摇床转速为250转/分钟条件下，震动培养74小时。
[0033]实施例2:—种青霉素酰化酶的产生菌的培养方法，包括如下步骤:
①培养基制备:制备固体种子培养基、液体种子培养基或发酵种子培养基中的一种，在123°C下灭菌32分钟，备用；
②菌种活化:将细菌种子保存液或细菌种子保存块加入到培养基中，37.2 °C下进行培养，待用；
③制备菌种培养平板:将自来水和培养皿在123°C下灭菌28分钟，备用；制备如步骤①中所述的固体种子培养基，在未凝固前，将I体积分数的固体培养基倒入灭菌后的培养皿中，摇匀，冷却凝固后备用；制备如步骤①中所述的固体种子培养基，并分成若干份在灭菌的试管中形成斜面；
④稀释种子液:制备如步骤②中活化后的所述的液体种子培养基，分别稀释1000倍、10000倍、100000倍及 1000000倍备用；
⑤种子液涂制并挑取:将步骤④中配置好的四种浓度的液体种子取0.0067体积分数分别滴加到不同的菌种培养平板中，使其涂布均匀，倒扣放置在培养箱中，并在37.2°C下培养46小时，挑取生长的菌落，将其置于步骤③中形成固体种子培养基形成斜面的试管中；
⑥菌种培养:将步骤⑤中的试管进行编号或直接放入培养箱中，在37.2°C下培养I天；
⑦摇瓶初筛选:将步骤⑥中的试管进行编号，初步培养后，将5%体积分数的固体种子培养基连带菌落接入摇瓶中进行发酵培养，所述摇瓶内设置有步骤①中所述的发酵种子培养基，培养过程中将摇床的转速调节至270转/分钟，在37.2°C下培养70小时，检测各瓶细菌所产生的青霉素酰化酶的活力；
⑧摇瓶复筛选:挑选经步骤⑦检测后青霉素酰化酶的活力排名在总数25%之前的固体种子培养基，并将与之对应的步骤⑥中所述试管筛选出来;重复步骤⑦的初步培养和发酵培养，再挑选经重复步骤⑦的初步培养和发酵培养检测后青霉素酰化酶的活力排名在总数50%之前的固体种子培养基，并将与之对应的步骤⑥中所述试管筛选出来，作为生产种子，将所述生产种子转接培养，形成母种。
[0034]步骤①中所述固体种子培养基由I质量份蛋白胨、0.65质量份酵母膏、1.1质量份氯化钠、2.1质量份琼脂以及9 5.5质量份的水混合制成。
[0035]步骤②中所述的菌种活化方法为将步骤①中所述的固体种子培养基装入试管或茄子瓶，摆成斜面，所述斜面的长度为所述试管的1/2，或，所述茄子瓶中的固体种子培养基顶端距离所述茄子瓶瓶颈的底端的距离为2.1cm;将储存的菌种放置于所述试管或所述茄子瓶内，并涂布均匀，37.2°C下培养3天即可。
[0036]步骤⑦中所述的初步培养为用接种针取存储的菌种置于内含有步骤①中所述的液体种子培养基的三角瓶中，37.2°C下培养14.5小时。
[0037]步骤⑧中所述生产种子转接培养方法为小规模培养方法:在三角瓶中装入步骤①所述的发酵种子培养基50体积份，将2.4体积份的生产种子置于其中，在36.8°C、摇床转速为250转/分钟条件下，震动培养70小时。
[0038]实施例3: —种青霉素酰化酶的产生菌的培养方法，包括如下步骤:
①培养基制备:制备固体种子培养基、液体种子培养基或发酵种子培养基中的一种，在121°C下灭菌30分钟，备用；
②菌种活化:将细菌种子保存液或细菌种子保存块加入到培养基中，37°C下进行培养，待用；
③制备菌种培养平板:将自来水和培养皿在121°C下灭菌30分钟，备用；制备如步骤①中所述的固体种子培养基，在未凝固前，将I体积分数的固体培养基倒入灭菌后的培养皿中，摇匀，冷却凝固后备用；制备如步骤①中所述的固体种子培养基，并分成若干份在灭菌的试管中形成斜面；
④稀释种子液:制备如步骤②中活化后的所述的液体种子培养基，分别稀释1000倍、10000倍、100000倍及 1000000倍备用；
⑤种子液涂制并挑取:将步骤④中配置好的四种浓度的液体种子取0.0067体积分数分别滴加到不同的菌种培养平板中，使其涂布均匀，倒扣放置在培养箱中，并在37°C下培养48小时，挑取生长的菌落，将其置于步骤③中形成固体种子培养基形成斜面的试管中；
⑥菌种培养:将步骤⑤中的试管进行编号或直接放入培养箱中，在37°C下培养1.5天；
⑦摇瓶初筛选:将步骤⑥中的试管进行编号，初步培养后，将5%体积分数的固体种子培养基连带菌落接入摇瓶中进行发酵培养，所述摇瓶内设置有步骤①中所述的发酵种子培养基，培养过程中将摇床的转速调节至255转/分钟，在37°C下培养72小时，检测各瓶细菌所产生的青霉素酰化酶的活力；
⑧摇瓶复筛选:挑选经步骤⑦检测后青霉素酰化酶的活力排名在总数25%之前的固体种子培养基，并将与之对应的步骤⑥中所述试管筛选出来;重复步骤⑦的初步培养和发酵培养，再挑选经重复步骤⑦的初步培养和发酵培养检测后青霉素酰化酶的活力排名在总数50%之前的固体种子培养基，并将与之对应的步骤⑥中所述试管筛选出来，作为生产种子，将所述生产种子转接培养，