一种含中生菌素的杀菌组合物及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种含中生菌素的杀菌组合物，有效成分为中生菌素和辛菌胺，中生菌素与辛菌胺的重量比为1:1～40，还可以含有农药学中允许使用和可以接受的辅料，剂型可以为可湿性粉剂、悬浮剂、乳油、水乳剂、水分散粒剂、微乳剂中的任一种。本发明的含中生菌素的杀菌组合物，有效成分中生菌素、辛菌胺作用机理完全不同，复配可对病原菌多位点作用，扩大杀菌谱，提高防效，延缓抗药性的产生。本发明的杀菌组合物可用于防治果树、蔬菜上的多种病害，尤其适用于果树根癌病、姜瘟病等土传细菌性病害，以及果树、蔬菜等作物的根腐病等土传真菌性病害。
【专利说明】一种含中生菌素的杀菌组合物及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种含中生菌素的杀菌组合物及其应用，属于农药【技术领域】。
【背景技术】
[0002]近年来，随着种植结构、气候条件的变化，作物土传病害发生程度和造成的损失逐年加重，严重影响农作物的产量和品质，给农户造成重大经济损失，如果树根癌病、根腐病，姜瘟病，及多种作物的枯萎病、立枯病等。同时，随着人们越来越重视农产品的品牌推广和集约化种植，一些地区常年连续种植单一作物，也是土传病害更加难以根治的重要原因。
[0003]种植者不断加大多菌灵、甲基硫菌灵、甲霜灵、福美双等药剂的使用量，不仅防治效果不理想，还污染生态环境，增加成本。此外，在农作物病害中，真菌性病害和细菌性病害常常混合发生，目前生产上缺乏对混合发生病害均有良好防效的药剂，且存在较多问题与不足，如杀细菌剂抗生素类药剂容易产生抗药性，铜制剂易引起作物药害等问题，致使有些病害如果树根癌病、姜痕病等病害发生越来越严重，常造成毁灭性危害。因此，迫切需要发明一种既节约高效、低毒环保，又能扩大防治谱的防治植物土传细菌、真菌病害的农药组合物。
[0004]中生菌素是一种新型农用抗生素，其杀菌谱广，对农作物的细菌性病害及真菌性病害均具有较好的防效，能够抑制细菌菌体蛋白质的合成，导致菌体死亡；对真菌孢子萌发有强烈的抑制作用，引起菌丝细胞内原生质凝聚，改变丝状菌丝的形态。
[0005]辛菌胺一种环保型氨基酸类高分子聚合物杀菌剂，作用机理是亲水基部分含有强烈的正电性，吸附通常呈负电的各类细菌、病毒，从而抑制细菌、病毒的繁殖，凝固病菌蛋白质，引起病菌酶变性，同时加上聚合物形成的薄膜堵塞了这部分微生物的离子通道，使其立即“窒息死亡”。对半知菌、担子菌、鞭毛菌、子囊菌等四个亚门类真菌及多种细菌，具有极好的预防、治疗、铲除效果，长期使用不产生抗性。
[0006]在农业生产的实际过程中，长期连续单一的使用一种药剂，病原菌很快就会产生抗药性，导致防效降低，农药使用量增加，加剧农产品农药残留和生态环境的破坏。通过与作用机理完全不同的杀菌剂品种进行复配，是延缓病原菌产生抗药性，扩大杀菌谱，延长使用寿命，降低农药使用量的有效途径。
[0007]现有技术中，尚未见有关于中生菌素与辛菌胺复配及应用的相关报道。
【发明内容】
[0008]针对上述现有技术，为了避免长期连续的使用单剂，易使病原菌产生抗药性，导致防效降低，农药使用量增加 ，本发明通过对农药组合物进行联合作用的定量分析和大量其它试验，提供了一种含有中生菌素、辛菌胺两种活性成分的具有协同增效作用的杀菌谱广、成本低、防效好的环保型农药杀菌组合物。
[0009]本发明是通过以下技术方案实现的:
[0010]一种含中生菌素的杀菌组合物，有效成分为中生菌素和辛菌胺，中生菌素与辛菌胺的重量比为1:1~40，优选的，为1:1~30。
[0011]所述含中生菌素的杀菌组合物中，可以含有农药学中允许使用和可以接受的辅料。
[0012]进一步地，所述含中生菌素的杀菌组合物，由以下重量百分数的组分组成:中生菌素1%~80%，辛菌胺1%~80%，余量为农药学中允许使用和可以接受的辅料。
[0013]所述农药学中允许使用和可以接受的辅料选自溶剂、分散剂、乳化剂、稳定剂、润湿剂、消泡剂等及其它有助于有效成分药效的稳定和发挥的允许使用助剂。
[0014]所述含中生菌素的杀菌组合物，可以用现有技术中已知的加工方法制备成适合农业生产使用的任意一种剂型，优选剂型为:可湿性粉剂、悬浮剂、乳油、水乳剂、水分散粒剂、微乳剂。
[0015]本发明的含中生菌素的杀菌组合物，用于防治果树、蔬菜上的多种病害，尤其适用于果树根癌病、姜瘟病等土传细菌性病害，以及果树、蔬菜等作物的根腐病等土传真菌性病害。
[0016]本发明的含中生菌素的杀菌组合物，有效成分中生菌素、辛菌胺作用机理完全不同，复配可对病原菌多位点作用，扩大杀菌谱，提高防效，延缓抗药性的产生。
[0017]本发明的含中生菌素的杀菌组合物，可以成品制剂形式提供，也可以单剂形式提供，使用前直接混合，然后兑水混匀配成所需浓度，植株根部灌施。具体应用时，也可以与其它药剂如杀虫剂、生长调节剂、土壤调节剂、除草剂、杀线虫剂等混合使用。
[0018]本发明的含中生菌素的杀菌组合物，具有以下优点:1、具有协同增效作用，提高防治效果；2、扩大杀菌谱，田间病害多混合发生，中生菌素、辛菌胺混用使用能兼治真菌和细菌病害；3、两种有效成分作用机理不同，混配使用延缓病原菌抗药性的产生；4、降低施药量，减少使用次数，降低使用成本。`
【具体实施方式】
[0019]下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
[0020]实验中生菌素与辛菌胺复配对病害的防治作用研究(室内毒力测定)
[0021]一、供试药剂:中生菌素原药，辛菌胺原药及春雷霉素原药，井网霉素原药，农用链霉素原药。中生圃素、春雷霉素、井R霉素、农用链霉素原药直接用水溶解配成10000 μ g/mL的母液；将辛菌胺原药用丙酮溶解，并配成10000 μ g/mL的母液，以0.2%的体积分数加入乳化剂Tween-80，于冰箱中4°C下贮藏备用。
[0022]二、供试病原菌:细菌病原菌:樱桃根癌病菌(Agrobacteriumtumefaciens (Smith&Town) Conn)、姜痕病菌(Ralstonia solanacearum);真菌病原菌:苹果根腐病菌(Fusarium oxysporum)。
[0023]三、测定方法:
[0024](I)细菌毒力测定方法
[0025]病原细菌毒力测定以樱桃根癌病菌、姜瘟病菌为试验材料，采用抑菌圈法对中生菌素、辛菌胺及其混配制剂进行毒力测定。
[0026]单剂毒力测定方法:
[0027]先将供试药剂(包括中生圃素、羊圃胺、春雷霉素、井网霉素、农用链霉素)配制成2.0、4.0、8.0、16.0、32.0、64.0和128.0mg/kg等7个浓度梯度，取稀释备用的菌悬液2mL(含菌量约为106CFU/mL)至直径为90mm的培养皿中，加入已灭菌溶化的NA培养基15mL(40~50°C )，充分混匀，待其冷却凝固后，用直径为5mm的打孔器在每皿培养基的直径线上1/4和3/4处分别打I个孔，每孔中各加入50 μ L营养琼脂培养基铺底；待其凝固后，在每个培养皿的其中I个孔分别加入70 μ L上述配制药剂，另I孔加入无菌水作对照，每处理浓度5个重复；后将培养基在28°C下培养24~36h，量取抑菌圈直径，取有效的3个重复的平均值为测定结果，计算相对抑制率，后将抑制率转换为几率值，用最小二乘法计算出抑菌几率值与供试药剂浓度对数的毒力回归式，求出各药剂对菌株的有效抑制中浓度EC5tlt5试验数据均由Microsoft Excel2003、DPS数据处理工作平台进行统计分析。
[0028]混配剂联合毒力测定:
[0029]在单剂毒力测定的基础上，将供混配的中生菌素、辛菌胺分别按其EC5tl值剂量按重量比例分别设置 5: 1、2: 1、1: 1、1: 2、1: 5、1: 10、1: 15、1: 20、1: 25、I: 30,1: 35、1: 40,1: 45、1: 50共14个配比，按不同配比配制成最终质量浓度为
2.0,4.0,8.0,16.0,32.0、64.0和128.0mg/kg7个系列浓度的含药NA培养基，确定药剂对病原菌生长的抑制率。每处理(每菌株每浓度水平)重复4次。通过病原菌生长抑制概率值和药剂浓度对数值之间的线性回归分析，求出混配药剂对病原菌的有效抑制中浓度EC5tl值和CTC值，以不加药剂的NA培养基作为对照。
[0030](2)真菌毒力测定方法
[0031]病原真菌毒力测定以苹果根腐病菌为试验材料，采用菌丝生长速率法对中生菌素、辛菌胺及其混配制剂进行毒力测定。
[0032]单剂毒力测定方法:将病原菌于PDA培养基上26°C预培养5d，用直径7mm的打孔器在靠近菌落边缘的同一圆周上`打取菌饼，接种到含有不同药剂(包括中生菌素、辛菌胺、春雷霉素、井冈霉素、农用链霉素)浓度(0.25,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0mg/kg等7个浓度梯度)的培养基平板上，每皿一片，置于26°C恒温箱内培养4d，用十字交叉法测定各处理的菌落生长直径，以清水为对照，每浓度处理重复4次。测定菌落径向线性生长量，确定药剂对菌落生长的抑制率。通过菌丝生长抑制概率值和药剂浓度对数值之间的线性回归分析，求出各药剂对菌株的有效抑制中浓度(EC5tl值)。
[0033]混配剂联合毒力测定:
[0034]在单剂毒力测定的基础上，将供混配的中生菌素、辛菌胺分别按其EC5tl值剂量按重量比例分别设置 5: 1、2: 1、1: 1、1: 2、1: 5、1: 10、1: 15、1: 20、1: 25、I: 30,1: 35、1: 40,1: 45、1: 50共14个配比，按不同配比配制成最终质量浓度为
0.25,0.5、1.0,2.0,4.0,8.0、16.0mg/kg7个系列浓度的含药PDA培养基，确定药剂对菌落生长的抑制率。每处理(每菌株每浓度水平)重复4次。通过菌丝生长抑制概率值和药剂浓度对数值之间的线性回归分析，求出混配药剂对菌株的有效抑制中浓度EC5tl值和CTC值，以不加药剂的PDA培养基作为对照。
[0035](3)数据统计分析
[0036]试验数据均由Microsoft Excel2003、DPS数据处理工作平台进行统计分析,计算出每种药剂的EC5tl值、95%置信限。利用孙云沛法(1960)计算混配剂的共毒系数，根据共毒系数大小评价混配剂的增效作用。[0037]根据以下公式计算各药剂抑制率:
[0038]抑制生长率(%)=[(对照抑菌圈直径-处理抑菌圈直径)/ (对照抑菌圈直径_5mm打孔直径)]X 100
[0039]抑制生长率(%) = [(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-菌饼直径)]X100
[0040]毒力指数TI=(标准药剂EC5tl/供试药剂EC5tl) X 100
[0041]混配剂实际毒力指数ATI=(标准药剂EC5tl/混配制剂EC5tl) X 100
[0042]混配剂理论毒力指数TTI=单剂A的TI XPA+单剂B的TI XPB (PA和PB分别为混配剂中有效成分的百分含量)
[0043]共毒系数CTC=混配剂的实际毒力指数ATI/混配剂的理论毒力指数TTI X 100
[0044]增效作用判断:CTC ^ 120，具有增效作用；80 < CTC < 120，为相加作用；CTC≤80，为拮抗作用。
[0045](4)结果与分析:如表1~表6所不。
[0046]表1 5种药剂对樱桃根癌病菌的毒力测定结果
[0047]
【权利要求】
1.一种含中生菌素的杀菌组合物，其特征在于:有效成分为中生菌素和辛菌胺，中生菌素与辛菌胺的重量比为1:1~40。
2.根据权利要求1所述的含中生菌素的杀菌组合物，其特征在于:所述含中生菌素的杀菌组合物由以下重量百分数的组分组成:中生菌素1%~80%，辛菌胺1%~80%，余量为农药学中允许使用和可以接受的辅料。
3.根据权利要求1所述的含中生菌素的杀菌组合物，其特征在于:所述含中生菌素的杀菌组合物的剂型为可湿性粉剂、悬浮剂、乳油、水乳剂、水分散粒剂或微乳剂。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的含中生菌素的杀菌组合物，其特征在于:所述含中生菌素的杀菌组合物的剂型为可湿性粉剂，是由以下重量百分数的组分组成的:中生菌素1%，辛菌胺2%，烷基萘磺酸钠甲醛缩合物2%，木质素磺酸钠3%，十二烷基硫酸钠3%，白碳黑20%，余量为高岭土。
5.根据权利要求1~3中任一项所述的含中生菌素的杀菌组合物，其特征在于:所述含中生菌素的杀菌组合物的剂型为悬浮剂，是由以下重量百分数的组分组成的:中生菌素1%，辛菌胺20%，烷基萘磺酸钠甲醛缩合物5%，蓖麻油聚氧乙烯醚3%，脂肪醇聚氧乙烯醚5%，亚甲基双萘磺酸钠3%，黄原胶2%，丙三醇4%，余量为水。
6.根据权利要求1~3中任一项所述的含中生菌素的杀菌组合物，其特征在于:所述含中生菌素的杀菌组合物的剂型为乳油，是由以下重量百分数的组分组成的:中生菌素1%，辛菌胺10%，环己烷25%，农乳600号3%，蓖麻油聚乙二醇缩合5%，丙三醇4%，余量为二甲苯。
7.根据权利要求1~3中任一项所述的含中生菌素的杀菌组合物，其特征在于:所述含中生菌素的杀菌组合物的剂型为水乳剂，是由以下重量百分数的组分组成的:中生菌素1%，辛菌胺15%，环己烷20%，农乳600号3%，蓖麻油聚乙二醇缩合5%，烷基萘磺酸钠甲醛缩合物5%，余量为水。
8.根据权利要求1~3中任一项所述的含中生菌素的杀菌组合物，其特征在于:所述含中生菌素的杀菌组合物的剂型为水分散粒剂或微乳剂； 当剂型为水分散粒剂时，是由以下重量百分数的组分组成的:中生菌素1%，辛菌胺5%，烷基萘磺酸钠甲醛缩合物5%，木质素磺酸钠5%，亚甲基双萘磺酸钠2%，硫酸铵3%，白碳黑30%,余量为碳酸钙； 当剂型为微乳剂时，是由以下重量百分数的组分组成的:中生菌素1%，辛菌胺25%，环己烷15%，农乳600号3%，蓖麻油聚乙二醇缩合5%，异丙醇15%，余量为水。
9.权利要求1~8所述的含中生菌素的杀菌组合物在防治果树、蔬菜上的病害中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于:所述病害为果树根癌病、根腐病、姜瘟病。
【文档编号】A01P3/00GK103548855SQ201310574370
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月15日 优先权日:2013年11月15日
【发明者】范昆, 曲健禄, 张琼, 武海斌, 王中堂 申请人:山东省果树研究所