验证。在交叉验证中，每个案例都是按照从该案例 以外的所有其他案例派生的函数来分类的。
[0195] b.已对初始分组案例中的96.3 %个进行了正确分类。
[0196] c.已对交叉验证分组案例中的96.3 %个进行了正确分类。
【主权项】
1. 检测或辅助检测待测动物组织和/或器官中β2受体激动剂的方法，包括： 利用荧光定量PCR分别扩增所述待测的离体的动物组织和/或器官中的ADRB2基因、 ΑΤΡ2Α3基因、FABP5基因、F0X01基因、PDE4C基因、ΝΕΒ基因与内参基因，根据yl、y2、y3、y4、 y5、y6、公式1和公式2分别得出bl和b2; 按照如下方法确定所述待测动物组织和/或器官中是否含有或候选含有β2受体激动剂： 如bl 2 b2，所述待测动物组织含有或候选含有&受体激动剂，如bl <b2，所述待测动物组织 不含或候选不含&受体激动剂； 所述y 1、所述y 2、所述y3、所述y4、所述y 5、所述y6分别为ADRB2基因、ATP2A3基因、FABP5 基因、F0X01基因、PDE4C基因、NEB基因的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系 的Ct值的差值； 公式 1:bl = 0 · 564 X y 1 + 13 · 288 X y2-4 · 462 X y3+3 · 554 X y4-10 · 740 X y5+3 · 724 X y6-101.111； 公式2:b2 = l .603Xyl+9. WTXySUCMXyS+lSOOXyd-g.igSXyS+LiMTXye-SG.Oig。2. 检测或辅助检测待测动物组织和/或器官中说受体激动剂含量的方法，包括： 根据权利要求1所述yl、所述y2、所述y3、所述y4、所述y5、所述y6和公式3得出所述待测 动物组织和/或器官中β2受体激动剂含量预测值pv2,根据公式4和所述预测值pv2得出所述 待测动物组织和/或器官中β2受体激动剂含量av2; 公式3 : pv2 = 1 · 284 X y 1-6 · 926 X x2+9 · 304-17 · 360 X x3-18 · 642 X x4+4 · 348 X x5+ 209.326； 公式4:av2 = 0.68747 Χρν2+17· 771 〇3. 检测或辅助检测待测动物组织和/或器官中说受体激动剂的方法，包括： 利用荧光定量PCR分别扩增所述待测的离体的动物组织和/或器官中的ADCY3基因、 ADRB2 基因、ATP1A3 基因、ATP2A3 基因、IL1B 基因、MYLK 基因、PAKACB 基因、PTH 基因、TNF-α 基 因、CREM基因、FABP5基因、F0X01基因、HSL基因、L0C102185492基因、MYH9基因、NEB基因、 PDE4C基因与内参基因，根据xl、x2、x3、x4、x5、x6、x7、x8、x9、xl0、xl 1、xl2、xl3、xl4、xl5、 xl6、xl7、公式5和公式6分别得出al和a2; 按照如下方法确定所述待测动物组织和/或器官中是否含有或候选含有β2受体激动剂： 如al 2 a2，所述待测动物组织含有或候选含有β2受体激动剂，如al <a2，所述待测动物组织 不含或候选不含&受体激动剂； 所述X1、所述x2、所述x3、所述x4、所述x5、所述x6、所述x7、所述x8、所述x9、所述X10、所 述xll、所述xl2、所述xl3、所述xl4、所述xl5、所述xl6和所述xl7分别为ADCY3基因、ADRB2基 因、ATP1A3 基因、ATP2A3 基因、IL1B 基因 、MYLK 基因 、PAKACB 基因 、PTH 基因、TNF-α 基因 、CREM 基因、FABP5基因、F0X01基因、HSL基因、L0C102185492基因、MYH9基因、NEB基因、PDE4C基因 的荧光定量PCR体系与内参基因的荧光定量PCR体系的Ct值的差值； &S5:al = 14.924Xxl-6.362Xx2+5.226Xx3+7.777Xx4+2.034Xx5+14.974Xx6-7.971Xx7+10.516Xx8-4.019Xx9+18.687Xxl0-10.382Xxll+1.690Xxl2+3.882Xxl3+ 5.632 X xl4-9.792 X xl5-18.867 X xl6-〇.499 X xl7-320.475； 公式6: a2 = 16 · 229 X xl-3 · 494 X x2+6 · 767 X x3+3 · 229 X x4+2 · 444 X x5+13 · 809 X x6- 9.465Xx7+12.347Xx8-5.194Xx9+19.640Xxl0-9.493Xxll+2.413Xxl2+3.471Xxl3+ 5.306Xxl4-10.147Xxl5-16.995Xxl6-0.182Xxl7-321.610〇4. 检测或辅助检测待测动物组织和/或器官中说受体激动剂含量的方法，包括： 根据权利要求3所述X1、所述x2、所述x3、所述x4、所述x5、所述x6、所述x7、所述x8、所述 义9、所述110、所述111、所述112、所述113、所述114、所述115、所述116、所述117和公式7得出 所述待测动物组织和/或器官中β2受体激动剂含量预测值pvl，根据公式8和所述预测值pvl 得出所述待测动物组织和/或器官中β2受体激动剂含量avl; 公式7:pvl=-14.102Xxl+4.135Xx2+9·903Xx3+l ·398Xx4+2·477Xx5_8·862 Xx6+ 12.486 X x7+12.914 X x8-8.496 X x9-4.082 X xlO+6.775 X xl1-12.455 X xl2-7.357 Xxl3-0.457Xxl4-23.512Xxl5-18.022Xxl6+14.833Xxl7+199.170； 公式 8:avl = 0.76374 Xpvl+9.7186。5. 根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于:所述动物为al)或a2): al)哺乳动物； a2)山羊； 和/或，所述组织为肌肉组织； 和/或，所述β2受体激动剂为莱克多巴胺； 和/或，所述内参基因为GAPDH。6. 根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于:所述利用荧光定量PCR分别扩增 所述待测动物组织和/或器官中的ADRB2基因、PRKACB基因、ADCY3基因、ΑΤΡ1Α3基因、ΑΤΡ2Α3 基因、ΡΤΗ基因、MYLK基因、TNF-α基因、IL1B基因、所述内参基因、PDE4C基因、HSL基因、FABP5 基因、L0C102185492基因、MYH9基因、NEB基因、CREM基因和F0X01基因的引物对分别为P1、 ?2、？3、？4、？5、？6、？7、？8、？9、？10、？11、？12、？13、？14、？15、？16、？17和卩18; 所述P1为由序列1和序列2所示的单链DNA组成的引物对； 所述P2为由序列3和序列4所示的单链DNA组成的引物对； 所述P3为由序列5和序列6所示的单链DNA组成的引物对； 所述P4为由序列7和序列8所示的单链DNA组成的引物对； 所述P5为由序列9和序列10所示的单链DNA组成的引物对； 所述P6为由序列11和序列12所示的单链DNA组成的引物对； 所述P7为由序列13和序列14所示的单链DNA组成的引物对； 所述P8为由序列15和序列16所示的单链DNA组成的引物对； 所述P9为由序列17和序列18所示的单链DNA组成的引物对； 所述P10为由序列19和序列20所示的单链DNA组成的引物对； 所述P11为由序列21和序列22所示的单链DNA组成的引物对； 所述P12为由序列23和序列24所示的单链DNA组成的引物对； 所述P13为由序列25和序列26所示的单链DNA组成的引物对； 所述P14为由序列27和序列28所示的单链DNA组成的引物对； 所述P15为由序列29和序列30所示的单链DNA组成的引物对； 所述P16为由序列31和序列32所示的单链DNA组成的引物对； 所述P17为由序列33和序列34所示的单链DNA组成的引物对； 所述PI 8为由序列35和序列36所示的单链DNA组成的引物对。7. 检测待测动物组织和/或器官中说受体激动剂的成套试剂，为下述XI)或X2): X1)权利要求6中所述P1、所述P5、所述P11、所述P13、所述P16和所述P18中的至少一种； X2)由所述XI)与H1组成的成套试剂;所述H1为所述P2、所述P3、所述P4、所述P6、所述 P7、所述P8、所述P9、所述P12、所述P14、所述P15和所述P17中的至少一种。8. 下述任一应用： I、M1和/或M2在作为检测或辅助检测动物组织和/或器官中β2受体激动剂的标志物中的 应用；所述Ml为ADRB2基因、ΑΤΡ2Α3基因、FABP5基因、F0X01基因、PDE4C基因和ΝΕΒ基因中的 至少一种；所述M2为PRKACB基因、ADCY3基因、ATP2A3基因、PTH基因、MYLK基因、TNF-α基因、 IL1B基因、HSL基因、L0C102185492基因、MYH9基因和CREM基因中的至少一种； Π 、所述Ml和/或所述M2在检测或辅助检测动物组织和/或器官中此受体激动剂中的应 用； ΙΠ 、检测所述Ml和/或所述M2的物质在检测或辅助检测动物组织和/或器官中此受体激 动剂中的应用； IV、 检测所述Ml和/或所述M2的物质在制备检测或辅助检测动物组织和/或器官中β2受 体激动剂产品中的应用； V、 检测所述Ml和/或所述M2的表达量或相对表达量的物质在检测或辅助检测动物组 织和/或器官中β2受体激动剂中的应用； VI、 检测所述Ml和/或所述M2的表达量或相对表达量的物质在制备检测或辅助检测动 物组织和/或器官中β2受体激动剂产品中的应用； W、权利要求7所述成套试剂在检测或辅助检测动物组织和/或器官中此受体激动剂中 的应用； 珊、权利要求7所述成套试剂在制备检测或辅助检测动物组织和/或器官中此受体激动 剂产品中的应用。9. 根据权利要求7所述的成套试剂或权利要求8所述的应用，其特征在于:所述动物为 权利要求1-5中任一所述动物;所述组织为权利要求1-5中任一所述组织。10. 根据权利要求9所述的成套试剂或应用，其特征在于:所述说受体激动剂为莱克多巴 胺。
【专利摘要】本发明公开了利用六个转录标志物检测动物组织中β2受体激动剂的方法。本发明所提供的方法包括：利用荧光定量PCR分别扩增待测离体动物组织和/或器官中的ADRB2基因、ATP2A3基因、FABP5基因、FOXO1基因、PDE4C基因、NEB基因与内参基因，根据各基因与内参基因体系中Ct值的差值以及相应公式分别得出b1和b2；按照如下方法确定待测动物组织和/或器官中是否含有或候选含有β2受体激动剂：如b1≥b2，所述待测动物组织含有或候选含有β2受体激动剂，如b1＜b2，所述待测动物组织不含或候选不含β2受体激动剂。本发明可以有效解决β2受体激动剂的监测难题，有效实现对β2受体激动剂的监测。
【IPC分类】G06F19/24, G06F19/18
【公开号】CN105653894
【申请号】
【发明人】杨曙明, 赵璐瑶, 张严化, 张莹, 何雯菁, 程永友, 侯粲, 游新勇, 赵杰
【申请人】中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年1月18日