专利名称：：一种器官保存液及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及医学、具体涉及一种用于人体或动物器官、组织或细胞的保存液，特别是一种用于人体或动物器官的保存液。
背景技术：
：器官移植是20世纪人类医学科学的重大进展，自20世纪60年代开始在临床应用以来，移植医学得到了突飞猛进的发展。目前，全世界在肾脏、肝脏、心脏、胰腺和骨髓移植的领域的移植总数已超过70万例(次)，存活最长的器官移植受者已近半个世纪。器官移植己成为21世纪医学发展的主要方向之一，是治疗终末期器官衰竭有效的根治手段。然而，任何临床器官移植首先要有高质量的供体，这是器官移植成功的先决条件和根本保障，因此，器官的保存在此有着重要意义，它是器官移植学的基石。而器官保存的根本目的是最大限度减少缺血对离体器官造成的各种损伤，使离体器官保存有效的活力，以便完成运送、配型和手术，使移植器官在手术后迅速恢复功能。近十多年来，中国器官移植数量已跃居亚洲首位，但临床上除了肾脏保存外，肝、心和胰腺等器官的保存仍然依赖进口保存液。进口器官保存液价格昂贵，为进行器官移植的患者增添了繁重的经济负担。作为所有类型肾病发展的最后共同阶段，终末期肾病(ESRD)是严重威胁人类健康的疾病。据1994年200万城镇人口的统计结果，中国ESRD的发病率约为568/百万，患病者约60万，近年来病人数以10%以上的速度增长。中国肾移植工作的大规模开展始于上个世纪70年代末80年代初，其重要的推动力是高渗枸橼酸钾嘌呤(HCA)肾保存液的研制成功。该保存液可有效保存肾脏57小时。20多年来，该保存液在全国开展器官移植的医疗单位得到广泛应用。在肾移植领域发挥4了重要作用。HCA液处方组成(每1000ml)及主要技术参数如下K+为80mmoL、Na+为80mmoL、MgS04为41mmoL、枸橼酸盐为55mmoL、甘露醇为30.2mmoL、腺苷呤磷酸盐为0.38mmoL、pH值为7.14、渗透压为380mOsm/L。HCA肾保存液的主要特点有1、渗透压高，防止细胞水肿的作用较强；2、含有腺苷嘌呤，为细胞提供一定的能量底物3、含有硫酸镁，助于稳定细胞膜4、价格低廉，公众认同感较高。但是该保存液也有不足之处1、硫酸镁浓度较高，低温下易析出，沉淀于保存液及肾血管中造成组织伤害；2、不含有效的缓冲对，pH值不稳定，在长时间(24h以上)保存肾脏时不足以防止细胞酸化；3、含有较多生化制剂，纯度不够。因此，在临床实际应用中HCA液保存液肾脏达24小时以上时，移植术后肾脏的发生显著升高。1987年FolkertO.Belzer博士领导的美国WISCONSIN大学实验小组成功研制了一种低温器官保存液，即UW(UNIVERSITYOFWISCONSIN)器官保存液，它提高了单纯低温灌注法器官保存的效果，可保存胰或肾72小时，肝脏可保存达24小时。UW液的成份是羟乙基淀粉50g/L、乳酸(内酯)35.83g/L、磷酸二氢钾3.4g/L、硫酸镁(MgS(V7H20)1.23g/L、棉子糖17.83g/L、腺嘌呤核苷1.34g/L、别嘌呤醇0.136g/L、总谷胱甘肽0.922g/L、氢氧化钾5.61g/L、pH值为7.4、胰岛素40单位、青霉素G20万单位、地塞米松16mg。虽然UW液已在国际上日益广泛应用，但其配方液存在着如粘度偏高，因而降温速度慢；钾离子含量过高，使用不当会引起术中心跳骤停，而且价格非常昂贵，不适合普遍应用。
发明内容本发明要解决的技术问题在于提供一种使用安全、有效、质量可控，并且高渗、含有丰富的能量底物，价廉的器官保存液及其制备方法。本发明提供了一种器官保存液。5本发明的器官保存液由以下重量配比的成份组成(每1000ml)枸橼酸钠2.0g50.0g枸橼酸钾.0g50.0g硫酸镁0.1g8.0g精氨酸0.02g4.0g色氨酸0.05g5.0g盐酸川芎嗪0g6.0g渗透压调节剂.0g80.0gpH值缓冲对0.1g60.0g能量底物0.1g20.0g本发明的器官保存液的pH值为5.0~9.5、渗透压值为320420mOsm/L。本发明的另一目的是提供了上述器官保存液的制备方法，包括以下步骤1、浓配分别用适量的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、甘露醇和氢氧化钠，补加注射用水至总体积的80%，加入药用炭(总体积的0.05。/。w/v)，充分搅拌，脱炭至澄明液体；2、稀配向上述浓配液中加入配方量的盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45pm滤膜过滤；3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值待检测合格后，将药液经0.2nm滤膜过滤；4、灌封将药液上流水线进行灌封；5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌；设定灭菌条件115°C、30分钟或12rC、15分钟灭菌，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。本发明的器官保存液能够用于人体或动物器官的冷却、灌洗和保存，如肾脏，可有效保存人离体肾脏48小时，动物72小时，并且能够防止缺血再灌注损伤。本发明的器官保存液的特点是1、由于是细胞内液型(高钾低钠)保存液，与细胞内外离子浓度相似，保存期间细胞内外离子交换减少，能量消耗减少，有利于再灌注时迅速恢复跨膜阳离子梯度和细胞功能，最主要的是细胞内液型保存液的低Na+将明显减少Na+离子的内流，减少细胞内Na+离子的聚集，能阻止细胞水肿的发生。2、配方中所用原料易得，价格便宜。3、配方中添加了腺嘌呤核苷和色氨酸(L-色氨酸)作为能量(ATP)的底物，为再灌注损伤的修复和激活能量利用提供条件，为缺氧条件下的细胞提供足够的能量。4、配方中添加了盐酸川芎嗪，可清除氧自由基，抗脂质过氧化，提高SOD活性，抑制血小板聚集和活化以及维持TXA2/PGI2的平衡作用，因此具有突出的抗血再灌注损伤的作用。药理研究证明，盐酸川芎嗪还具有扩张小动脉改善微循环和脑血流，产生抗血栓形式和溶血栓的作用。同时还具有钙拮抗效应，能抑制离体细胞对转离子的摄入，避免了细胞内钙超载引起的细胞损伤。5、配方中添加了精氨酸(L-精氨酸)，精氨酸是体内NO的生成底物，在NO合成酶(NOS)及其辅助因子作用下，精氨酸N端胍基脱氨氧化成NO，该通路成为"L-精氨酸NO通路"。NO是一种脂溶性很强的小分子活性氮自由基，能自由通过细胞膜并减轻缺血再灌注损伤，并有效组织细胞凋亡。6、配方中降低了硫酸镁(MgS(V7H20)的浓度，减少其在低温条件下的析出。7、配方中添加了甘露醇用于调整渗透压，使溶液渗透压值维持在320420mOsm/L，可有效防止水肿。8、配方中添加了磷酸盐缓冲液对，使溶液pH值稳定在5.59.5之间，有利于防止细胞乏氧代谢下迅速酸化导致的细胞损失。9、本发明的器官保存液组分间无配伍禁忌，制备工艺简单，可以经受U5'C、30分钟或121'C、15分钟的高温灭菌，且质量稳定可控、使用方法简单。动物(犬)实验表明本发明的器官保存液可有效保存肾脏72小时，对肾脏的保存质量显著优于HCA液，并与UW液相当。具体实施方式-下面结合实施例对本发明作进一步详细说明，但应理解本发明保护的范围并非仅限于这些实施例的范围。实施例1配方枸橼酸钾6.2g枸橼酸钠4.7g硫酸镁1.18g磷酸二氢钠2.3g腺嘌呤核苷0.6g精氨酸0.24g色氨酸0.36g甘露醇25.0g盐酸川芎嗪_O麓g注射用水加至1000ml制备方法1、浓配用500ml的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、甘露醇和氢氧化钠，补加注射用水至总体积的80%,加入药用炭0.5g，充分搅拌，脱炭至澄明液体。2、稀配向上述浓配液中加入盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45|am滤膜过滤。3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值pH值为7.65、渗透压值为370mOsm/L。将药液经0.2nm滤膜过滤。4、灌封将药液上流水线进行灌封。5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌。设定灭菌条件115°C、30分钟，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。实施例2枸橼酸钾6.2g枸橼酸钠4.7g硫酸镁1.18g磷酸二氢钠2.3g腺嘌呤核苷0.6g精氨酸0.24g色氨酸0.36g山梨醇25.0g盐酸川芎嗪0.002g注射用水加至1000ml制备方法1、浓配用500ml的的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、山梨醇和氢氧化钠，补加注射用水至总体积的80%,加入药用炭0.5g，充分搅拌，脱炭至澄明液体。2、稀配向上述浓配液中加入盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45pm滤膜过滤。3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值pH值为7.61、渗透压值为366mOsm/L。将药液经0.2|_im滤膜过滤。4、灌封将药液上流水线进行灌封。5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌。设定灭菌条件115°C、30分钟，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。9实施例3枸橼酸钾"g枸橼酸钠5.0g硫酸镁2.8g磷酸二氢钠4.2g腺嘌呤核苷l.Og精氨酸0.53g色氨酸0.49g甘露醇34.0g盐酸川芎嗪O扁g氢氧化钠0.9g注射用水加至1000ml制备方法1、浓配用500ml的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、甘露醇和氢氧化钠，补加注射用水至总体积的80%,加入药用炭0.5g，充分搅拌，脱炭至澄明液体。2、稀配向上述浓配液中加入盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45nm滤膜过滤。3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值pH值为7.89、渗透压值为377mOsm/L。将药液经0.2nm滤膜过滤。4、灌封将药液上流水线进行灌封。5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌。设定灭菌条件12rC、15分钟灭菌，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。实施例4枸橼酸钾3.5g枸橼酸钠5.0g硫酸镁2.8g磷酸二氢钠4.2g磷酸氢二钠2.1g腺嘌呤核苷l.Og精氨酸0.53g色氨酸0.49g甘露醇34.0g盐酸川芎嗪O細g注射用水加至1000ml制备方法1、浓配用500ml的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸和甘露醇，补加注射用水至总体积的80%,加入药用炭0.5g，充分搅拌，脱炭至澄明液体。2、稀配向上述浓配液中加入盐酸川粤嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45nm滤膜过滤。3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值pH值为7.72、渗透压值为373mOsm/L。将药液经0.2pm滤膜过滤。4、灌封将药液上流水线进行灌封。5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌。设定灭菌条件121°C、15分钟灭菌，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。11实施例5枸橼酸钾5.1g枸橼酸钠4.4g硫酸镁1.7g磷酸二氢钾3.5g磷酸氢二钾2.0g腺嘌呤核苷1.6g精氨酸0.21g色氨酸0.64g甘露醇28.0g盐酸川芎嗪0.013g注射用水加至訓Oml制备方法1、浓配用500ml的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸和甘露醇，补加注射用水至总体积的80%,加入药用炭0.5g，充分搅拌，脱炭至澄明液体。2、稀配向上述浓配液中加入盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45pm滤膜过滤。3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值pH值为7.79、渗透压值为368mOsm/L。将药液经0.2pm滤膜过滤。4、灌封将药液上流水线进行灌封。5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌。设定灭菌条件115°C、30分钟灭菌，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。实施例6枸橼酸钾9.6g枸橼酸钠7.3g硫酸镁1.9g磷酸二氢钾7.腺嘌呤核苷0.5g精氨酸0.37g色氨酸0.82甘露醇30.0g盐酸川芎嗪O.Olg氢氧化钠1.5g注射用水加至1000ml制备方法1、浓配用500ml的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、甘露醇和氢氧化钠，补加注射用水至总体积的80%左右，加入药用炭0.5g，充分搅拌，脱炭至澄明液体。2、稀配向上述浓配液中加入盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45pm滤膜过滤。3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值pH值为8.12、渗透压值为386mOsm/L。将药液经0.2pm滤膜过滤。4、灌封将药液上流水线进行灌封。5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌。设定灭菌条件115°C、30分钟灭菌，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。实施例7枸橼酸钾9.6g枸橼酸钠7.3g硫酸镁1.9g磷酸二氢钾6.3g磷酸氢二钠2.5g腺嘌呤核苷0.5g精氨酸0.37g色氨酸0.82甘露醇30.0g盐酸川芎嗪O.Olg注射用水加至1000ml制备方法1、浓配用500ml的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸和甘露醇，补加注射用水至总体积的80%左右，加入药用炭0.5g，充分搅拌，脱炭至澄明液体。2、稀配向上述浓配液中加入盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45pm滤膜过滤。3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值pH值为7.87、渗透压值为365mOsm/L。将药液经0.2pm滤膜过滤。4、灌封将药液上流水线进行灌封。5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌。设定灭菌条件115'C、30分钟灭菌，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。实施例8枸橼酸钾9.6g枸橼酸钠7.3g硫酸镁1,9g磷酸二氢钾6.3g磷酸氢二钠2.5g鸟嘌呤核苷0.5g精氨酸0.37g色氨酸0.82甘露醇30.0g盐酸川芎嗪O.Olg注射用水加至1000ml制备方法1、浓配用500ml的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸和甘露醇，补加注射用水至总体积的80%左右,加入药用炭0.5g，充分搅拌，脱炭至澄明液体。2、稀配向上述浓配液中加入盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45pm滤膜过滤。3、检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值pH值为7.83、渗透压值为362mOsm/L。将药液经0.2pm滤膜过滤。4、灌封将药液上流水线进行灌封。5、灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌。设定灭菌条件U5。C、30分钟灭菌，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。15动物试验以实施例1制备的器官保存液(以下称"本器官保存液")为例，对其在肾移植手术中的应用进行了研究。采用单纯灌洗冷却犬肾自体移植模型，以HCA液和UW液为对照，将犬分成A(HCA液48h)、B(实施例1提供的器官保存液，以下称"本器官保存液"，48h)、C(UW液48h)、D(HCA液72h)、E(本器官保存液72h)、F(UW液72h)等6组，每组10只。动物模型的建立选取1317kg雌性杂种犬，术前12h禁食，以3%戊巴比妥30mg/kg腹腔内注射麻醉。麻醉成功后，取腹正中切口，自剑突向下长约12cm，切开进腹。游离左肾及肾动静脉、输尿管，切断输尿管，长约8cm，在肾静脉和肾动脉根部分别将其切断。立即取出肾脏置于各组指定的保存液(0°C)200mL经肾动脉灌注肾脏，直至肾脏呈苍白色，将肾脏连同500mL指定保存液置于肾袋中，在04'C条件下储存。分别结扎实验动物肾动静脉及输尿管残端，关腹。术后立即给序头孢曲松钠lg静脉滴注。72h后，同一实验犬按同样方法麻醉，按原切口打开腹腔，并向下延长至耻骨上方，游离右侧髂外动静脉，取出肾脏，肾静脉与髂外静脉以7—0prelene血管吻合线端侧吻合，肾动脉与髂外动脉端端吻合，开放血流后彻底止血。切开膀胱，留置导尿管。输尿管内置F4.5之双J管，以5-0羊肠线与膀胱吻合。随后切开实验犬右肾，关腹，手术结束。术后予补液(每日10%葡萄糖500mL、平衡液500mL)及抗生素(头孢曲松钠lg)直至实验动物开始自行进食。术后检测移植前后肾功能指标变化，并于第3日抽静脉血测定血清肌酐值。术后观察期60天，达到60天的动物视为长期存活。实验结果如下1、肾皮质低温保存期间细胞凋亡检测结果在保存当天本器官保存液组和HCA组、UW液组细胞凋亡处于相似的低水平，凋亡指数无明显差异。随保存时间的延长，肾皮质细胞凋亡的发生率增加，同一时间点不同保存液组凋亡率存在差别，在低温保存的第l、2、3天HCA液组显著高于本器官保16存液(户<0.05)。而低温保存各时点，UW液组与本器官保存液组细胞凋亡指数变化相似，两组差别不显著(PX).05)。表1低温保存期间不同保存液对肾皮质细胞凋的影响(!1=10)分组保存时间(小时)0244872HCA液2.4±0.412.U1.3*19.2±2.4*22.3±2.4'uw液2.2±0.66.1±0.711.7±1.2915.7±3.2本器官保存液2.7±0.57.6±1.212.8±1.716.2±2.5注*表示与本器官保存液组相比差异显著，PO.05;UW液组与本器官保存液组无明显差别，P>0.05.2、线粒体呼吸控制率(RCR)测定结果随着低温保存时间延长，肾皮质线粒体呼吸控制率随保存时间的延长而下降。低温保存的各时点，本器官保存液组肾皮质RCR明显高于HCA组，两组间线粒体功能差异显著(PO.05);本器官保存液组肾皮质保存当天RCR能够达到3.08士0.41，接近正常值，而HCA液组RCR已经下降到3.0以下保存期间本器官保存液组RCR逐渐下降，三天后降为2.68±0.27，而HCA液组RCR值下降的比较快，三天后仅为2.06±0.32，两组间RCR值在各时点都有显著差异，而本器官保存液组与UW液组在各时点无明显差别。3、犬存活时间表2肾移植后犬存活时间组别时间(d)A71369118712614B13176060606060606060C14606060606060606060D9815771211898E16342260606060606060F19256060606060606060结果可见A组与B和C组有显著性差异、B组和C组无显著性差异；D组与E和F组有显著性差异、E组和F组无显著性差异；174、血清肌酐值测定结果:表3肾移植前后各组犬血清肌酐值(nmol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注表中数据为X±S,S-N-K方差分析显示A组与B和C组有显著性差异、B组和C组无显著性差异；D组与E和F组有显著性差异、E组和F组无显著性差异。上述各实施例通过例举的一个具体配比实例，并以此制备的器官保存液在犬的肾移植过程中与HCA液和UW液进行对比，结果表明本器官保存液对肾脏保存方面明显优于HCA液，与UW液保存效果无明显差别。但上述实例并不是对本发明的一种限制，具体实施时，所述的器官保存液可以替代UW液应用于包括肾脏、肝脏、胰腺、心脏等在内的多种重要脏器移植手术中的脏器保存。权利要求1、一种器官保存液，其特征在于该器官保存液由下列重量配比的成分组成每1000ml枸橼酸钠2.0g～50.0g枸橼酸钾3.0g～50.0g硫酸镁0.1g～8.0g精氨酸0.02g～4.0g色氨酸0.05g～5.0g盐酸川芎嗪0g～6.0g渗透压调节剂5.0g～80.0gpH值缓冲对0.1g～60.0g能量底物0.1g～20.0g。2、根据权利要求1所述的器官保存液，其特征在于所述的渗透压调节剂选自甘露醇或山梨醇；优选甘露醇。3、根据权利要求1所述的器官保存液，其特征在于所述的pH值缓冲对选自磷酸二氢钠/磷酸氢二钠、磷酸二氢钾/磷酸氢二钾、磷酸二氢钾/氢氧化钠、磷酸二氢钠/氢氧化钠或磷酸氢二钠/磷酸二氢钾；优选磷酸二氢钠/氢氧化钠，其中每1000ml含磷酸二氢钠的量为0.5g60.0g、氢氧化钠的量为0.05g50.0g。4、根据权利要求1所述的器官保存液，其特征在于所述的能量底物选自腺嘌呤核苷或鸟嘌呤核苷，优选腺嘌吟核苷。5、根据权利要求1所述的器官保存液，其特征在于所述器官保存液的pH值为5.09.5;渗透压值为320420mOsm/L。6、一种如权利要求1所述的器官保存液的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤:(1)浓配分别用注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、甘露醇和氢氧化钠,补加注射用水至总体积的80%,加入总体积的0.05%W/V药用炭，充分搅拌，脱炭至澄明液体；(2)稀配向上述浓配液中加入盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45pm滤膜过滤；(3)检验步骤(2)稀配液的pH值及渗透压值，待检测合格后，将药液经0.2pm滤膜过滤；(4)灌封将检测合格后的药液进行灌封；(5)灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌，所述灭菌条件115'C、30分钟或12rC、15分钟灭菌，得到成品。全文摘要本发明涉及一种用于人体或动物器官、组织或细胞的保存液。本发明的器官保存液由枸橼酸钠、枸橼酸钾、硫酸镁、磷酸二氢钠、氢氧化钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、甘露醇和盐酸川芎嗪等成份组成。本发明的器官保存液能够用于人体或动物器官的冷却、灌洗和保存，可有效保存人离体肾脏48小时，动物72小时，并且能够防止缺血再灌注损伤，有较大的临床应用价值。文档编号A01N1/02GK101496512SQ20081003342公开日2009年8月5日申请日期2008年2月1日优先权日2008年2月1日发明者周庆武,朱有华,甘益民,标纪申请人:扬子江药业集团上海海尼药业有限公司