一种捕食性天敌昆虫绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法
【专利摘要】本发明涉及生物防治领域，具体地，涉及一种捕食性天敌绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法，所述方法包括投放经绿僵菌剂接种过的绿步甲的步骤。本发明提出了一种新的生物防治技术，着眼于将生物防治中的“以虫治虫”和“以菌治虫”两者结合起来，探索一种新型的防治途径。发挥捕食性天敌长期捕食防控，绿僵菌各剂型优点和混合防效，防治效果显著提高，随时使用随时配制，效果好，持续时间长。节省人力物力，可利用步甲的穿梭和活动性将微生物农药传播，促进生物多样性，实现害虫可持续控制。
【专利说明】一种捕食性天敌昆虫绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物防治领域，具体地，涉及一种捕食性天敌绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法。
【背景技术】
[0002]近几十年来，由于单纯依赖化学农药以及滥用化学农药，以致出现了 3R，不仅杀伤了天敌，干扰了天敌的自然控制作用，而且危及人的安全，生物防治已经越来越被人们深刻地理解和广泛应用。
[0003]生物防治，指利用有益生物及其代谢产物控制有害生物种群的发生或减少危害的方法。一般是指以虫治虫、以菌治菌、以菌治病，以菌治草、转基因育种、性信息激素等方法。生物农药是指利用生物活体(真菌，细菌，昆虫病毒，转基因生物，天敌等)或其代谢产物针对农业有害生物进行杀灭或抑制的制剂。生物农药具有不污染环境、对人和其他生物安全、防治作用持久、产品无残留、对病虫的杀伤特异性强，易于同其他植物保护措施协调配合并能节约能源等优点，必将在有害生物综合防治中发挥着越来越重要的作用。
[0004]绿僵菌属于真菌门(Eumycota)子囊菌亚门(Ascomycotina)核菌纲(Pyrennycetes)球壳菌目(Sphaeriales)麦角菌科(Clavisipitetaceae),是一类重要的生防真菌，可寄生多种昆虫，在生产中已得到广泛的应用，据不完全统计，全世界约有200多种昆虫能被这种真菌感染致死。该菌致病力强、效果好，对人、畜和农作物无毒害，是当前世界上研究应用最多的虫生真菌之一。
[0005]真菌生防制剂具有触杀性、流行性、对环境安全和不易产生抗药性等特点。利用虫生真菌防治害虫成为以生物防治为主的综合治理的一个重要方面，虫生真菌是害虫种群自然调节的重要因子和害虫生物防治的重要材料。目前，国内外研究开发的绿僵菌制剂约10余种，其中，影响最大且最成功的范例是英国CABI Bio2science幢虫生物防治国际合作项目(LUBIL0SA)研制的杀蝗绿僵菌生物农药，已在非洲注册登记、投产，大面积用于沙漠蝗的防治，成为有效的蝗虫生防制剂。
[0006]绿步甲Carabus (Coptolabrus) smaragdinus Fischer von Waldheim 隶属鞘翅目Coleoptera,步甲科Carabidae,步甲族Carabini,步甲属Carabus,是一种有重要利用价值的捕食性天敌昆虫资源，在国内分布于北方大部分省份，在国外分布于西伯利亚的东南部、俄罗斯远东地区及韩国。该虫营捕食性生活，主要以蚯蚓为食，对维护生态平衡起着重要的作用。绿步甲是农田的重要捕食性天敌，其成、幼虫捕食能力强，行动敏捷，特别喜食蜗牛、鳞翅目昆虫，也取食蛴螬、蝗虫等，利用该步甲防治农田害虫具有广阔的应用前景
[0007]但是目前生物防治存在着防效低，资源分散、防治资源单一，防控方式单一等问题。因此创新资源整合，创新生物防治的作用方式，提高生物防治防效是生物防治急需解决的问题。绿僵菌有较强的寄生专一性，对捕食性天敌昆虫绿步甲、通缘步甲、黑广肩步甲等无毒，因此，将活动能力较强的捕食性天敌与虫生真菌组合，既能够发挥捕食性天敌捕食害虫的功能，又能够利用天敌昆虫携带绿僵菌孢子粉并大范围传播，节省人力物力，增加害虫感染绿僵菌的几率，造成绿僵菌流行病的发生。将捕食性天敌和绿僵菌两种生物农药有机结合来控制害虫，发挥两者的联合功效具有非常广阔的应用前景。
【发明内容】
[0008]本发明的目的是提供一种捕食性天敌绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法。
[0009]本发明利用捕食性天敌昆虫绿步甲虫生真菌绿僵菌组合，发挥各形态生物农药的优点，提高防治有害生物的范围及防效，有效控制害虫的安全无污染的生物农药。
[0010]根据本发明的捕食性天敌绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法包括以下步骤:
[0011](I)配制绿僵菌孢子粉；
[0012](2)将绿僵菌与捕食性绿步甲结合；
[0013](3)以粘有孢子粉的步甲侵袭害虫。
[0014]根据本发明的方法，配制绿僵菌IO7~IO8个孢子/ml、可湿性粉剂绿僵菌100-200
亿孢子/克。
[0015]根据本发明的【具体实施方式】，将绿僵菌与捕食性绿步甲结合，步骤如下:
[0016](I)准备一个可以盛放步甲的lm*0.7左右的塑料盒；
[0017](2)将绿僵菌可湿性粉剂撒在大盒子中，孢子粉厚度0.2cm左右；
`[0018](3)将步甲放入其中；
[0019](4)将悬乳剂稀释100倍，用与盒子大小相当，厚度Icm左右的纱布，把纱布用稀释后的悬乳剂浸湿；
[0020](5)将粘有绿僵菌孢子粉的纱布平铺在盛有步甲的盒子中，使纱布将步甲覆盖，等待5-10分钟即可将纱布取下，盒子中的粘有孢子粉的步甲即可释放，用于防治害虫。
[0021]本方法依据绿僵菌制剂的不同及绿步甲的食性可以用来防治飞蝗、草原蝗虫、美国白蛾、蜗牛、蛞蝓、白星花金龟、草地螟、小地老虎、大地老虎、苹梢鹰夜蛾、苹掌舟蛾、红腹灯蛾、桑螟、桑尺蠖、舞毒蛾等。
[0022]目前生物防治存在着防效低，资源分散、防治资源单一，防控方式单一等问题。因此创新资源整合，创新生物防治的作用方式，提高生物防治防效是生物防治急需解决的问题。本发明提出了一种新的生物防治技术，着眼于将生物防治中的“以虫治虫”和“以菌治虫”两者结合起来，探索一种新型的防治途径。
[0023]本发明的优点:
[0024]1.捕食性步甲具有广谱取食性可控制多种害虫，捕食和活动能力较强，活动范围较广。
[0025]2.微生物农药来源于自然环境，具专一寄生性。
[0026]3.对人、畜等生物比较安全，对环境无污染，无公害，绿色，安全。
[0027]4.对天敌较安全，它具有对目标害虫毒杀的选择性，不容易产生抗药性。
[0028]5.生产工艺比较简单，开发与登记等费用低于化学农药等特性。
[0029]6.发挥捕食性天敌长期捕食防控，绿僵菌各剂型优点和混合防效，防治效果显著提闻
[0030]7.随时使用随时配制，效果好，持续时间长。
[0031]8.节省人力物力，可利用步甲的穿梭和活动性将微生物农药传播，促进生物多样性，实现害虫可持续控制。
【专利附图】
【附图说明】
[0032]图1为校正死亡率曲线图。
[0033]图2显示绿僵菌处理对绿步甲成虫死亡率的影响。
[0034]图3显示绿僵菌与绿步甲与不同组合处理对东亚飞蝗致死力，其中，I:单独释放绿步甲；II:单独施用绿僵菌；III:释放绿步甲同时施用绿僵菌；IV:绿步甲接种绿僵菌后释放。
【具体实施方式】
[0035]实施例1
[0036]1.1试验材料
[0037]3龄的蝗蝻:采自山东泰安山东农业大学植物保护学院东亚飞蝗繁殖基地。杀蝗绿僵菌孢子母粉LS20041884:重庆真菌农药研制工程中心提供。用0.2%吐温溶液将金龟子绿僵菌孢子粉稀释成IO5个/mL，IO6个/mL，IO7个/mL，IO8个/mL，备用。绿步甲来源于山东农业大学植保学院环境生物与昆虫资源研究所，用东亚飞蝗饲养的绿步甲，经过一年的东亚飞蝗捕食饲养驯化。
[0038]1.2金龟子绿僵菌对东亚飞蝗毒力测定
[0039]采用浸毒法处理试虫，用移液器吸取2uL的绿僵菌孢子液，将蝗蝻背部浸入绿僵菌孢子液后取出，每笼15头。对照组用2uL的0.2%吐温溶液。各组处理重复3次。接种后，将试虫放在T= (28 土 IV )，湿度为50%~70%，24h光照的环境中试养。每天早上7:30饲喂一次新的玉米叶并清除杂物，同时记录蝗蝻死亡的数量，连续调查直到各组的校正死亡率达到80%以上。从第3天开始将死的蝗虫取出进行保湿(培养皿铺上用无菌水浸湿的滤纸或是放浸湿的脱脂棉，各个蝗虫尸体不能有所接触，最后记录蝗虫的僵虫率)。
[0040]接种剂量(个/g)=[接种浓度(个/mL) X接种体积(mL) ]/试虫体重
[0041]校正死亡率:M=(t - c)/ (100 - c) X 100%
[0042]Μ:校正死亡率c:对照死亡率t:处理死亡率
[0043]通过方差分析、邓肯氏新复极差法检测各处理间统计量的回归方程。
[0044]生测结果显示，前两天都无蝗蝻死亡，从第三天开始孢子浓度为IOX IO7 (个/mL)和1.0X IO8 (个/mL)都有蝗蝻死亡，校正死亡率分别为4.67%和11.13%。随着天数的增加，虫体的死亡率也在增加。第10天时，孢子浓度为LOXlO8 (个/mL)的处理组，校正死亡率达到100%，而此时，孢子浓度为1.0X 1.07个/mL，1.0X IO6个/mL，1.0X IO5个/mL的处理组，校正死亡率分别为93.33%，75.57%，64.46%。第14天时，所有处理组的校正死亡率都为100%ο
[0045]从表1金龟子绿僵菌对3龄东亚飞蝗的致病力的结果可以看出，在置信度95%的显著水平上，孢子浓度为1.0X IO6个/mL，1.0X IO5个/mL对3龄东亚飞蝗的致病力的差异很显著，而1.0X 1.07个/mL, 1.0X 1O8个/mL对3龄东亚飞幢的致病力的差异不明显。总体，看来，LD5tl 的大小顺序为 1.0 X 1O8 个 /mL < 1.0 X 1O7 个 /mL < 1.0 X IO6 个 /mL < 1.0 X IO5个/mL，其中，效果最佳的孢子浓度为1.0 X IO8个/mL。[0046]表1处理后蝗蝻的校正死亡率(%)
[0047]
【权利要求】
1.一种捕食性天敌绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法，其特征在于，所述方法包括投放经绿僵菌剂接种过的绿步甲的步骤。
2.根据权利要求1所述的捕食性天敌绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法，其特征在于，所述害虫为蝗虫、夜蛾、桃小食心虫或梨小食心虫。
3.根据权利要求1所述的捕食性天敌绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法，其特征在于，所述绿僵菌剂为绿僵菌孢子粉，其浓度为1O7~1O8个孢子/ml。
4.根据权利要求1所述的捕食性天敌绿步甲与绿僵菌组合防治害虫的方法，其特征在于，所述绿僵菌剂为绿僵菌孢子粉加工成的可湿性粉剂绿僵菌，其绿僵菌有效成分含量100-200 亿孢子 /g。
【文档编号】A01M99/00GK103783030SQ201310739100
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2013年12月26日 优先权日:2013年12月26日
【发明者】秦兴虎, 吴惠惠, 刘玉升, 张泽华 申请人:中国农业科学院植物保护研究所