[0052] Π 、所述Ml和/或所述M2在检测或辅助检测动物组织和/或器官中说受体激动剂中 的应用；
[0053] m、检测所述Ml和/或所述M2的的物质在检测或辅助检测动物组织和/或器官中β2 受体激动剂中的应用；
[0054] IV、检测所述Ml和/或所述M2的物质在制备检测或辅助检测动物组织和/或器官中 β2受体激动剂产品中的应用；
[0055] V、检测所述Ml和/或所述M2的表达量或相对表达量的物质在检测或辅助检测动 物组织和/或器官中β2受体激动剂中的应用；
[0056] VI、检测所述Μ1和/或所述M2的表达量或相对表达量的物质在制备检测或辅助检 测动物组织和/或器官中β2受体激动剂产品中的应用；
[0057] W、所述成套试剂在检测或辅助检测动物组织和/或器官中此受体激动剂中的应 用；
[0058]珊、所述成套试剂在制备检测或辅助检测动物组织和/或器官中此受体激动剂产 品中的应用。
[0059]上述应用中，所述检测所述Ml和/或所述M2的表达量或相对表达量可利用荧光定 量PCR进行。所述Ml和/或所述M2的表达量或相对表达量可为待测动物组织和/或器官中的 所述Ml和/或所述M2的表达量或相对表达量。
[0060]本发明中，所述动物可为哺乳动物，如山羊。所述组织可为肌肉组织。所述β2受体 激动剂可为莱克多巴胺。所述内参基因可为GAPDH。
[00611 本发明利用17个基因--ADRB2 (β2肾上腺素受体)基因、PRKACB (cAMP依赖性蛋白 激酶)基因、ADCY3(腺苷酸环化酶)基因、ATPlA3(Na+/K+-ATP酶)基因、ATP2A3(Ca++-ATP酶） 基因、PTH(甲状旁腺激素）基因、MYLK(肌球蛋白轻链激酶）基因、IL1B(白介素-1β)基因、 TNF_a(肿瘤坏死因子α)基因、PDE4C(磷酸二酯酶)基因、HSL(敏感脂肪酶)基因、FABP5(脂肪 酸结合蛋白）基因、L0C102185492(免疫球蛋白λ状多肽)基因、MYH9(肌球蛋白9)基因、NEB (伴肌动蛋白）基因、CREM(cAMP反应元件调节)基因和F0X01 (叉头框01)基因对检测动物组 织中的β2受体激动剂进行了检测，利用本发明的方法对动物体内β2受体激动剂的预测值与 动物体内受体激动剂的实测值的相关性好，R=0.9008。本发明还从这17个基因中挑选出 了六个基因对检测动物组织中的β 2受体激动剂进行了检测，利用这六个基因得到的动物体 内β2受体激动剂的预测值与动物体内β 2受体激动剂的实测值的相关性好，R = 0. 8291。利用 这六个基因对动物体内β2受体激动剂的检测，简化了检测方法。
[0062]本发明利用17个基因在样品中是否含有β2受体激动剂的水平上利用SPSS 22.0进 行分析中对初始分组中的案例(样品)进行正确分类的比率为96.3%，对交叉验证中的案例 (样品)进行正确分类的比率为96.3%。本发明利用17个基因中的六个基因在样品中是否含 有此受体激动剂的水平上利用SPSS 22.0进行分析中对初始分组中的案例(样品）进行正确 分类的比率为96.3%，对交叉验证中的案例(样品）进行正确分类的比率为96.3%。本发明 利用17个基因和这17个基因中的六个基因判断待测样品中是否含有β 2受体激动剂的正确 率均达96.3%。表明，可以利用这17个基因或这17个基因中的六个基因判断待测样品中是 否含有β 2受体激动剂，利用这六个基因确定待测样品中的β2受体激动剂，缩短了检测时间， 简化了工艺流程，并且检测效果较好。本发明可以有效解决β 2受体激动剂的监测难题，有效 实现对受体激动剂的监测。
【附图说明】
[0063]图1为利用17个基因进行分析的主成分分析结果。treatment和control分别代表 实验组(黑点）和对照组样品（白点），PC1和PC3为提取的两个主成分。
[0064]图2为利用17个基因进行分析的聚类分析结果。其中，control为对照组样品，其余 均为实验组样品。
[0065]图3为利用6个基因进行分析的主成分分析结果。treatment和control分别代表实 验组(黑点）和对照组样品（白点），PC1和PC3为提取的两个主成分。
[0066]图4为利用6个基因进行分析的聚类分析结果。其中，control为对照组样品，其余 均为实验组样品。
【具体实施方式】
[0067] 下面结合【具体实施方式】对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐 明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
[0068] 下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0069] 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0070] 实施例1、山羊肌肉组织样品中说受体激动剂的检测方法
[0071 ] 本实施例用到的实验组(treatment)和对照组(contro 1)的山羊肌肉组织样品均 由中国农业科学院饲料研究所提供。实验组的山羊肌肉组织样品为对山羊饲喂莱克多巴胺 (Dr .Ehrenstorfer GmbH(Augsburg，Germany)，LR0714001C)的山羊肌肉组织，对照组的山 羊肌肉组织样品为未对山羊饲喂莱克多巴胺以及其他任何说受体激动剂的山羊肌肉组织。 [0072]使用超高相液相色谱-四极杆质谱对实验组和对照组样品中的莱克多巴胺含量进 行测定，内参为莱克多巴胺(Dr.Ehrenstorfer GmbH(Augsburg,Germany)，LR0714022C)，定 量离子对是m/z 302.17507、m/z 308.21273。实验组和对照组的27个山羊肌肉组织样品中 莱克多巴胺的含量实测值如表1所不。
[0073]表1、实验组和对照组的各山羊肌肉组织样品中莱克多巴胺含量的实测值(g/109g 组织）
[0074] l·
[0076] 注:表1中，实验组样品中样品名称仅最后一位不同的样品为相同莱克多巴胺处理 三个山羊的样品，每行的实验组样品与对照组样品（即样品编号相同的实验组样品与对照 组样品）的区别仅在于:实验组样品来源的山羊经莱克多巴胺处理，对照组样品来源的山羊 未经莱克多巴胺处理，实验组样品来源的山羊与对照组样品来源的山羊的其他处理均相 同。
[0077] 1、检测待测动物组织中说受体激动剂的成套试剂的制备
[0078] 检测待测动物组织中β2受体激动剂的成套试剂，由可以分别与17个基因一一 ADRB2 (β2肾上腺素受体)基因、PRKACB (cAMP依赖性蛋白激酶)基因、ADCY3 (腺苷酸环化酶） 基因、ATP 1 A3 (Na+/K+-ATP酶）基因、ATP2A3 (Ca++-ATP酶）基因、PTH (甲状旁腺激素）基因、 MYLK(肌球蛋白轻链激酶)基因、IL1B(白介素_1β)基因、TNF_a(肿瘤坏死因子α)基因、PDE4C (磷酸二酯酶)基因、HSL(敏感脂肪酶)基因、FABP5(脂肪酸结合蛋白）基因、L0C102185492 (免疫球蛋白λ状多肽)基因、MYH9(肌球蛋白9)基因、NEB(伴肌动蛋白）基因、CREM(cAMP反应 元件调节)基因和F0X01(叉头框01)基因（表2)特异结合的引物对组成，这些引物对的名称 分别为？1、？2、？3、？4、？5、？6、？7、？8、？9、？11、？12、？13、？14、？15、？16、？17和卩18(表3) ;
[0079] P1为由序列1和序列2所示的单链DNA组成的引物对；
[0080] P2为由序列3和序列4所示的单链DNA组成的引物对；
[0081] P3为由序列5和序列6所示的单链DNA组成的引物对；
[0082] P4为由序列7和序列8所示的单链DNA组成的引物对；
[0083] P5为由序列9和序列10所示的单链DNA组成的引物对；
[0084] P6为由序列11和序列12所示的单链DNA组成的引物对；
[0085] P7为由序列13和序列14所示的单链DNA组成的引物对；
[0086] P8为由序列15和序列16所示的单链DNA组成的引物对；
[0087] P9为由序列17和序列18所示的单链DNA组成的引物对；
[0088] PI 1为由序列21和序列22所示的单链DNA组成的引物对；
[0089] P12为由序列23和序列24所示的单链DNA组成的引物对；
[0090] P13为由序列25和序列26所示的单链DNA组成的引物对；
[0091] P14为由序列27和序列28所示的单链DNA组成的引物对；
[0092] P15为由序列29和序列30所示的单链DNA组成的引物对；
[0093] P16为由序列31和序列32所示的单链DNA组成的引物对；
[0094] P17为由序列33和序列34所示的单链DNA组成的引物对；
[0095] P18为由序列35和序列36所示的单链DNA组成的引物对。
[0096]下述步骤中用到的内参基因为GAPDH，与内参基因的特异结合的引物对其名称为 P10，P10为由序列19和序列20所示的单链DNA组成的引物对。
[0097]表2、目的基因名称及登录号
[0098]
[0099] 表3、引物序列及退火温度
[0100]
[0102] 2、数据分析
[0103] 样品前处理：
[0104] 取约1 g山羊肌肉组织液氮研磨，用Tr izo 1法提取总RNA，用分光光度计测定RNA的 浓度和纯度，用于确定下一步cDNA合成时总RNA的添加量。cDNA第一链的合成按照 1鮮;11：1'〇8611公司的5卯615〇1^。1:￥111)〇0嫩合成试剂盒说明书进行，根据总1?祖浓度，确定 总RNA添加体积，使得总RNA添加量约lyg左右，反应条件为：25 °C，lOmin，42 °C，60min，85 °C， 5min，产物于-20°C保存。
[0105] 荧光定量PCR:
[0106] 荧光定量PCR实验步骤参照SYBR Premix Ex Taq II试剂盒(Takara，大连，中国） 进行，仪器为7500 Real Time荧光定量PCR仪(AB，加拿大，美国）对于每个基因，每个浓度梯 度设计3个平行，反应体系如下：
[0107]
[0108]结果计算：
[0109] 相对定量法计算公式为：
[0110] ACt = Ct(目的基因）-Ct(内参基因）
[0111] Λ Act = Act (实验组）-meanACt (对照组）
[0112] 相对表达倍数=2-Mct
[0113] 以上17个基因的相对于对照组样品的相对表达倍数如下表所示。
[0114] 表4、各基因的相对表达倍数
[0115]
[0116]
[0117]
[0118]
[0119] 注:*即ρ〈0·05，**ΒΡρ〈0·01。
[0120] 由表4可知，这17个基因相对表达量皆存在显著差异，因此都可作为标志物检测样 品中受体激动剂。
[0121] 3、利用17个基因预测样品中说受体激动剂含量
[0122] 3.1利用17个基因