用于动物的不含动物蛋白的发酵的适口因子的制作方法

专利名称：：用于动物的不含动物蛋白的发酵的适口因子的制作方法
技术领域：
：本发明涉及用于动物饲养的适口因子领域。本发明更具体涉及借助酵母发酵获得的不含有动物来源的蛋白的用于动物饲养的一种适口因子，其至少包括-水分(H):约80~96wt%;-蛋白质因子(FP):约1.5~10.0wt%;-脂肪物质(MG):最多约10wt%;墨津唐类(S):纟勺0.20~2.0wt%;和-灰分(C):约0.3~8.0wt%。
背景技术：
：借助给动物，特别是给宠物的食物，人们努力培养并保持它们的健康、良好和均衡的状态。但是，如果因为食物不满足它的口味，动物抵制或拒绝食用，甚至如果动物吃掉的配给量小的话，即使是从营养学观点来说最有益的食物也是没有意义的。同样，为了更加容易地让动物食用它们的食物，特别是对于经常证明比较难的家养的动物如狗和猫，从早期人们就进行了在保持食物营养品质的同时提高其适口性的尝试。通常，肉和鱼是大多数动物祠料中蛋白质的主要来源。实际上，动物来源物(肉、骨、鱼)提供的氨基酸的性质和数量赋予这些飼料预期的营养品质。并且，这些动物来源物具有增加这些飼料适口性的效果。然而，这些饲料中动物来源的成分的存在增加了其零售价。这就是为什么很快就有研究针对开发虽然制备费用较低，但是与以动物成分为基础(例如，以肝为基础)的传统饲料和成分同样可口的铜料和营养平衡配料成分。实际上，动物饲料工业已经很快衡量出在生产用于动物的饲料和配料成分中寻找满足营养要求，而且重要的是经济的，代替肉或鱼的稳定蛋白质来源的利益。关于这一点，美国专利US4039687(以Weyn的名义)提出用从发酵的微生物例如细菌或酵母中获得的合成蛋白来代替饲料中所有或部分动物蛋白。得到的饲料具有令人满意的适口性，并且能以比用动物或植物来源的天然蛋白为基础的饲料更少的费用来制造。在实践中，微生物在碳氢化合物上发酵后得到的生物量作为蛋白源被混合到祠料中。美国专利4800093(以Hogan等的名义)描述了一种高含水率的动物飼料产品，其中最初肉膳食的部分被丝状真菌在便宜基质例如大豆乳清上发酵得到的生物量所取代。英国专利申请GB2385767(以NorfermDA的名义)关注甲烷氧化细菌培养物作为适口因子。所使用的生物量由荚膜甲基球菌(Me^y/ococc^Cfl/WM/^M)型细菌在碳氢化合物或天然气中发酵得到。所以，根据在先技术，有可能在不损害适口性并且具有所生产的飼料的营养品质的条件下，用微生物合成的蛋白质以发酵后的得到的生物量的形式代替动物蛋白加入到饲料中。但是，将生物量作为适口因子加入到动物饲料中不是没有缺点，尤其是由于这样的成分必需具有(i)有效的所述生物量的灭活步骤，以防止对要加入的饲料产生任何意外的感官性质的改变(例如由于发酵或不合需要的微生物的生长产生的改变)；和(ii)去除发酵培养基的分离步骤。而且，这样的成分经常会有改变得到的饲料外观(例如颜色)的倾向。所以需要一种用于动物的适口因子，它们(i)在营养和卡路里方面是平衡的；(ii)至少与基于动物来源物的常规因子同样有效；(iii)容易由易于得到且经济的一次原料制备；(iv)时间稳定性；和(v)其物理性质(颜色、粘度等)尽可能中性，以使它们既不会改变所要加入的饲料的外观和质地，又不产生特殊的使用困难(例如在饲料粉碎方面)。
发明内容在本发明的范围内，申请人提出了一种用于动物的适口因子，其非常令人满意地弥补了本领域的现有需求。如下文中的详细描述和实施例中所说明的，(1)根据本发明的所述适口因子营养均衡；(2)它是素食的和低变应原的产品；(3)它比基于动物来源的蛋白的传统适口因子更加有效；(4)它容易从微生物，优选酵母的发酵获得；(5)令人惊讶地是，发酵培养基本身用作适口因子，使得在先技术中基于生物量生产适口因子所需的步骤中的一步可以省略，因为，根据本发明，不管是所述发酵培养基单独使用一一其不用生物量也能满足需要，且所述灭活步骤变得多余一一，还是在所述生物量存在的情况下使用所述发酵培养基一一有效灭活所述生物量都是件简单的事情；(6)其物理性质总体上为中性的它是像水一样的液体，颜色清澈，容易在主体中融化；(7)易于使用，尤其是通过涂敷、喷雾、混入、浸渍来使用。在本发明的术语中，用于动物的"适口因子"(或等同的"适口剂"、"美味剂"或"适口的因子")是一种其感官性质(香味、味道、外观、质地等)使得动物期望摄取的因子。在本发明的范围内，适口因子通常是添加到动物铜料中的配料成分(或添加剂)。但是，扩展来说，这也可以是含有这种成分的食物、甚至饮料。所以，本发明的第一方面涉及一种添加到动物饲料中的发酵的适口因子，其特征在于所述适口因子包括至少一种酵母培养后得到的发酵培养基，所述发酵培养基含有至少-水分(H):约80~96wt%;-蛋白质因子(FP):约1.5~10.0wt%;-脂肪类物质(MG):最多约10wt%;-糖类(S):约0.20~2.0wt%;和-灰分(C):约0.38.0wt。/(),其中所述蛋白质因子FP不含动物来源的成分。例如，具体的不含动物来源的蛋白质组分的适口因子至少包括-水分(H):约85~96wt%;-蛋白质因子(FP):约1.5~10.0wt%;-脂肪类物质(MG):最多约lwt%;-斗唐类(S):约0.20~2.0wt%;和-灰分(C):约0.3~8.0wt%;或者-水分(H):约90~96wt%;隱蛋白质因子(FP):约2.5~10.0wt%;-脂肪类物质(MG):最多约5wt。/。；-#唐类(S):约0.30~0.75wt%;和-灰分(C):约0.5~0.7wt%;再或者-水分(H):大约90~96wt%;-蛋白质因子(FP):约2.5~10.0wt%;-脂肪类物质(MG):最多约lwt%;-糖类(S):约O.30~0.75wt%;和陽灰分(C):约0.5~0.7wt%。在本说明书中，术语"灰分"指所述产品煅烧之后的矿物质。"脂肪类物质，，在此理解为指适用于动物飼料并可被在所述适口因子来源的用于发酵的微生物所代谢(即可被消耗或产生)的任何类型的脂肪类物质。其可以是动物来源的脂肪物质或植物来源的脂肪物质或其组合。专家根据其一般常识和适口因子的应用应了解应该使用哪一(些)类型的脂肪类物质。所述FP蛋白质因子的成分可以是蛋白质、肽、氨基酸及其组合。在下据上下文和他的常识确定这些术语中的一个或其他术语的确切含义。并且，"蛋白质成分"和"FP蛋白质因子成分"在此是等同的。根据一个实施方式，蛋白质因子FP包括至少约90wt。/。的一种或多种氨基酸，选自丙氨酸、苏氨酸、赖氨酸和含硫的氨基酸。特别地，所述FP蛋白质因子包括至少约95wt%，优选至少约98wt%，更优选至少约99wt。/o的所述氨基酸。这种或这些氨基酸优选选自含硫的氨基酸，例如蛋氨酸和半胱氨酸。优选使用蛋氨酸。根据另一个实施方式，根据本发明的适口因子的pH在约1.6-3.5的范围内，优选在约2.63.2的范围内。根据本发明的适口因子为"发酵的"，也就是说，其通过用至少一种樣t生物发酵获得，在本发明的范围内这种微生物是酵母菌。优选地，所述酵母菌选自耶罗威亚酵母属Kwrow/fl酿酒酵母属SaccAaramycM，，支丝酵母属C朋力Wa5p.,克鲁维酵母属i^/^yveram;;cas,毕赤酵母属P/c/n'a罕.，德巴利酵母属Z)e6"/^om少cass/.，接合酵母属Zygo犯cc/^ramycas。更优选地，所述酵母菌选自耶罗威亚解脂酵母Kwrow/a啤酒酵母Sacc/wramycescereWs/"g，易变假丝酵母Ca"cfe/ave/^fl/z'to，产乳糖酵酵母iT—vera附j;ces/ac^s,脆壁克鲁维酵母X/甲era，ces加g/fo，木糖发酵酵母尸/cA/a/oston's,汉逊氏德巴利酵母Z^Wjomyces/i"raem'z'，鲁氏接合酵母ZygosaccAaramjcasraux"。耶罗威亚解脂酵母是最优选的。如上所述，根据本发明的适口因子包括所述酵母菌培养后获得的发酵培养基。所述发酵培养基可不除去所述生物量，或者在除去所述生物量之后用作适口剂。才艮据又一个实施方式，所述适口因子为随时可用的液体形式。作为另一种选择，它可以作为在制备浓缩的发酵的适口因子中的中间产品。在这种情况下，所述具有减少的含水率的浓缩的适口因子，可以为液体形式或脱水形式。"浓缩的"应理解为是指通过具有上述H、FP、MG、S和C含量的适口因子的浓缩而获得的适口因子。4艮明显，由于浓缩，所述浓缩的适口因子具有比上述适口因子更高的FP、MG、S和C含量，同时具有更低的含水率。根据一个实施方式，本发明的适口因子被涂敷到动物饲料上。作为另一种选择，所述适口因子被添加到动物祠料中。总的来说，即"加入，，或"使用，，适口因子。"加入，，或"使用"适口因子包括"涂敷所述因子"，即将其加到饲料的表面上，例如通过喷雾或涂层；"添加所述因子，，，即，将其加到主体中，例如通过浸渍或混合。此处"动物饲料"指一种或多种用于动物的食物。其可以是固体物质(例如炸丸子(croquettes)、液体(例如肉汤、饮料)、或多或少含水的中间产品(如汤、半流质食物、颗粒料、酱(pat6s)等)。作为相关的功能，其也可以是在一餐中，甚或在例如一天或更长时间的时间阶段内摄入的全部食物(没有区别)的食物定量或膳食。术语"用于动物的"或"动物"，应采用涉及所有类型动物的最广义的含义。根据本发明的适口因子，它们所要加入的动物飼料，优选为宠物制备，例如狗和猫，特别优选狗。然而，本发明的目的同样涉及家养的或驯服的或繁殖的任何动物，例如鸟、兔子、啮齿动物、鱼等。还可以是饲养的动物，如猪、家禽、牛、鱼、曱壳类动物等。根据另一个实施方式，根据本发明的适口因子与诸如动物和/或植物来源的其他适口因子联合使用。才艮据又一个实施方式，形成本发明目的的所述适口因子以约1~10wt%的比例使用，优选以约2~4wtM的比例使用。本发明的第二方面涉及一种浓缩的发酵的适口因子，可通过将如上所述的至少一种适口因子浓缩和/或脱水而获得。根据第三方面，本发明涉及一种要加入动物饲料中的适口因子组合物，其包括至少一种如上所述的适口因子。这样的组合物可以仅仅包括才艮据本发明的适口因子，或同样也包括一种或多种动物和/或植物来源的适口因子。在第四方面，本发明涉及一种制备前述适口因子的方法，所述方法至少包括下列步骤a)在约22~32。C下，在标准生长培养基中预培养至少一种酵母菌大约6~25小时；b)用所述预培养物以至少约lxl()S个细胞/毫升的量接种含有一种或多种氨基酸的发酵培养基；c)在约2032'C培养所述接种过的发酵培养基约12~72小时；d)终止发酵；和e)回收最终的发酵培养基，用作适口因子。才艮据具体实施方式，其中选择性地可能组合一个或多个特征-预培养步骤a)在大约3(TC进行-预培养步骤a)保持大约8~16小时；一培养步骤c)保持大约12~60小时，或大约12-55小时，或甚至约20~72小时，或更好为约30~50小时；-培养步骤c)在大约28°C~3(TC进行。具体来讲，所述预培养应持续至酵母菌的指数生长期完成。作为有利条件，用于预培养的标准生长培养基包括酵母和麦芽提取物，以及糖类例如葡萄糖。其可进一步包括蛋白胨和/或^f鼓量元素。例如，所述培养基可以是本领域专家已知的酵母麦芽培养基(YM)。才艮据一个实施方式，步骤b)中使用的发酵培养基包括大约210wt。/。，优选3~5wt%的一种或多种氨基酸。这些氨基酸优选为适于被酵母菌代谢的氨基酸。或者，所述发酵培养基中存在的这些氨基酸中可以有适于酵母菌代谢的氨基酸和作为增补物加入的非代谢的氨基酸。如果必要的话，这些增补的氨基酸能够对所得到的因子的适口性有积极作用，例如改进其感官性质。不同氨基酸的比例可以改变，优选可代谢的氨基酸占优势。可代谢的氨基酸特别选自丙氨酸、苏氨酸、赖氨酸和含硫的氩基酸。这种或这些氨基酸优选选自含硫的氨基酸，例如蛋氨酸和半胱氨酸。优选使用蛋氨酸。才艮据另一个实施方式，步骤b)中使用的发酵培养基进一步包括大约多至10wt%，优选大约5~10wt。/。的脂肪类物质。根据又一个实施方式，步骤b)中使用的发酵培养基进一步包括酵母和麦芽提取物。根据优选的实施方式，用预培养物对发酵培养基的接种(步骤b)优选以逐渐增加的顺序，以至少等于大约5xl05、lx106、4xl06、6xl(^个细l包/毫升的比例进行，以达到所述发酵培养基中的起始生长培养的细胞量为至少大约5xl05、lx106、4xl06、6xl06个细胞/毫升。根据一个实施方式，所述发酵培养基的pH在步骤c)开始时被调节为大约4.5~6.5，优选约5.4-5.8。根据又一个实施方式，步骤a)的预培养在大约0.5-1.5vvm的通风条件下进行；和/或步骤c)的培养在大约0.02~0.40wm的通风条件下进行。根据又一个实施方式，步骤a)的预培养和/或步骤c)的培养在震荡下进行。才艮据本发明的方法目的，所述适口因子由生物量可以忽略的最终发酵培养基组成，或者由随后被灭活的含有可被保留的生物量的最终发酵培养基组成。所以，在步骤e)之前，所述发酵培养基可以用优选选自过滤、倾析、离心的分离技术除去所述生物量。作为另一种选择，包括生物量消除步骤的步骤d)~e)可以同时进行，优选通过灭菌过滤进行。或者，如果所述生物量没有除去，步骤d)可以通过例如酵母菌的热灭活来进行。本发明的第五方面涉及一种改进动物饲料适口性的方法，其中包括向该动物饲料中加入如前所述的至少一种适口因子或至少一种组合物。具体来讲，适口因子或组合物被单独加入到动物饲料中或与一种或多种其他适口因子联合加入到动物饲料中，其他适口因子如动物和/或植物来源的适口因子。形成本发明的目的所述适口因子或所述组合物优选以大约1~10wt。/。的比例使用，更优选以2~4wt。/。的比例使用。根据第六方面，本发明涉及至少一种酵母菌制备如上所述适口因子的用途。所述酵母菌优选选自耶罗威亚酵母属，酿酒酵母属，假丝酵母属，克鲁维酵母属，毕赤酵母属，德巴利酵母属，接合酵母属。更优选所述酵母菌选自耶罗威亚解脂酵母，哞酒酵母，易变假丝酵，产乳糖酶酵母，脆壁克鲁维酵母，木糖发酵酵母，汉逊氏德巴利酵母，鲁氏接合酵母。最优选使用耶罗威亚解脂酵母。根据第七方面，本发明涉及根据本发明的适口因子或组合物在改善动物飼料适口性方面的应用。本发明还公开了一种给动物的祠料，包括如上所述的至少一种适口因子或至少一种组合物。具体来说，所述适口因子或组合物被涂敷到饲料上和/或添加到飼料中，优选以约1~10wt。/。的比例加入，更优选以约2~4wt。/o的比例力口入。下列附图意为说明而不是限制本发明图1说明根据本发明的适口因子的总的制备方法的示例；图2说明在实验室中才艮据本发明的适口因子的制备方法的示例；(实施例1-4);图3说明以工业规才莫制备根据本发明的适口因子的方法的示例；(实施例图4说明根据本发明的适口因子的浓缩方法的示例(实施例7):图5说明添加在坏的饲料中的本发明的因子的适口性检测结果(实施例11)。A:池中篮子的分布；B:适口性检测结果。具体实施例方式下文中的实施例完全出于说明的目的，意图阐明本发明的实施方式和优点。实施例I—实验室规模制备的适口因子的实施例总的制备方法如图2所示。7—7,滋辨7;#罗成亚岸腐發#^炎^^奢疯凝存在7"^发'#第一步是在含有lOOmL具有下列成分的灭菌培养基的锥形瓶中对耶罗威亚解脂酵母进行预培养0.25g麦芽提取物(Muntons英国)，0.2g酵母提取物(Biospringer法国)，和1.5g葡萄糖(Merck德国)，并用软化水加至100ml。用在-80。C储存的，在添加了50。/。的30。/。甘油的标准YM培养基中得到的培养物在无菌条件下，1.8ml冻存管中接种。冻存管中的理论细胞数为6.5xl(f个细胞/亳升。在生长起始时用盐酸(Merck)调节pH为5.6，将锥形瓶放在Novotron摇床(INFORS,Bottmingen，瑞士)上，条件为30°C,140转/min。孵育16小时后停止预培养。同时，准备主要发酵步骤。为此，在5L的玻璃桶发酵罐(Prelude-GUERINSA法国)中含有28g的麦芽提取物(Muntons英国)，12g酵母提取物(Biospringer法国)，3.4g的75%的H3P04(Brenntag法国)，150g的蛋氨酸(Adisseo法国)，5ml的消泡剂(antimousse)(StruktolSB2020)和5L的余量为软化水，在121。C高压灭菌15分钟。高压后，在该发酵罐上安装出气冷凝器和2'C下运行的水回路，将所述培养基冷却至30。C。用发酵罐底部喷头根部的质量流量仪监控，将通风固定在O.l1/min。摇床振摇速度为500转/min，温度调节固定在30°C。带有所述预培养物(250ml)的发酵罐被无菌接种，这样发酵初始的细胞数为至少lx105个细胞/毫升。发酵进行48小时。密封发酵罐，然后将其在ll(TC高压灭活10分钟。冷却后，将发酵培养基从发酵罐中取出。然后搅拌下加入30g的50%山梨酸钾(Nutrinova德国)和47g的75%磷酸。产物的最终成分如下水分94.3%,蛋白质(Nx6.25)(凯氏定氮法测得)3.5%,水解法测得的MG:<1.0%,总可溶性糖0.62%，灰分1.64%,pH为2.9。/-2豸滋辨2;/A,眉亚席腐發^^炎^^f身凝存^7"W发'發W^必jr滋*本实施例在与实施例1-1相同的条件下进行，只是用于主要发酵的培养基的成分不同。所用培养基中包含22g的麦芽提取物(Muntons英国)，15g的酵母提取物(Biospringer法国)，3.1g的75%的H3P04(Brenntag法国)，150g的蛋氨酸(Adisseo法国)，5ml的消泡剂(StruktolSB2020)，180g的无水乳脂(Beuralia法国)和4L的余量为软化水。产品的最终成分如下水分90.3%,蛋白质(Nx6.25):3.4%,水解法测得的MG:4.5%,总可溶性糖0.7%,灰分1.7%。PH值为2.9。/-3《滋辦3.'学潘發^^炎^斧蛋4凝存4TW发',本实施例在与实施例l相同的条件下进行，只是预培养不同，使用的酵母是颜潘發#。所用培养基由0.3g的麦芽提取物(Muntons英国)，0.3g的酵母提取物(Biospringer法国)，0.5g的肉蛋白胨(Merck德国)和12.5g的葡萄糖(Merck德国)制成。所述预培养的pH值调为5.6，在30°C，140转/ml条件下进行13小时。主要发酵在与实施例1相同的条件下进行。最终产品的成分为水分94.9%，蛋白质(Nx6.25)(凯氏定氮法测得)3.8%，水解法测得的MG:<1.0%，总可溶性糖0.45%,灰分1.3%,pH为3。y一#《潜#發^^炎^和爭應疯邀存^7^1^:發鲁氏结合酵母在由0.3g的麦芽提取物(Muntons英国)，0.3g的酵母提取物(Biospringer法国)，0.5g的肉蛋白胨(Merck德国)和15g的葡萄糖(Merck，德国)制成的预培养基中培养。所述预培养的pH值调为5.6,在30。C，140转/ml条件下进行21小时。主要发酵在与实施例l相同的条件下进行，但是其发酵培养基的成分如下35g的麦芽提取物(Muntons英国)，18g的酵母提取物(Biospringer法国)，15.6g2M的NaOH(Merck德国)，413g的一水合半胱氨酸HC1(AMC—UK)，5ml的消泡剂(StruktolSB2020)和5L的余量为软化水。最终产品的成分为水分88.2%，蛋白质(Nx6.25)(凯氏定氮法测得)7.1%,水解法测得的MG:<1.0%,总可溶性糖0.83%，灰分4.3%,pH为2.9。II实施例5:以工业规模用界罗jt^麻腐發母在蛋氨酸存在下发酵制备的适口因子图3的略图说明了用于工业规4莫的制备方法的示例。第一步与实施例1相同。15ml的预培养物在无菌条件下取出，作为接种体加入到5L发酵罐(Prelude-GUERINSA法国)中的无菌培养基中，该培养基中含有15g的麦芽提取物(Muntons英国)，15g的酵母提取物(Biospringer法国)，50g的右旋糖一水合物(Tate&Lyle比利时)，12g的75%的H3P04(Brenntag法国)，5ml的消泡剂(StruktolSB2020)和5L的余量为软化水。温度为30。C，通风固定为5L/min，在700rpm下振摇。发酵持续12小时。在此期间内，准备60L容量的发酵耀(FermenteurSemi-AutomatiquePierreGuerinBiolafitteType"S"60/100L)。其中含有300g的麦芽提取物，180g的酵母提取物，152g的75%的磷酸，2.4kg的蛋氨酸，80g的消泡剂Struktol并补足软化水至总体积为60L。121。C下灭菌该培养基20分钟。冷却到30。C后，pH调至5.7，设定0.5巴的开放压力，通风为24L/min。出气冷凝器在2。C设定值启动。无菌条件下用蠕动泵(4L/h)直接从5L的发酵罐中取3升的接种体进行接种。发酵5小时后，通风降至6L/min。这样发酵至总时间为48小时，在该发酵罐中110。C灭活10分钟。一旦温度降至40。C以下，即加入360g的50%的山梨酸钾和542g的75%的磷酸。从该发酵罐中取出发酵培养基并室温储存在25kg冷却器中。产物的成分与实施例1的产物成分相似。III-特殊处理实施例-^辨6:发發者,^^參量W才法W说效处理实施例l得到的产品来清除其中的微生物，以得到很清澈半透明的产物。为做到这一点，在IOOL发酵罐的出口用法国PALL公司提供的K80型醋酸纤维素支持的过滤系统。过滤器的表面积为0.2m2。过滤速度为300L/h/m2。该过滤器上的保留物为0.2%的干物质。该实验产生一种液体产物，具有如下成分水分95.8%，蛋白质(Nx6.25)(凯氏定氮法测得)3.05%,水解法测得的MG:<1.0%,总可溶性糖0.41%和灰分0.75%。《滋辦7z遂脊遂4T这口厉子^辨务制备含有更浓的干物质以利于储存的适口产品。用36kg来自实施例1的产品进行在如图4所示的真空浓缩法。浓缩器为AURIOL浓缩器，容量为50L，20L的可用容量(连续进料)。双层封套的温度固定于40°C,产品温度35。C。冷却到l(TC的水网路保证蒸发的水的冷凝。真空度固定在最大值(35毫巴)。将产品以平均50L/h的速度手工进料。停止浓缩，得到浓缩的仍为液体的产物。得到4.5kg产物，其干燥物质含量为27.5%。pH值为3.3.///—3《滋辨S:應水^裙适口^子^賴务在Alfa-Laval型S18最初设备上制备来自实施例1的产物的4分末，其生产量为每小时蒸发20~40kg水。15kg的液体适口因子与6.4kg的啤酒酵母(Lorenzetti,巴西)用ultraturaxT50混合5分钟。干燥进行了47分钟，输入温度165。C，输出温度90。C,得到4.4kg粉末，水分含量为6%。IV根据本发明的实施例的因子的适口性检测/F-7,^辦9.'々资,法摔^f凌處^游匈/fi:W^辨用Forberg型RVC120涂布才几分批将实施例1的适口因子以液体喷雾的形式涂敷。25kg喂狗的标准炸丸子置于25。C的Forberg中。1.662kg加热到60。C的猪油向这些炸丸子上喷50秒。混合1分钟。然后1.108kg加热到30。C的适口因子通过喷雾被喷射60秒。再混合一分钟。涂敷好的炸丸子出料并包装运输到检测组织。在分批涂敷过程中完成编号，标于袋子上。产品A用来自实施例l的适口因子涂敷。产品B为对照样本(用基于肉的适口因子涂敷，来自法国SPF公司的super-premiumrange)。对照样本的涂敷条件与产品A所述的涂敷条件相同。根据对比试验方法，在法国组织PANELIS的专门的测试平台测定得到的饲料的适口性。一天内给36只狗2餐。同时*个动物两种饲料，标有A或B的每种饲料足以满足每个动物的营养需求，两顿饭间互换饲料的位置(右或左)以避免偏侧性选择。记录动物首先移向的第一种食物(首次选择)，并记录每种食物的最终消耗量。结果以相对A或B的消耗百分数。/。表示。用统计学方法处理结果(卡方检验分析首次选择，T检验(studenttest)分析消耗比)。只包括正常吃食的"有效的"狗。列于表1中的结果表明用来自实施例1的适口因子涂敷的饲料比对照样本被狗优先选用。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>(***)非常高的显著性(pO.Ol)/r—2-《滋辦添加封游弄爽匈存^^适口^f^^辨通过"包含法"在挤出过程中，在狗饲料的勤出标准或猫饲料的基础标准中使用来自实施例l的适口因子，使用量为基础祠料的总量的10%。用双螺杆corotativeEvolum53挤出机CLEXTRAL(法国)进行挤出。伺料A-CT为含有10%所述适口因子的猫饲料。其用加热到45。C的鸡油以6%在25°。Forberg型RVC120中涂敷。饲料A-CN为含有10%所述适口因子的狗祠料。在Forberg型RVC120中25。C下用加热到60。C的猪油以6%涂敷。T-CT和T-CN祠料分别为不含适口因子但是用上述脂肪涂敷的干饲料对照样品。在第二个系列中使用等量的这种饲料，只是这一次用30。C的基于动物蛋白质的适口因子Super-PremiumSPF在25°C的Forberg型RVC120中进行外部涂敷，条件与实施例9相同。第二系列的各批标记为祠料A-CT-E，饲料A-CN-E，饲料T-CT-E和饲料T-CN-E。在法国组织PANELIS中，在专业平台中根据对比试验方法测量得到的祠料的适口性。一天内给36只狗2餐，或两天内给40只猫2餐。这些检测在与实施例9相同的条件下进行分析。表2中列出的结果表明含有来自实施例1的适口因子的饲料被狗和猫优先选用。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>(***)非常高的显著性(pO.Ol)(**)高度显著(p<0.05)(*)显著(p<0.1)()不显著/F—3添》i^f匈;^,付适c7^f^^辨来自实施例1的适口因子以3%的含量添加到具有如下配方的市售饲料中;鱼粉40%，全麦25%，小麦饲料15%，大豆油粕9.5%,奸粉6%,鱼油2%，大豆卵磷脂1%，维生素混合物1%和矿物混合物0.5%。通过在Hobart压力机(德国)上压制得到的祠料(饲料A)具有同样的配方，但是没有适口因子(饲料B=对照)。在10001112的池中在来自鱼场(巴西)的白坏(P.vanamei)上进^f亍实-验。虾的平均重量为8g，密度为每平方米20只。这些虾用放在池中精确位点的4个篮子喂养。每个篮子分成两部分，其中分别喂A和B。图5A说明池中篮子的分布。每种饲料以每天生物量的4%放在篮子中，一天内分发两次。早晨和下午早些时候将伺料放到篮子中，在上午和下午晚些时候将篮子升起来定量还没有被虾吃掉的饲料。每天重复这些步骤，共进行两星期。每个检测天计算下列参数[(摄取的饲料A-摄取的饲料B)/摄取的祠料B"100。结果列于图5B。检测的2周完成时，含有适口因子的饲料A的消耗比没有适口因子的饲料B高23%。含有所述适口因子的饲料A显著优于饲料B(P<0.05)。V实施例12:适口因子组合物通过混合实施例1制备的产品和基于动物蛋白质的SuperPremium适口因子来制备适口因子。该混合物的比例列于表3。用UltraturaxT50^t混合机混合上述混合物。_<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>在Forberg型RVC120中，将混合物喷射到基础炸丸子上制备狗饲料。24.955kg狗的标准炸丸子置于25。C的Forberg中。用1.654kg加热到60。C的油向这些炸丸子上喷50秒。混合1分钟。然后831克加热到30。C的适口因子通过喷雾被喷射60秒。再混合一分钟。涂敷好的炸丸子出料并包装运输到检测组织。对照样本为相同条件下仅涂敷在所述混合物中使用的基于肉的来自SPF公司(法国)的super—premiumrange适口因子的祠料。在与实施例9相同的条件下，在法国PANELIS组织中检测饲料的适口性。列于表4的结果说明了由所述混合物构成的适口因子使得喷有该混合物的饲料比对照样本更力o可口。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>(***)非常高的显著性(pO.Ol)(**)高显著性(p<0.05)(*)显著(p<0.1)()不显著权利要求1、一种加入到动物饲料中的发酵的适口因子，其特征在于，所述适口因子包括培养至少一种酵母菌之后得到的发酵培养基，所述发酵培养基至少包含-水分(H)约80～96wt％；-蛋白质因子(FP)约1.5～10.0wt％；-脂肪类物质(MG)最多约10wt％；-糖类(S)约0.20～2.0wt％和-灰分(C)约0.3～8.0wt％，其中所述蛋白质因子(FP)不合动物来源的成分。2、根据权利要求1所述的适口因子，其特征在于所述蛋白质因子(FP)的成分选自蛋白质、肽、氨基酸及其组合。3、根据权利要求1或2所述的适口因子，其特征在于所述蛋白质因子(FP)包括至少约90wt。/。的一种或多种氨基酸，其选自丙氨酸、苏氨酸、赖氨酸、含硫的氨基酸，优选选自含硫的氨基酸。4、根据权利要求3所述的适口因子，其特征在于所述蛋白质因子(FP)包括至少约95wt。/。，优选至少约98wt。/。，更优选至少约99wt。/。的所述氨基酸。5、根据权利要求3或4所述的适口因子，其特征在于所述含;s克的氨基酸选自蛋氨酸和半胱氨酸，优选蛋氨酸。6、根据权利要求1~5中任一项所述的适口因子，其特征在于所述适口因子的pH在约1.6~3.5的范围内，优选在约2.63.2的范围内。7、才艮据权利要求1~6中任一项所述的适口因子，其特征在于所述酵母菌选自耶罗威亚酵母属，酿酒酵母属，假丝酵母属，克鲁维酵母属，毕赤酵母属，德巴利酵母属，接合酵母属。8、根据权利要求7所述的适口因子，其特征在于所述酵母菌选自耶罗威亚解脂酵母，啤酒酵母，易变假丝酵母，产乳糖酶酵母，脆壁克鲁维酵母，木糖发酵酵母，汉逊氏德巴利酵母，鲁氏接合酵母。9、根据权利要求8所述的适口因子，其特征在于所述酵母菌为耶罗威亚解脂酵母。10、根据权利要求1~9中任一项所述的适口因子，其特征在于所述适口因子为随时可用的、液体形式。11、根据权利要求1~10中任一项所述的适口因子，作为在制备浓缩的发酵的适口因子中的中间产品。12、根据权利要求1-11中任一项所述的适口因子，其特征在于所述适口因子被涂敷于和/或添加到所述动物饲料中。13、根据权利要求12所述的适口因子，其特征在于所述适口因子与一种或多种诸如动物和/或植物来源的适口因子的其他适口因子一起联合^f吏用。14、根据权利要求12或13所述的适口因子，其特征在于所述适口因子以约1~10wt。/。的比例，优选以约2~4wt。/。的比例^吏用。15、根据权利要求1~14中任一项所述的适口因子，其特征在于所述动物祠料为宠物祠料。16、一种浓缩的发酵的适口因子，其通过将根据权利要求1~15中任一项所述的至少一种适口因子进行浓缩和/或脱水而获得。17、一种要加入动物祠料中的适口因子的组合物，其特征在于所述组合物包括至少一种根据权利要求1~16中任一项所述的适口因子。18、一种制备根据权利要求1~16中任一项所述的适口因子的方法，其至少包括下列步骤a)在约2232。C下，在标准生长培养基中预培养至少一种酵母菌约6~25小时；b)用所述预培养物以至少约1x105个细胞/毫升的量接种含有一种或多种氨基酸的发酵培养基；c)在约2032。C下，培养所述接种过的发酵培养基约12~72小时；d)终止发酵；和e)回收最终有用的发酵培养基作为适口因子。19、根据权利要求18所述的方法，其特征在于步骤b)中使用的所述发酵培养基包括约210wt。/。，优选约35wt0/。的一种或多种氨基酸。20、根据权利要求18或19所述的方法，其特征在于所述氨基酸选自丙氨酸、苏氨酸、赖氨酸、含硫的M酸，优选选自含硫的氨基酸。21、根据权利要求18-20中任一项所述的方法，其特征在于步骤d)通过酵母菌的热灭活来终止发酵。22、根据权利要求18-21中任一项所述的方法，其特征在于在步骤e)之前，所述发酵培养基被除去生物量。23、根据权利要求22所述的方法，其特征在于步骤d)~e)同时进行，优选通过灭菌过滤进行。24、一种改善动物飼料适口性的方法，包括在所述动物铜料中加入至少一种根据权利要求1~16中任一项所述的适口因子，或至少一种根据权利要求17所述的组合物。25、至少一种酵母菌在制^^艮据权利要求1-16中任一项所述的适口因子中的应用。26、根据权利要求25所述的应用，其特征在于所述酵母菌为耶罗威亚解脂酵母。全文摘要本发明公开了用于动物饲料的适口因子。本发明具体涉及借助酵母发酵获得的不含有动物来源的蛋白质成分的用于动物饲养的一种适口因子，其至少包括水分(H)约80～96wt％；蛋白质因子(FP)约1.5～10.0wt％；脂肪类物质(MG)最多约10wt％；糖类(S)约0.20～2.0wt％；和灰分(C)约0.3～8.0wt％。文档编号A23K1/18GK101242743SQ200680029372公开日2008年8月13日申请日期2006年7月20日优先权日2005年8月9日发明者伊莎贝尔·吉耶,奥雷莉·德·拉图尔德,雷米·蒂里奥申请人:专业宠物食品