专利名称：一种防治密封组培瓶苗中蓟马的方法
技术领域：
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本发明涉及一种防治密封组培瓶苗中蓟马的方法，属于生物技术领域。
背景技术：
植物组织培养技术是指在无菌条件下，利用植物体的一部分(组织器官或细胞等)，接种在人工制造的培养基上，在人工控制的环境下，使离体植物组织、器官或细胞长成完整植株的技术。以植物组织培养技术为基础的植物快繁技术，是较为成熟，应用广泛，成效极大的一种现代生物技术。但是由于我国组培发展较快，组培室与外界隔离不严，常引起微型虫体侵入组培苗中，蓟马就是其中的一种。蓟马在大田作物生产过程中发生极为普遍，而在组培苗生产过程中较为少见。由于组培工厂的迅速发展，所处环境各异，组培室发生蓟马危害的情况越来越多。国外曾有因蓟马危害造成组培工厂化生产全军覆没的报道。我国目前有蓟马发生频率增多，危害加重的趋势，特别是在一些超过五年的老组培室更为常见。蓟马属缨翅目昆虫，成虫体长约1mm，成虫、若虫多在叶脉间用锉吸式口器锉食叶肉，吸其汁液。因其体形微小，不易察觉。它一年四季均可发生，春夏秋三季主要发生在露地作物上，冬季主要发生在温室大棚作物中。它雌性成虫主要是孤雌生殖，偶有二性生殖，喜欢温暖、干旱的天气，其适宜生长温度为23-28°C .
蓟马侵入培养瓶中危害瓶苗叶片及生长点，形成不规则绿色小黑斑，严重时斑点连成片，造成叶片干枯脱落，甚至造成瓶苗枯死，由于组培苗生长环境特殊，易形成较大虫口密度，同时通过组培苗转接，虫体易扩散到组培苗中，可短时间危害整个组培室，另外还因蓟马活动引起细菌、真菌污染。由于组培瓶苗中蓟马的防治不能与普通大田防治一样喷药，灭虫必须在无菌条件下进行，且整个组培室中的所有组培苗都要进行杀虫处理，以保证彻底清除虫体，因此防治技术上有一定的困难，专利申请号为201010620976. O的专利描述了一种防止组培蓟马污染的方法，其主要方法是1)在常规组培接种后培养容器盖好盖子，或培养容器塞好塞子；2)在盖子下边与培养容器接触处或培养容器口与塞子接触处涂抹或喷晒杀蓟马剂；3)在盖子下边与培养容器接触处或培养容器口与塞子接触处加封封口膜。但是该方法所用的杀虫剂杀虫的效率不高，只能够防蓟马，而不能彻底杀死蓟马。
发明内容
本发明的目的在于克服上述不足，提供一种简单彻底可以防治密封组培瓶苗中蓟马的方法。本发明的目的是这样实现的
一种防治密封组培瓶苗中蓟马的方法，所述方法包括以下步骤
(1)、选择适宜的杀虫剂 选用5%丁硫克百威乳油；
(2)、制备含杀虫剂的培养基在常规植物组培增殖、生根培养基配方中，仅增加有效成份5-10mg/L 丁硫克百威乳油到培养基中，再进行分装，每瓶倒入50ml的培养基，然后在高压灭菌锅中121°C条件下，灭菌18-20min，冷却凝固后备用；
(3)、无菌操作转接组培苗
在超净工作台内将组培室所有的组培苗按增殖、生根要求剪切整理，转接到制备的含杀虫剂的培养基中，按增殖、生根要求接种；
(4)、培养室培养瓶苗
接种后转入光照强度30001x、光照时间14-16小时、温度25±2°C下培养30-40天，蓟马大部分被杀死。为了确保万无一失，在第二次转接时，再用同样的方法处理一次，可彻底杀灭组培瓶苗中所有的蓟马。与现有技术相比，本发明的有益效果是
本发明一种防治密封组培瓶苗中蓟马的方法，在预防的基础上可以彻底杀死蓟马，杀虫效果好，另外对人体也没有危害。
具体实施例方式 本发明一种防治密封组培瓶苗中蓟马的方法，其工艺步骤如下
I、选择适宜的杀虫剂
由于组培瓶苗的特点和特殊环境，适宜的杀虫剂必须符合以下几点
一是用量要少；二是杀虫剂成分不能与培养基发生化学反应；三是具有触杀和内吸性；四是经高温高压灭菌不破坏杀虫性能；五是不影响组培苗的正常生长；六是对人及环境安全。经发明人三年的试验筛选，5%丁硫克百威乳油符合上述条件，且杀虫效果极好。2、制备含杀虫剂的培养基
在常规植物组培增殖、生根培养基配方中，仅增加有效成份5-10mg/L 丁硫克百威乳油到培养瓶中，在高压灭菌锅中121°C条件下，灭菌20-30min，然后冷却凝固后备用。3、无菌操作转接组培苗
在超净台内将组培室所有的组培苗按增殖、生根要求剪切整理，转接到制备的含杀虫剂的培养基中，按增殖、生根要求接种。4、培养室培养瓶苗
接种后转入光照强度30001x、光照时间14-16小时、温度25±2°C下培养30-40天，蓟马大部分被杀死。为了确保万无一失，在第二次转接时，再用同样的方法处理一次，可彻底杀死灭组培中所有的蓟马。
实施例以红叶石楠组培密封瓶苗中蓟马的防治为例
I、选用5%丁硫克百威乳油每瓶20ml装。2、配制含丁硫克百威杀虫剂的培养基。以IL增殖培养基为例在电饭煲内加入IL去离子水，再加入30g白糖和5g琼脂加热溶解，再加MS培养基母液，lmg/ml的6-BA lml、lmg/ml的IBA O. I ml进行煮沸,用ImolNAOH调pH值为6. O,再加入5%丁硫克百威0，2ml搅拌均匀，趁热分装每培养瓶50ml，盖好瓶盖，在高压灭菌锅中121°C灭菌20min，冷却凝固后备用。
3、无菌操作转接组培苗
在超净台内，将组培红叶石楠瓶苗用镊子夹出，放在超净台内的无菌纸上，剪去叶片，剪成I. 5-2cm长的茎芽，接种到含丁硫克百威杀虫剂的培养基中，每瓶接种5-6个芽，直至组培室所有的红叶石楠瓶苗全部转接完毕。
4、培养室培养瓶苗
接种完后转入光照强度30001x，每天光照16小时，温度27°C条件下，培养40-45天，每个芽增殖到2-3个I. 5-2. Ocm芽，蓟马被杀死，瓶苗恢复正常生长。为了确保万无一失，在第二次继代时再用上述同样的方法进行处理一次，可彻底杀灭组培室瓶苗中所有的蓟马，生产恢复正常。
权利要求
1. 一种防治密封组培瓶苗中蓟马的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤 (1)、选择适宜的杀虫剂 选用5%丁硫克百威乳油； (2)、制备含杀虫剂的培养基 在常规植物组培增殖、生根培养基配方中，仅增加有效成份5-10mg/L 丁硫克百威乳油到培养瓶中，在高压灭菌锅中121°C条件下，灭菌20-30min，然后冷却凝固后备用； (3)、无菌操作转接组培苗 在超净台内将组培室所有的组培苗通过剪切整理，转接到制备的含杀虫剂的培养基中，按增殖、生根要求接种； (4)、培养室培养瓶 苗 接种后转入光照强度30001x、光照时间14-16小时、温度25±2°C下培养30-40天，蓟马大部分被杀死；为了确保万无一失，在第二次转接时，再用同样的方法处理一次，可彻底杀死灭组培中所有的蓟马。
全文摘要
本发明涉及一种防治密封组培瓶苗中蓟马的方法，包括选择适宜的杀虫剂、制备含杀虫剂的培养基、无菌操作转接组培苗和培养室培养瓶苗几个步骤。本发明一种防治密封组培瓶苗中蓟马的方法，在预防的基础上可以彻底杀死蓟马，杀虫效果好，另外对人体也没有危害。
文档编号A01H4/00GK102771390SQ20121023524
公开日2012年11月14日 申请日期2012年7月9日 优先权日2012年7月9日
发明者刘唤英, 吴有光, 胡中义 申请人:江西省喜果绿化有限公司