专利名称：：花绒坚甲幼虫人工饲料的制作方法
技术领域：
：本
发明内容属于林业害虫的生物防治
技术领域：
，涉及一种能满足天牛害虫特别是光肩星天牛和松墨天牛的天敌——花绒坚甲(花绒寄甲)2龄及以上幼虫生长发育需要的人工饲料。技术背景天牛LonghornbeetLe古称蝤蛴，俗称锯树郎，是一种危害我国杨、柳、榆等树种的毁灭性害虫，天牛种群中的光肩星天牛是我国北方地区林木的灾害性蛀干害虫，松墨天牛是我国南方松林传播松材线虫的蛀干害虫。由于天牛一生中的卵、幼虫、蛹都生活在树体内，不易受气候和人为活动等外界因素影响，因此防治难度很大。花绒坚甲Fairmaire亦称花绒寄甲、花绒穴甲、木蜂坚甲和缢翅坚甲等，属鞘翅目坚甲科昆虫，分布于经度105135、讳度3040的范围内，为我国和日本所特有，自然条件下花绒坚甲种群呈点状分布，扩散能力弱。花绒坚甲是目前控制光肩星天牛和松墨天牛最有价值的天敌昆虫，通过人工大量繁殖和释放，可以控制上述天牛对林木的危害。现有技术中，花绒坚甲的繁殖主要借助于天牛幼虫，而天牛幼虫较难获得。另外，近年来，本领域技术人员也相继开发出一些花绒坚甲幼虫的人工饲料，如王卫东等报道的用蚕蛹粉、干燥酵母、安息香酸盐、山梨酸、丙酸、墨鱼油(大豆油)等配成花绒坚甲幼虫人工饲料，其幼虫羽化率为65.7%;Tabata.K等报道用蚕蛹粉、干酵母、甲基-异-安息香酸、蛋白胨等配制的人工幼虫饲料，其成虫羽化率为6.7%，而先用松墨天牛幼虫词养，再用人工词料饲养的羽化率也仅为方法成功率还较低，这些都在很大程度上限制了花绒坚甲的人工繁殖和利用。
发明内容本发明的目的在于对现有技术存在的问题加以解决,进而提供一种可显著提高花绒坚甲2龄及以上幼虫人工繁殖和利用效果的花绒坚甲幼虫人工饲料。本发明的另一目的在于提供一种上述花绒坚甲幼虫人工饲料的制备及使用方法。为了提高花绒坚甲2龄以上幼虫的羽化率，解决其大量人工饲养问题,本发明参照花绒坚甲寄主即天牛幼虫体内的氨基酸营养成分配制了花绒坚甲幼虫的人工词料。该词料的配方组成是在每lOOmL词料中含有基本培养液1525mL,50%天牛幼虫提取液1525mL，10%酵母粉溶液110mL，50%麦芽提取液110mL，鲜牛奶1020mL，10%蛋白胨溶液110mL，鸡蛋黄515mL，新牛血清1020mL，氯霉素0.050.15g，维生素E110mg，水余量，其中，每lOOmL的基本培养液由水和下列物质配制构成丙氨酸620630mg,精氨酸580590mg，天门冬氨酸10001010mg，谷氨酸16101620mg，组氨酸310320mg,异亮氨酸540550mg,亮氨酸860870mg，赖氨酸640650mg，蛋氨酸210220mg，苯丙氨酸530540mg，脯氨酸745755mg，丝氨酸550560mg，甘氨酸520530mg，胱氨酸90100mg，苏氨酸510520mg，酪氨酸910920mg,缬氨酸740750mg,葡萄糖9951005mg，蔗糖9951005mg，果糖195205mg,生物素0.010.10mg，氯化胆碱195205mg，维生素Bi20.010.05mg,叶酸0.050.15mg，肌醇1015mg，烟酸l10mg，泛酸转15mg，维生素Be0.100.50mg,核黄素0.501.50mg，硫胺素0.010.05mg,氯化钠745755mg，氯化钾515mg,氯化钙1525mg，碳酸氢钠1525mg，苹果酸6070mg，a-酮戊二酸3040mg，琥珀酸110mg，延胡羧酸56mg。本发明所述花绒坚甲幼虫人工饲料可通过以下的制备过程获取a).按组分配比量值取饲料方中的丙氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、胱氨酸、苏氨酸、酪氨酸、缬氨酸、葡萄糖、蔗糖、果糖、生物素、氯化胆碱、维生素B12、叶酸、肌醇、烟酸、泛酸钙、维生素Be、核黄素、硫胺素、氯化钠、氯化钾、氯化钙、碳酸氢钠、苹果酸、a-酮戊二酸、琥珀酸、延胡羧酸和水配制成足量基本培养液；(2).将天牛幼虫去皮后在60'C烘箱中烘干，研磨成粉，加蒸馏水配制成50%天牛幼虫提取液；(3).将萌发3天的芽长约1cm的小麦种子称量后匀浆,加入等质量的水，通过定性滤纸过滤后获得50%麦芽提取液；(4).将基本培养液和组方中的50%天牛幼虫提取液、10%酵母粉溶液、50%麦芽提取液、鲜牛奶、10%蛋白胨溶液、鸡蛋黄和新牛血清充分混合，然后加入氯霉素和维生素E，用水补足余量，配制成100mL的花绒坚甲幼虫饲料。本发明的饲养方法是用塑料泡沫制作适宜的人工养虫盒，将脱脂棉攒成0.5cm0.8cm的小球，吸收上述人工饲料达到饱和，覆盖上词料包膜后，再用昆虫针将2龄花绒坚甲幼虫挑放到饲料包膜上,从而完成昆虫在此词料上的接种,然后根据花绒坚甲幼虫的取食情况及时添加饲料，直至花绒坚甲幼虫结茧、化蛹；然后收集所得到的虫茧，培养至羽化。与现有技术相比，本发明具有配方合理、制备及操作方便易行、对花绒坚甲幼虫繁殖饲养效果好等优点。经设计者所做的饲养实验观察，用本发明的人工饲料饲养花绒坚甲2龄幼虫时初始体长为0.451土0.051mm，幼虫平均取食时间为9.500±0.548d,老熟幼虫体长为9.642土0.732mm,老熟幼虫的结茧率为100%,花绒坚甲子代成虫的羽化率为95%100%,大大高于现有同类产品的羽化率；经结茧、化蛹全过程，在室内成功培养出了花绒坚甲子代成虫。附图是本发明的花绒坚甲幼虫人工饲料配制路线图。具体实施方式组方实施例对天牛幼虫虫体氨基酸组分的分析结果如表1表1天牛幼虫虫体氨基酸组分分析结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>根据上述的分析结果,本发明的一个具体实施例中基本培养液的物质组方如表2。表2基本培养液配方化学成分(mg/100niL)化学成分(mg/100mL)氨基酸维生素丙氨酸(ALa.)624.40生物素0.06精氨酸(Arg.)585.20氯化胆碱200.00天门冬氨酸(A印.)1002.40维生素B120.02谷氨酸(GLu.)1614.40叶酸0.10组氨酸(His.)318.00肌醇15.00异亮氨酸(ILe.)542.80烟酸5.00亮氨酸(Leu.)866.80泛酸钙2.00赖氨酸(Lys.)646.80维生素B60.30蛋氨酸(Met.)214.00核黄素1.00苯丙氨酸(Phe.)533.60硫胺素0.02脯氨酸(Pro.)750.00丝氨酸(Ser.)554.00氯化钠750.00甘氨酸(GLy.)528.80氯化钾10.00胱氨酸(Cys.)94.80氯化钙20.00苏氨酸(Thr.)517.60碳酸氢钠20.00酪氨酸(Tyr.)912,80有机酸缬氨酸(VaL.)744.40苹果酸67.0糖类a-酮戊—酸37.0葡萄糖1，000琥珀酸6.0蔗糖1，000延胡羧酸5.5果糖200准确称取上述物质，混合后用蒸馏水定容配制成配制成基本培养液lOOmL;取上述基本培养液20mL，再加入50%天牛幼虫提取液20mL、1(^酵母粉溶液6mL、麦芽提取液6mL、鲜牛奶16mL、10%蛋白胨溶液6mL、新鲜鸡蛋黄10mL和新牛血清16mL充分混合溶解；然后加入0.lg氯霉素和5mg维生素E，最终配制成100mL的花绒坚甲幼虫饲料。将塑料泡沫做成3.5cmX3.5cmX2cm的长方体，在其上挖出一个直径为1.5cm小洞，制成人工养虫盒。将脱脂棉攒成直径约为0.5an0.8cm的小球,用吸管将词料滴入棉花球中，直到棉花球达到饱和，覆盖上饲料包膜后，当接种到天牛幼虫上的花绒坚甲初孵幼虫发育到2龄(体长平均0.451±0.051)时，将其转到上述吸满饲料的棉球上饲养，在25'C条件下培养观察，每日统计花绒坚甲的发育情况，并及时更换吸有词料的棉花球，直至花绒坚甲幼虫结茧、化蛹；然后收集所得到的虫茧，培养至羽化。室内词养实验表明，用该人工饲料词养花绒坚甲二龄幼虫的初始体长为0.451±0.051，花絨坚甲幼虫平均取食时间为9.500±0.548天,老熟幼虫体长为9.642土0.732。经结茧、化蛹的过程,在室内成功培养出花绒坚甲子代成虫，老熟幼虫的结茧率为100%，花绒坚甲子代成虫的羽化率为21.11%。权利要求1、一种能够满足花绒坚甲幼虫生长发育需要的人工饲料，其特征是在每100mL饲料中含有基本培养液15～25mL，50％天牛幼虫提取液15～25mL，10％酵母粉溶液1～10mL，50％麦芽提取液1～10mL，鲜牛奶10～20mL，10％蛋白胨溶液1～10mL，鸡蛋黄5～15mL，新牛血清10～20mL，氯霉素0.05～0.15g，维生素E1～10mg，水余量，其中，每100mL的基本培养液由水和下列物质配制构成丙氨酸620～630mg，精氨酸580～590mg，天门冬氨酸1000～1010mg，谷氨酸1610～1620mg，组氨酸310～320mg，异亮氨酸540～550mg，亮氨酸860～870mg，赖氨酸640～650mg，蛋氨酸210～220mg，苯丙氨酸530～540mg，脯氨酸745～755mg，丝氨酸550～560mg，甘氨酸520～530mg，胱氨酸90～100mg，苏氨酸510～520mg，酪氨酸910～920mg，缬氨酸740～750mg，葡萄糖995～1005mg，蔗糖995～1005mg，果糖195～205mg，生物素0.01～0.10mg，氯化胆碱195～205mg，维生素B120.01～0.05mg，叶酸0.05～0.15mg，肌醇10～15mg，烟酸1～10mg，泛酸钙1～5mg，维生素B60.10～0.50mg，核黄素0.50～1.50mg，硫胺素0.01～0.05mg，氯化钠745～755mg，氯化钾5～15mg，氯化钙15～25mg，碳酸氢钠15～25mg，苹果酸60～70mg，α-酮戊二酸30～40mg，琥珀酸1～10mg，延胡羧酸5～6mg。2、一种制备权利要求1所述花绒坚甲幼虫人工饲料的方法，其特征在于包括以下的工艺步骤2.1按组分配比量值取饲料方中的丙氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、胱氨酸、苏氨酸、酪氨酸、缬氨酸、葡萄糖、蔗糖、果糖、生物素、氯化胆碱、维生素B12、叶酸、肌醇、烟鲜牛奶鸡蛋黄515mL，1020mL,1096蛋白胨溶液l10mL，新牛血清1020mL,酸、泛酸钙、维生素B6、核黄素、硫胺素、氯化钠、氯化钾、氯化钙、碳酸氢钠、苹果酸、a-酮戊二酸、琥珀酸、延胡羧酸和水配制成足量基本培养液；2.2将天牛幼虫去皮后在60'C烘箱中烘干，研磨成粉，加蒸馏水配制成50%天牛幼虫提取液；2.3将萌发3天的芽长约1an的小麦种子称量后匀浆，加入等质量的水，通过定性滤纸过滤后获得50%麦芽提取液；2.4将基本培养液和组方中的50%天牛幼虫提取液、10%酵母粉溶液、50%麦芽提取液、鲜牛奶、10%蛋白胨溶液、鸡蛋黄和新牛血清充分混合，然后加入氯霉素和维生素E，用水补足余量，配制成lOOmL的花绒坚甲幼虫饲料。3、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于包括以下的工艺步骤取丙氨酸624.20mg、精氨酸585.20mg、天门冬氨酸1002.40mg、谷氨1614.40mg、组氨酸318.00mg、异亮氨酸542.80mg、亮氨酸866.80mg、赖氨酸646.80mg、蛋氨酸214.OOmg、苯丙氨酸533.60mg、脯氨酸750.OOmg、丝氨酸554.OOmg、甘氨酸528.80mg、胱氨酸94.80mg、苏氨酸517.60mg、酪氨酸912.80mg、缬氨酸744.40mg、葡萄糖1000.OOmg、蔗糖1000.OOmg、果糖200.OOmg、生物素0.06mg、氯化胆碱200.OOmg、维生素Bi20.02mg、叶酸0.10mg、肌醇15.OOmg、烟酸5.Omg、泛酸钙2.OOmg、维生素Be0.30mg、核黄素1.OOmg、硫胺素0.02mg、氯化钠750.OOmg、氯化钾10.OOmg、氯化钙20.OOmg、碳酸氢钠20.OOmg、苹果酸67.OOmg、a-酮戊二酸37.OOmg、琥珀酸6.OOmg、延胡羧酸5.50mg和水配制成基本培养液100mL;取上述基本培养液20mL,再加入50%天牛幼虫提取液20mL、10%酵母粉溶液6mL、麦芽提取液6mL、鲜牛奶16mL、10%蛋白胨溶液6mL、新鲜鸡蛋黄lOmL和新牛血清16mL充分混合；然后加入0.lg氯霉素和5mg维生素E，配制成lOOmL的花绒坚甲幼虫饲料。全文摘要本发明涉及一种能满足天牛害虫有效天敌——花绒坚甲2龄及以上幼虫生长发育需要的人工饲料，由丙氨酸、精氨酸、天门冬氨酸等多种氨基酸以及葡萄糖、蔗糖、生物素、氯化胆碱、维生素、核黄素、氯化钠、苹果酸、α-酮戊二酸、延胡羧酸、天牛幼虫提取液、酵母粉溶液、麦芽提取液、鲜牛奶、蛋白胨、鸡蛋黄、新牛血清、氯霉素等物质配制而成，室内饲养实验表明，用饲料饲养花绒坚甲，平均生长历期为9.500±0.548d，老熟幼虫体长为9.642±0.732mm，能够正常结茧、化蛹，羽化率为95％～100％。文档编号A23K1/18GK101543265SQ20081001783公开日2009年9月30日申请日期2008年3月28日优先权日2008年3月28日发明者梅尚,俊崔,李孟楼申请人:李孟楼;尚梅;崔俊