专利名称：一种含恩拉霉素饲料的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种从恩拉霉素发酵液中制得含恩拉霉素饲料的方法，属于饲料技术领域。
背景技术：
恩拉霉素是一种多肽类抗生素，具体是由包括13个不同种类的17个氨基酸分子和脂肪酸分子所组成的有机碱。其中氨基酸分子构成环状多肽结构，脂肪酸位于多肽结构末端。据其末端脂肪酸种类不同，分为恩拉霉素A和恩拉霉素B，恩拉霉素则是由这两种成分组成的混合物。恩拉霉素的盐酸盐为白色结晶性粉末，分子量约为2500，融点为238 245°C，易溶于二甲亚砜，可溶于甲醇、含水乙醇，难溶于丙酮，不溶于苯、氯仿。恩拉霉素的盐酸盐对热、光照和潮湿有极好的稳定性。 恩拉霉素在饲料中具有很高的稳定性，在室温条件下长期储藏很少降解，在制成颗粒料过程中也非常稳定，与饲料混合后在室温下长期储藏效价下降甚微。在肠道内不被降解，能够保持原有的抗菌活性。其抗菌机理主要是抑制细菌细胞壁的合成。阻止粘肽的合成，使细胞壁缺损，导致细胞内渗透压升高，细胞外液渗入菌体，使细菌变形肿大，破裂而死亡。恩拉霉素主要作用于细菌的裂殖阶段，不仅杀菌，而且溶菌，最小抑菌浓度为O. 05
3.13 μ g/ml。饲料中添加恩拉霉素口服后，对大鼠和小鼠LD5tl为Ilg/kg体重，对肉鸡为8g，致畸胎和致突变实验均为阴性，口服后经粪便排出，对农作物、鱼类和环境无害，是安全有效的动物专用抗生素。恩拉霉素在饲料中的微量添加，就可起到良好的促进生长和显著提高饲料报酬的效果。无论在有氧和厌氧条件，恩拉霉素都能对革兰氏阳性菌显示良好的抗菌作用。但是，现有技术中生产的饲料级恩拉霉素产品纯度较低，因而需要添加的量难以控制，且产品收率较低，生产操作复杂，从而影响了经济效益。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中存在的恩拉霉素产品纯度低、色泽深，且产品收率低，操作复杂等不足之处，提供一种简单制得饲料级恩拉霉素的方法。具体地，本发明的方法可以包括以下步骤(I)恩拉霉素发酵液的膜处理将恩拉霉素发酵液(恩拉霉素发酵利用杀真菌链霉菌进行种子罐扩大培养，种子罐培养成熟后按10%接种量接入发酵罐进行正常培养，培养到恩拉霉素发酵效价不再增加时停罐。种子罐培养基为玉米粉3 %，玉米浆2 %，棉籽粉O. 5 %，玉米蛋白粉O. 3 %，硫酸亚铁O. 01 %等；发酵罐培养基为玉米淀粉4%，玉米浆3 %，玉米蛋白粉2 %，棉籽饼粉3 %，氯化钠2%,硫酸铵1%等，以上配方均指质量体积比)加热至60 80°C,保温30 60min。发酵液冷却至30 40°C，在此条件下过200 550D纳滤膜，收集膜滤液，其中的干物质含量为 6wt% IOwt %
(2)恩拉霉素膜滤液的浓缩将过膜后的滤液在60 80°C条件下进行真空干燥，当干物质浓度达到30wt% 40wt %时，停止浓缩，将浓缩后的恩拉霉素与饲料载体进行混合，搅拌均匀，使恩拉霉素干物浓度为45wt% 70wt%。其中饲料载体为低蛋白饲料，选自稻壳粉、小麦粉、全麦粉、核桃壳粉或玉米芯粉，或这些组分组成的混合物。(3)含有恩拉霉素饲料的制成混合物料经气流干燥，含水量控制在Iwt % 3wt%，恩拉霉素含量控制在
3.5wt% 5. 5wt%。用气流干燥进行喷干，可得饲料级恩拉霉素成品。其中，步骤⑴中纳滤膜优选孔径为350D。 其中，步骤⑵中饲料载体的水分含量为lwt% 4wt%。其中，步骤(2)中饲料载体与浓缩的恩拉霉素液混合物料的水分含量为5wt% 40wt % ο更具体地，本发明采用以下的技术方案实现，从而以含有恩拉霉素发酵液为原料，制得包含恩拉霉素的饲料产品，其包括步骤(I)将恩拉霉素含量为5. 5 6. 5g/L的恩拉霉素发酵液加热至60_80°C，保温30-60min。发酵液冷却至30_40°C，在此条件下过200 500D纳滤膜，收集膜滤液，其中干物质含量为6wt% IOwt%。(2)将过膜后的滤液在60 80°C条件下进行真空干燥，当干物浓度达到30wt% 40wt%时，停止浓缩，将浓缩后的恩拉霉素与饲料载体进行混合，搅拌均匀，使干物浓度为45wt% 70wt%,水分含量控制在5wt% 40wt% ；其中所述饲料载体为低蛋白饲料，选自稻壳粉、小麦粉、全麦粉、核桃壳粉或玉米芯粉，其水分含量为lwt% 4wt%。(3)混合物料经气流干燥，含水量控制在I. Owt % 3. Owt %，恩拉霉素浓度控制在 4wt %。其中，所述气流干燥的入口温度为100°C 130°C，出口温度为50°C 80°C、气流的流速为10 40m/s。、干燥时间为IOs 40s，即得包含恩拉霉素的饲料产品。优选地，步骤(I)所述恩拉霉素发酵液过滤时纳滤膜孔径为350D。本发明还提供了上述方法制得的包含恩拉霉素的动物饲料产品。本发明还提供了上述饲料产品的使用方法，以恩拉霉素计，每日对于动物的饲喂量为O. 4 2. Og/kg体重。本发明提供了上述方法处理的含有恩拉霉素的混合物料在制备动物饲料中的应用。本发明方法采用过膜除水分后，进一步浓缩，烘干方式，操作简单，符合大量生产要求，且能低成本制得包含恩拉霉素的饲料，产品纯度较传统工艺提高20 %，有效成分回收率较传统工艺提高5%，由于大幅度提高了产物的纯度，因此可以以较低的添加量实现抗菌功效，避免了传统大量添加恩拉霉素容易导致过量从而导致潜在的风险例如使畜禽产生耐药性，并且产品外观颜色较浅，收率高，工艺简单，实现了较好的经济效益。所得的包含恩拉霉素的饲料产品可以直接用于饲喂动物，也可以进一步精制成加工饲料后饲喂给动物，以恩拉霉素计，每日对于动物的饲喂量为O. 4 2. Og/kg体重，可以促进猪、鸡增重5%以上，提高饲料转化率10%以上。
具体实施例以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，实施例中各原料除特别说明外，均为市售产品。实施例中的恩拉霉素发酵液是将杀真菌素链霉菌(Streptomycesfungicidious) FYFJ03 (保藏号为 CGMCC No. 4113,其已在中国专利CN101974469A中公开)接种于发酵培养基中发酵培养得到的。恩拉霉素发酵利用杀真菌链霉菌进行种子罐扩大培养，种子罐培养成熟后按10%接种量接入发酵罐进行正常培养，培养到恩拉霉素发酵效价不再增加时停罐。种子罐培养基为玉米粉3%，玉米浆2%，棉籽粉
0.5%,玉米蛋白粉0.3%，硫酸亚铁O. 01 %等；发酵罐培养基为玉米淀粉4 %，玉米浆3 %，玉米蛋白粉2 %，棉籽饼粉3 %，氯化钠2 %，硫酸铵I %等，以上配方均指质量体积比。实施例I·(I)取IOL恩拉霉素发酵液，恩拉霉素含量为5. 9g/L，加热至65°C，保温30min，之后冷却至30°C，在30°C条件下，用200D纳滤膜进行浓缩，得到5. 6L膜滤液，其中干物质含量为6wt%。(2)将过纳滤膜后的膜滤液在65°C条件下进行真空浓缩，当浓缩至干物浓度为31wt %时，停止浓缩。得2. 8L浓缩液，加入I. 4kg干玉米芯，搅拌混匀，干物质浓度为68wt%。(3)将混合物料经气流机干燥，得最终水分含量为1.4Wt%，恩拉霉素含量为4. Iwt% ;其中气流干燥的入口温度为130°C，出口温度为80°C、气流的流速为20m/s、干燥时间为15s。最终得含恩拉霉素饲料产品为I. 47kg，收率为97. 7%。实施例2(I)取20L恩拉霉素发酵液，恩拉霉素含量为5. 5g/L，加热至80°C，保温45min，之后冷却至37°C，在37°C条件下，用550D纳滤膜进行浓缩，得到10. 7L膜滤液，其中干物质含量为IOwt %。(2)将过纳滤膜后的膜滤液在80°C条件下进行真空浓缩，当浓缩至干物浓度为34被％时，停止浓缩。得5. 7L浓缩液，加入2. 8kg稻壳粉，搅拌混匀，干物浓度为60wt%。(3)将混合物料经气流机干燥，最终水分含量为2. Iwt %，恩拉霉素含量为
4.5wt%，其中气流干燥的入口温度为100°C，出口温度为60°C、气流的流速为10m/s、干燥时间为30s。最终得含恩拉霉素饲料产品为2. 57kg，收率为94. 8%。实施例3(I)取50L恩拉霉素发酵液，恩拉霉素含量为6. Og/L，加热至60°C，保温60min ;之后冷却至40°C，在40°C条件下，用250D纳滤膜进行浓缩，得到28. 7L膜滤液，其中干物质含量为8wt% ο ο(2)将过纳滤膜后的膜滤液在60°C条件下进行真空浓缩，当浓缩至干物浓度为35wt %时，停止浓缩。得12. 8L浓缩液，加入6. 3kg全麦粉，搅拌混匀，干物浓度为64wt %。(3)将混合物料经气流机干燥，最终水分含量为2. 7wt%，恩拉霉素含量为3. 9wt%，其中气流干燥的入口温度为110°C，出口温度为50°C、气流的流速为25m/s、干燥时间为25s。最终得含恩拉霉素饲料产品为8. 11kg，收率为95. 1%。实施例4(I)取40L恩拉霉素发酵液，恩拉霉素含量为6. 5g/L，加热至70°C，保温55min ;之后冷却至35°C，在35°C条件下，用400D纳滤膜进行浓缩，得到22. 6L膜滤液，其中干物质含量为9wt% ο ο(2)将过纳滤膜后的膜滤液在70°C条件下进行真空浓缩，当浓缩至干物浓度为40被％时，停止浓缩。得9. 8L浓缩液，加入5. Okg小麦粉，搅拌混匀，干物浓度为70wt%。(3)将混合物料经气流机干燥，最终水分含量为3.0wt%，恩拉霉素含量为 5.5wt%，其中气流干燥的入口温度为120°C，出口温度为70°C、气流的流速为40m/s、干燥时间为10s。最终得含恩拉霉素饲料产品为5. 03kg，收率为94. 4%。实施例5(I)取30L恩拉霉素发酵液，恩拉霉素含量为6. 2g/L，加热至65°C，保温50min，之后冷却至32°C，在32°C条件下，用300D纳滤膜进行浓缩，得到15. 6L膜滤液，其中干物质含量为7wt%。(2)将过纳滤膜后的膜滤液在65°C条件下进行真空浓缩，当浓缩至干物浓度为37wt%时，停止浓缩。得7. 5L浓缩液，加入等质量干玉米芯、小麦粉和稻壳粉共2. 4kg，搅拌混勻，干物质浓度为45wt %。(3)将混合物料经气流机干燥，得最终水分含量为1.9Wt%，恩拉霉素含量为
3.5wt% ;其中气流干燥的入口温度为105°C，出口温度为65°C、气流的流速为30m/s、干燥时间为40s。最终得含恩拉霉素饲料产品为5. 55kg，收率为95. 8%。实施例6(I)取25L恩拉霉素发酵液，恩拉霉素含量为5. 8g/L，加热至75°C，保温40min ;之后冷却至34°C，在34°C条件下，用350D纳滤膜进行浓缩，得到13. 3L膜滤液，其中干物质含量为8wt% ο ο(2)将过纳滤膜后的膜滤液在75°C条件下进行真空浓缩，当浓缩至干物浓度为35wt%时，停止浓缩。得6. 8L浓缩液，加入等质量的干玉米芯、稻壳粉和全麦粉共3. 3kg，搅拌混勻，干物浓度为55wt %。(3)将混合物料经气流机干燥，最终水分含量为2. 7wt%，恩拉霉素含量为
4.6wt%，其中气流干燥的入口温度为115°C，出口温度为75°C、气流的流速为35m/s、干燥时间为35s。最终得含恩拉霉素饲料产品为4. 50kg,收率为96. 7%。实施例7使用本发明的含恩拉霉素的饲料对仔猪生产性能的影响按体重相近，公母各半的原则，选取健康的杜长大三元杂交28日龄断奶仔猪进行试验，采用单因素试验设计，共设5个处理(见表I)，每组2个重复，每个重复4头，共计40头。表I不同饲料对仔猪生产性能影响的试验设计
权利要求
1.一种以恩拉霉素发酵液为原料制备含有恩拉霉素饲料的方法，包括如下步骤 (1)将恩拉霉素发酵液加热至60 80°C，保温30 60min;之后冷却至30 40°C，在此温度下过200 550D纳滤膜，收集膜滤液，其中干物质含量为6wt% 10wt% ； (2)将过膜后的滤液在60 80°C条件下真空干燥，当干物质浓度达到30wt% 40wt %时，停止浓缩，将浓缩后的恩拉霉素浓缩液与饲料载体进行混合，搅拌均匀，使干物质浓度达45wt% 70wt% ； (3)混合物料经气流干燥，含水量控制在Iw t % 3 w t %，恩拉霉素含量控制在3. 5wt% 5. 5wt%,即得含恩拉霉素的饲料成品。
2.如权利要求I所述的方法，其特征在于，步骤(I)所述恩拉霉素发酵液中的恩拉霉素含量为5. 5 6. 5g/L。
3.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其特征在于，步骤(I)所述恩拉霉素发酵液过滤时纳滤膜孔径为350D。
4.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述饲料载体为低蛋白饲料，且所述低蛋白饲料选自由稻壳粉、小麦粉、全麦粉、核桃壳粉、玉米芯粉或其混合物组成的组。
5.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述饲料载体的水分含量为Iwt % 4wt%。
6.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述饲料载体与浓缩的恩拉霉素液混合均勾后，混合物料中水分含量控制在5wt% 40wt%。
7.如权利要求1-2中任意一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述气流干燥的入口温度为100°C 130°C，出口温度为50°C 80°C、气流的流速为10 40m/s，干燥时间为IOs 40s。
8.权利要求1-7任一项所述的方法制得的包含恩拉霉素的动物饲料产品。
9.如权利要求8所述的饲料产品，其特征在于，以恩拉霉素计，每日对于动物的饲喂量为O. 4 2. Og/kg体重。
10.权利要求1-7任一项所述的方法处理后的含有恩拉霉素的混合物料在制备动物饲料中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种从恩拉霉素发酵液中制得含有恩拉霉素饲料的方法，包括如下步骤(1)将恩拉霉素发酵液经过热处理后，纳滤膜浓缩；(2)真空干燥后与饲料载体进行混合；(3)气流干燥得成品。本方法优点在于产物纯度高、收率高，工艺简单，节能降耗，成本很低、操作费用低，制得的含恩拉霉素饲料能够有效提高动物的增重率和饲料转化率。
文档编号A23K1/17GK102919525SQ20121046673
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月19日 优先权日2012年11月19日
发明者张雪锋, 魏生, 张毅, 李倩 申请人:安徽丰原发酵技术工程研究有限公司