专利名称：一种野生干巴菌生态扩繁方法
技术领域：
本发明属于野生食用菌根菌培植技术领域，进一步属于外生菌根菌仿生培植技术领域，具体涉及一种野生干巴菌生态扩繁方法。
背景技术：
干巴菌(Thelephota ganbajun Zang)属担子菌亚门层菌纲非裙菌目革菌科革菌属的大型真菌，其子实体丛生，呈珊瑚状多次分枝。野生干巴菌是云南特有的珍稀野生食用菌，分布于海拔600— 2300m的山林区域，尤以生长在滇中海拔1900— 2300m的云南松树林间的味道最佳，中国其他省及国外都无法生长，干巴菌每年产于6月至9月的雨季，由于其属于外生菌根菌，至今仍未实现人工栽培。科学研究记载，干巴菌含粗蛋白24. 15%，粗纤维8. 45%，总糖量3. 1%，IOOg含维生素Cl. IOmg,维生素A16. Omg, B族维生素I. 2mg;含有18种氨基酸和人体必需的8种氨基酸；从干巴菌中还发现一系列新的对联三苯类色素，具有高度抗氧化活性；干巴菌中含有的多种微量元素铁、钾、纳、磷、钙，特别是人体普遍缺乏的硒元素，其含量高达4603. 59Pg/100g，属于罕见的富硒珍贵野生菌，硒有抑制肿瘤细胞增殖和提高机体免疫功能。干巴菌营养丰富，香味独特，一直以来都处于供不应求状况。最近几年，野生干巴菌被过度采收，使干巴菌资源受到影响，产量逐年减少，价格连年攀升，每IOOOg售价甚至高达1200元。目前，也有较多干巴菌增产促繁与保育方面的研究，迄今现有技术中未见有野生干巴菌能生态扩繁的方法，因此，开发一种能增加产量，提高质量、修复自然环境的野生干巴菌生态扩繁方法是非常必要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种方法简便，能够利用自然环境人工干预培育野生干巴菌的生态扩繁方法。本发明的目的是这样实现的，包括选择有干巴菌的生长环境、通过挖沟、挖塘、铲草、牛犁、牛踏等造成菌丝自然侵染、采集子实体、纯化培养菌种、人工菌丝侵染扩繁，具体包括
A、选择干巴菌生长环境选择土壤pH值为4.5以上，有机质I. 20以上，光照度30(Γ800Lux，海拔150(Γ2300米，年均温13 15°C的林地环境；
B、菌丝自然侵染沿林地中树的滴水线开挖塘穴，或依林地山势沿等高线开挖梯级沟渠，牛犁、牛踏、铲草造成树根系创伤，以利于干巴菌菌丝侵染；
C、采集子实体经菌丝自然侵染后，罩上小棚，当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌索和纽结，形成干巴菌子实体，采集备用；
D、纯化培养选择新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体进行组织分离用于母种的试管种培养，通过母种的繁育，剔除有污染的试管，循环广3次至得到纯化母种，接入固体菌种培养基和液体培养基中培育出干巴菌菌种；
E、人工菌丝侵染扩繁在干巴菌生长较少甚至不长的林地挖沟、塘，在林地的枯松枝叶处，或在松树的干、树根处打洞，埋植、撒播菌种，形成人工菌丝浸染；
F、菌根苗培养选用f2年生的树苗，通过灭菌形成无菌苗，把经过纯化培养后的干巴菌菌丝侵染到树苗根部，形成干巴菌菌根苗；
G、移栽将人工菌丝侵染后形成的干巴菌菌根苗移栽到能涵养水源的林地中，成熟后进行米收。本发明通过人为造成松树根系的创伤，为干巴菌菌丝的侵染和繁殖创造出良好的条件，通过风、水的流动，昆虫的爬行，使干巴菌的孢子、菌丝得以传播和繁衍，产生菌索和纽结，进而形成干巴菌子实体，即利用自然环境经人工侵染、纯化培养，培育干巴菌菌源，增加林地种源，再进行繁育栽培，既保证了野生干巴菌品质，又大大提高了产量。本发明方法简便，有利于野生干巴菌的人工规模化生态栽培。
图I为本发明工作流程图。
具体实施例方式下面结合附图及实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。本发明包括选择有干巴菌的生长环境、通过挖沟、挖塘、铲草、牛犁、牛踏等造成菌丝自然侵染、采集子实体、纯化培养菌种、人工菌丝侵染扩繁，具体包括
选择干巴菌生长环境是选择土壤pH值为4. 5以上，有机质I. 20以上，光照度30(Γ800Lux，海拔1500 2300米，年均温13 15°C的林地环境；
菌丝自然侵染是沿林地中树的滴水线开挖塘穴，或依林地山势沿等高线开挖梯级沟渠，牛犁、牛踏、铲草造成树根系创伤，以利于干巴菌菌丝侵染；
采集子实体是经菌丝自然侵染后，罩上小棚，当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌索和纽结，形成干巴菌子实体，采集备用；
纯化培养是选择新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体进行组织分离用于母种的试管种培养，通过母种的繁育，剔除有污染的试管，循环广3次至得到纯化母种，接入固体菌种培养基和液体培养基中培育出干巴菌菌种；
人工菌丝侵染扩繁是在干巴菌生长较少甚至不长的林地挖沟、塘，在林地的枯松枝叶处，或在松树的干、树根处打洞，埋植、撒播菌种，形成人工菌丝浸染；
菌根苗培养是选用广2年生的树苗，通过灭菌形成无菌苗，把经过纯化培养后的干巴菌菌丝侵染到树苗根部，形成干巴菌菌根苗；
移栽是将人工菌丝侵染后形成的干巴菌菌根苗移栽到能涵养水源的林地中，成熟后进行米收。所述选择菌源生长环境为光照度40(T600 Lux，海拔1800 2300米，旱季雨季分明的林地环境。所述的林地为树龄5 20年的云南松、华山松或思茅松的林地。所述的林地里须铲除杂草，特别是紫茎泽兰要除干净，铲草深度20cm，为菌丝的传播、增加散射光、营养、松树根创伤；在松林地的等高线上用牛犁或耙出8 12公分的浅沟，
5造成树根的创伤，能让干巴菌菌丝侵染；在松林里自然放养黄牛，在牛踏的地方会形成牛蹄印，以此来造成树根的创伤，形成干巴菌的传播、侵染和生长。所述的菌丝自然侵染步骤中塘穴规格为(长)3(T50cmX (宽)3(T50cmX (深)30 50cm。所述的菌丝自然侵染步骤中沟渠规格为(宽)2(T40 cmX (深)2(T40 cm。所述的菌丝自然侵染步骤中干巴菌菌丝侵染后，在有干巴菌生长的菌塘罩上小拱棚，直径2(T30cm，高2(T30cm，控制棚内环境温度12 22°C，湿度40 70%。在不生长干巴菌或菌丝较少的云南松林地，人工接种经过分离、纯化、繁育出来的干巴菌菌种，有效增加干巴菌的自然种源，提高产量。所述的人工菌丝侵染扩繁是将经纯化培养的干巴菌固体种埋于15 25cmX 2(T40cmX 15 25cm的塘穴或2(T40cmX 2(T40cm的沟渠中，覆上I 5cm厚的土，或在松树的树干处、在较粗的松树根部钻f 3cm深的洞，用液体或固体菌种播入其中。所述的人工菌丝侵染扩繁是选择覆盖有腐殖松枝叶的林地，将人工培养的干巴菌液体或固体菌种撒播在腐烂松枝叶中，并覆上广2cm厚的土。所述的菌根苗培养系选用f 2年生的云南松苗、华山松苗、思茅松苗，去除根部的土壤，经灭菌后，把经过纯化培养后的干巴菌菌丝侵染到苗根部，形成干巴菌菌根苗。所述的移栽步骤中林地为针阔叶混交林地或人工恢复植被的松林地，优选水冬瓜树、野樱桃树的林地。本发明的特点
(1)本发明选择最适宜干巴菌共生的树种——松树，尤其以云南松为佳，并选择最适宜干巴菌菌丝生长的自然环境，即应符合六个方面的条件1、酸性土壤；2、土壤有机质I. 20以上；3、光照度300— 800Lux ;4、海拔2000m左右，年均温14. 5°C左右；5、旱季、雨季分明；
6、大龄树，一般在10年以上。在这样的自然环境下，人为造成松树根系的创伤，为干巴菌菌丝的侵染和繁殖创造出良好的条件，再通过水、风的流动，以及昆虫的爬行，使干巴菌的孢子、菌丝得以传播和繁衍，产生菌索和纽结，进而形成干巴菌子实体，既保持野生干巴菌的品质，更增加了产量，满足人们的食用需求；
(2)本发明采收新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体，用于母种的培养，通过菌种的组织分离、纯化，培育出原种，进一步的纯化、选育，培育出栽培种，再返回到母种采集的山林里，进行原生环境扩繁。人工补充原生种源的缺失或不足，有利于云南松菌根的侵染，促使天然干巴菌生长与增量。基于此，把干巴菌菌丝侵染到云南松无菌苗根部，形成干巴菌菌根苗，同时栽种能涵养水源的水东瓜树、野樱桃树等树种，即可通过人工造林的方法实现原生环境规模化生态栽培干巴菌；
(3)本发明方法简便，不使用任何化肥、农药，采用全自然条件的原生环境，产出的干巴菌品质好，无农残，食用安全。实施例I
在云南江川县安化乡旧村看山房，海拔1950m、光照度40(T600 lux，树龄10年以上的人工种植云南松林地，土壤pH值为4. 6，有机质I. 60以上，年均温15°C。沿着山地的等高线，在云南松树根部开挖20 X 20cm至40 X 40cm的沟渠，沟渠两边有大量的松树须根和细根被挖断，造成树根系创伤，以利于干巴菌菌丝侵染；沟渠长度依山而定，沟与沟之间的距离也依树的距离来定，当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌素和纽结，形成干巴菌子实体。实施例2
在云南江川县安化乡旧村看山房，海拔1900m、光照度33(T500 lux，树龄8年以上的人 工种植云南松林地，土壤pH值为5. 5，有机质I. 9，年均温14. 50C。沿云南松的滴水线开挖至少30X30X30cm的塘穴，塘壁四周有松树细根和须根有损伤，以利于干巴菌菌丝侵染，当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌素和纽结，形成干巴菌子实体。实施例3
在云南江川县安化乡旧村看山房，海拔2000m、光照度45(T500 lux，树龄12年以上的人工种植云南松林地，土壤PH值为5. 3，有机质2. 1，年均温14°C。沿云南松的滴水线开挖至少50X50X50cm的塘穴,塘壁四周有松树细根和须根有损伤，以利于干巴菌菌丝侵染；找到干巴菌出菇的菌塘，在其上罩上棚高2(T40cm，拱径2(T30cm的小拱棚，可以保持菌塘的湿度、温度、光照，提供适宜干巴菌子实体长成的环境，当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌素和纽结，形成干巴菌子实体。实施例4
春季初，在云南江)11县安化乡旧村看山房，海拔2000m、光照度41(T800 lux,树龄11年以上的人工种植云南松林地，土壤pH值为6. 0，有机质I. 7，年均温13. 50C。沿云南松树冠滴水线上开挖不小于20X 30X 20cm (长、深、宽)的塘穴，周围有挖断的松树根，将人工培养的干巴菌固体种埋于塘中，覆土 3 5cm。，当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌素和纽结，形成干巴菌子实体。实施例5
冬季末，在云南江川县安化大山，海拔2100m的天然针阔叶混交林地，光照度43(Γ500lux，树龄10年以上，土壤pH值为4. 7，有机质I. 8，年均温14. 3°C。在山地的等高线上用犁、耙、还可放牛踩踏，造成松树根的创伤，形成5 10 cm深的浅沟，扩大干巴菌丝侵染和生长。当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌素和纽结，形成干巴菌子实体。实施例6
冬季末，在江)11县安化大山，海拔2000m的天然针阔叶混交林，松树龄9年以上，土壤pH值为4. 9，有机质I. 5，年均温14. 3°C。选择有干巴菌生长的局部林地，清除地表杂草，特别是紫茎泽兰，浅铲2cm，减少杂草与干巴菌丝争抢生长所需的营养、水分和光照。当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌素和纽结，形成干巴菌子实体。实施例7
在云南江川县安化乡旧村看山房，海拔1950m、光照度45(T520 lux，树龄10年以上的人工种植云南松林地，土壤pH值为4. 8，有机质I. 7，年均温14. 5°C。该林地属于退耕还林山地，采集优质的野生干巴菌为原种，进行人工培养成栽培菌种，返植到原采集地的松林中，在松林的根部挖塘种下，覆盖3、cm 土。I、野生干巴菌种的采集、培养采收菌丝一次自然侵染后长成的子实体或当地自然生长的新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体，进行组织分离用于母种的试管种培养，通过母种的繁育，剔除有污染的试管，循环广3次至得到纯化母种，接入固体菌种培养基培育出干巴菌菌种备用；
2、秋季末，选择生长性状好的松树，在其根部挖塘至3 5cm，用存活的干巴菌固体菌种埋植于其中，覆盖3飞cm 土。实施例8
在云南江川县安化乡旧村看山房的林地里，海拔1950m、光照度45(T520 lux，树龄10年以上的人工种植云南松林地，土壤PH值为5. 2，有机质2. 3，年均温14. 50C。在云南松树滴水线上浅铲表土 3 5cm，形成松树根部创伤，用松香磨碎，与人工培养的干巴菌固体菌种按1:100混合,撒播于纟产好的土坑中，覆盖3、cm 土。I、野生干巴菌种的采集、培养采收菌丝一次自然侵染后长成的子实体或当地自然生长的新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体，进行组织分离用于母种的试管种培养，通过母种的繁育，剔除有污染的试管，循环广3次至得到纯化母种，接入固体菌种培养基培育出干巴菌菌种备用；
2、将松香磨碎成粉状，与人工培养的固体干巴菌种,按1:50(菌种I份，松香粉50份)混合均匀备用；
3、在秋季末，选择生长性状好的松树，从松树滴水线上浅铲表土3 5cm，形成松树根部创伤，将制好的干巴菌混合菌种撒播于铲好的土坑中，覆盖T5cm 土。实施例9:
在云南江川县安化乡旧村看山房，海拔1950m、光照度45(T520 lux，树龄10年以上的人工种植云南松林地，土壤pH值为5. 7，有机质3. 1，年均温14. 50C。选择覆盖较厚的腐烂松枝叶的林地，把人工培养的干巴菌种撒播于其中，让菌丝生长。I、野生干巴菌种的采集、培养采收菌丝一次自然侵染后长成的子实体或当地自然生长的新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体，进行组织分离用于母种的试管种培养，通过母种的繁育，剔除有污染的试管，循环广3次至得到纯化母种，接入液体培养基中培育出干巴菌液体菌种备用；
2、冬季初，选择覆盖较厚的腐烂松枝叶的林地，将备用的液体菌种，用水稀释I: 350(菌种水)，均匀地浇在腐烂松枝叶中，使菌种液体渗透至土层，盖土 f2cm，以保持相应的湿度和温度。实施例10
在云南江川县安化乡旧村看山房，海拔1950m、光照度45(T520 lux，树龄15年以上的人工种植云南松林地，土壤PH值为5. 7，有机质3. 1，年均温14. 50C。选择生长性状好的云南松30棵，在松树的树干处、在较粗的松树根部钻Hem深的洞，用液体或固体菌种播入其中。I、野生干巴菌种的采集、培养采收菌丝一次自然侵染后长成的子实体或当地自然生长的新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体，进行组织分离用于母种的试管种培养，通过母种的繁育，剔除有污染的试管，循环广3次至得到纯化母种，接入液体培养基中培育出干巴菌菌种或直接培育成固体菌种备用；
2、选择生长性状好，树龄15年的云南松30棵，在距松树根的树干处、在较粗的松树根部钻分别钻Hem深的洞，用1:50的多菌灵液体灌入钻洞进行消毒；
3、用液体菌种与水配制成I:20比例的液体菌或固体菌种，灌入或播入经过消毒钻洞内，将树洞表面用要消毒棉封好，避免污染。实施例11 培育菌根苗造林。用广2年生的云南松苗，通过灭菌形成无菌苗，把人工培养的干巴菌菌种侵染到根部，长成干巴菌菌根苗，移栽到适宜干巴菌生长的荒芜山地，同时栽种能涵养水源的水东瓜树、野樱桃树，形成人工针阔叶混交林的生态林。I、野生干巴菌种的采集、培养采收菌丝一次自然侵染后长成的子实体或当地自然生长的新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体，进行组织分离用于母种的试管种培养，通过母种的繁育，剔除有污染的试管，循环广3次至得到纯化母种，接入液体培养基中培育出干巴菌菌种备用；
2、选用f2年生的云南松苗，通过常规消毒法，对所选树苗进行灭菌消毒成无菌苗备
用；
3、用人工培养的干巴菌液体种稀释成浸泡液，菌种与水的比例为I:500，将无菌树苗的根部及接近根的茎底部浸泡在配制的菌种液中，至f 3天；
4、在江)11县雄关乡范冲沟，海拔2006.3m的山上，光照度65(T700 lux,按常规造林方法，将浸泡苗移栽到山上，同时混种水东瓜、野樱桃树苗，形成针阔叶混交林，以保持必要土壤水分和湿度，使干巴菌菌丝随树生长，到一定年份的适宜季节，形成干巴菌的子实体。野生干巴菌在自然环境下挖沟、塘、罩棚处理增产情况
权利要求
1.一种野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于包括选择有干巴菌的生长环境、通过挖沟、挖塘、铲草、牛犁、牛踏等造成菌丝自然侵染、采集子实体、纯化培养菌种、人工菌丝侵染扩繁，具体包括A、选择干巴菌生长环境选择土壤pH值为4.5以上，有机质I. 20以上，光照度30(Γ800Lux，海拔1500 2300米，年均温13 15°C的林地环境；B、菌丝自然侵染沿林地中树的滴水线开挖塘穴，或依林地山势沿等高线开挖梯级沟渠，牛犁、牛踏、铲草造成树根系创伤，以利于干巴菌菌丝侵染；C、采集子实体经菌丝自然侵染后，罩上小棚，当干巴菌菌丝侵染的地方产生菌索和纽结，形成干巴菌子实体，采集备用；D、纯化培养选择新鲜、幼嫩、无杂质的干巴菌子实体进行组织分离用于母种的试管种培养，通过母种的繁育，剔除有污染的试管，循环广3次至得到纯化母种，接入固体菌种培养基和液体培养基中培育出干巴菌菌种；E、人工菌丝侵染扩繁在干巴菌生长较少甚至不长的林地挖沟、塘，在林地的枯松枝叶处，或在松树的干、树根处打洞，埋植、撒播菌种，形成人工菌丝浸染；F、菌根苗培养选用f2年生的树苗，通过灭菌形成无菌苗，把经过纯化培养后的干巴菌菌丝侵染到树苗根部，形成干巴菌菌根苗；G、移栽将人工菌丝侵染后形成的干巴菌菌根苗移栽到能涵养水源的林地中，成熟后进行米收。
2.根据权利要求I所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述选择干巴菌生长环境为光照度400 600 Lux，海拔1800 2300米，旱季雨季分明的林地环境。
3.根据权利要求I或2所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述的干巴菌生长林地为树龄5 20年的云南松、华山松或思茅松的林地。
4.根据权利要求I所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述的菌丝自然侵染步骤中塘穴规格为3(T50cmX 3(T50cmX 3(T50cm。
5.根据权利要求I所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述的菌丝自然侵染步骤中沟渠规格为20 40 cmX 20^40 cm。
6.根据权利要求I所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述的菌丝自然侵染步骤中干巴菌菌丝侵染后，在有干巴菌生长的菌塘罩上小拱棚，直径2(T30cm，高2(T30cm，控制棚内环境温度12 22°C，湿度40 70%。
7.根据权利要求I所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述的人工菌丝侵染扩繁是将经纯化培养的干巴菌固体种埋于15 25cm X 2(T40cm X 15 25cm的塘穴或2(T40cmX 2(T40cm的沟渠中，覆上I飞cm厚的土，或在松树的树干处、在较粗的松树根部钻Hem深的洞，用液体或固体菌种播入其中。
8.根据权利要求I所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述的人工菌丝侵染扩繁是选择覆盖有腐殖松枝叶的林地，将人工培养的干巴菌液体种或固体种撒播在腐烂松枝叶中，覆上f2cm厚的土。
9.根据权利要求I所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述的菌根苗培养为选用广2年生的云南松苗、华山松苗、思茅松苗，去除根部的土壤，经灭菌后，把经过纯化培养后的干巴菌菌丝侵染到苗根部，形成干巴菌菌根苗。
10.根据权利要求I所述的野生干巴菌生态扩繁方法，其特征在于所述的移栽林地为针阔叶混交林地或人工恢复植被的松林地。
全文摘要
本发明公开了一种野生干巴菌生态扩繁方法，包括选择有干巴菌的生长环境、通过挖沟、挖塘、铲草、牛犁、牛踏等造成菌丝自然侵染、采集子实体、纯化培养菌种、人工菌丝侵染扩繁，具体包括选择林地，造成根部创伤，菌丝自然侵染，采集子实体，筛选进行纯化培育出菌种，撒播，形成人工菌丝侵染，让菌丝生长在有松树营养的环境中，或选用1~2年生的树苗，制成无菌苗，进行侵染，形成干巴菌菌根苗；将其移栽到能涵养水源的林地中，成熟后进行采收。本发明方法简便，利用自然环境或人工造林环境经人为侵染、纯化培养，培育干巴菌菌源，再进行繁育栽培，既修复了原来的松林和生态，保证了野生干巴菌品质，又大大提高了产量，有利于野生干巴菌的人工生态扩繁。
文档编号A01G1/04GK102939857SQ20121045295
公开日2013年2月27日 申请日期2012年11月13日 优先权日2012年11月13日
发明者范宝福, 罗星野, 申洁, 乐树云 申请人:范宝福, 罗星野, 申洁, 乐树云