小型海洋动物塑化标本制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种小型海洋生物塑化标本的制作方法，利用此方法制作标本时，使用的仪器设备简单，不需要真空干燥和加压渗透处理，缩短了塑化时间，使制备过程更加简单易行，制作过程也不使用对人体有害的试剂。利用上述塑化技术完成的菲律宾蛤仔、虾夷扇贝、栉孔扇贝、红螺、寄居蟹、巴蛸、乌贼、海鲶鱼等小型海洋动物塑化标本，具有保存时间长，可以直接接触，形态真实等优点。标本可广泛用于教学工作、科学研究和收藏观赏的领域。
【专利说明】小型海洋动物塑化标本制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种标本制作技术，更具体地说，涉及一种小型海洋动物塑化标本制作方法。
【背景技术】
[0002]目前制备动物塑化标本的方法主要有聚乙二醇技术和硅橡胶浸溃技术。
[0003]利用聚乙二醇制备塑化标本的方法即通过采用高分子水溶性塑料一聚乙二醇替换标本中含有的水分，制成塑化标本。聚乙二醇是一种温和、低毒无刺激性的高分子化合物，能完全溶于水，具有较好的稳定性。使用该塑化方法制作的标本，具有以下优点:(1)塑化标本的颜色比浸泡标本略有加深，皱缩不明显，易获得良好的姿态；(2)用不同分子量的聚乙二醇逐级浸泡具有防腐固定的作用，所制标本无需防腐剂处理；(3)制成标本不易霉变和虫蛀、无鼠咬且无味。该技术存在的问题有:(1)实验操作复杂，处理时间较长；(2)实验设备要求较高，；(3)实验条件不易控制，受多因素限制。
[0004]技术出处:
1.唐安科。一种简易塑化动物标本的制作方法[J]。生物学通报，2006，41 (9):56-57。
[0005]2.钟思群，曾剑波，陈丽芬等。动物标本塑化保存研究[J]。广东药学院学报，1999，15(4):333-334。
[0006]3.董代辉，唐安科等。聚乙烯吡咯烷酮制作鱼类透明骨骼标本[J]。生物学通报，2010,45(1):45o
[0007]利用硅橡胶浸溃技术制备塑化标本的基本原理是选用液态高分子多聚化合物单体作为塑化剂，替代组织细胞内的水分，进行聚合固化，达到组织塑化的目的。基本步骤可分为固定、脱水、真空浸溃和硬化处理四步。应用硅橡胶塑化技术制作的标本有如下优点:
(I)标本无明显的刺激气味且对人体的危害较小；(2)标本易于保存及运输；(3)标本经久耐用，不易损坏；(4)标本可长期保存。存在的问题有:(1)设备要求高；(2)试剂成本较高，含有挥发性有害成分，对长期从事标本制作的人员健康不利；(3)实验操作过程复杂，处理时间较长。
[0008] 技术出处:
1.鲁金波，郭炜，杜立银，等。羊心脏塑化标本的制作技术[J]。内蒙古民族大学学报，2009,24(1):70-71。
[0009]2.张冬。猪心塑化标本的制作[J]。中国医药导报，2010，7(25):118。
[0010]3.邵旭建，张国杰，刘志才等。硅橡胶塑化标本制作技术介绍[J]。青岛大学医学院学报，2005，41 (I):78-79。
[0011]4.鲁金波，高志刚。狗心脏塑化标本的制作技术[J]。中国畜牧兽医文摘，2012，28(4):200。
[0012]5.刘起颖，程明亮，冯培勋等。生物塑化标本技术在病理实验教学中应用[J]。临床与实验病理学杂志，2013，29 (5):571-572。
【发明内容】
[0013]为了简化小型海洋动物塑化标本制作流程，使制作过程中所使用的设备更加简单，降低制作难度，本发明提供一种小型海洋动物塑化标本制作方法，根据动物的不同，制作的方法分为三种:
1、瓣鳃纲海洋动物标本制作方法:
(1)选取活体或新鲜的瓣鳃纲海洋动物，活体采用冷冻法处死；
(2)使标本的贝壳保持张开状态，浸入含1%酒石酸的水溶液中浸泡3小时，然后将其放入95%~100%的乙醇中浸泡5min ；
(3)将标本置于45%乙醇中浸泡40小时,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小时,完成脱水、脱脂过程；
(4)将处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥；
(5)再将标本放入塑化用试剂A中塑化15min；
(6)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，并除去表面多余塑化用试剂后，将其放入15% PVP水溶液中浸泡5min，
(7)取出后在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干；
(8)将标本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中数分钟，直至标本湿润，取出干燥，从步骤
(4)开始，重复三次。
[0014] 2、软体纲海洋动物标本制作方法:
(1)选取活体或新鲜的软体纲海洋动物，长度不超过55厘米，宽度和高度不超过10厘米，活体动物采用冷冻法处死；
(2)将标本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min；
(3)将处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥；
(4)再将标本放入塑化用试剂A中塑化15min；
(5)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，并除去表面多余塑化用试剂后，将其放入30% PVP水溶液中浸泡5min ；
(6)取出标本在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干；
(7)将标本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中数分钟，直至标本湿润，取出干燥，从步骤
(3)开始，重复三次；
(8)将标本置于45%乙醇和1%磨香草酹溶液中浸泡36小时,然后放入80%乙醇和1%麝香草酚溶液中处理18小时，之后将其放入35°C的40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡5小时,置于干燥阴凉处自然晾干；
(9)而后放入15%聚乙烯吡咯烷酮K-30水溶液中浸泡5小时，再将其放入40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡I小时，于光照充足处放置一天，再放入阴暗干燥处自然晾干。
[0015]3、海洋鱼类标本制作方法:
(I)选取活体或新鲜的海洋鱼类，长度不超过55厘米，高度不超过25厘米，宽度不超过10厘米，活体采用冷冻法处死；(2)将标本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min；
(3)将标本置于45%乙醇中浸泡40小时,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小时,完成脱水、脱脂过程；
(4)将处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥；
(5)从标本口腔和腹部向体内注入塑化剂用试剂A，再将标本放入塑化用试剂A中塑化15min ；
(6)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，并除去表面多余塑化用试剂后，将其放入30% PVP水溶液中浸泡5min ；
(7)取出在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干；
(8)浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30数分钟，直至标本湿润，再取出干燥，从步骤(4)开始，重复三次，每次操作需将鱼类脱水干瘪的眼部浸满PVP溶液，以便保持其形态。
[0016]其中，塑化用试剂A配方为31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇和10mL水，将上述材料混合，常温常压下，加热至完全溶解即可。此溶液45°C左右完全融化，38°C左右对标本可进行常压塑化；
塑化用试剂B配方为12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇和1mL水，将上述材料混合，常温常压下，加热至完全溶解即可。此溶液45°C左右完全融化，38 °C左右对标本可进行常压塑化。
[0017]本发明的有益效果是:
(I)研制了不同目的适宜的塑化用试剂配比，此塑化用试剂具有高效渗透和重复利用等优点，并且在低温下就可以对标本进行塑化；聚乙二醇具有使蛋白质变性并稳定蛋白质的作用，防止标本腐败并可保持形态，聚乙烯吡咯烷酮用于标本表面处理可形成致密隔绝层，将标本与空气隔绝，二者的结合使得塑化标本的效果更加真实；采用了塑化用试剂A对需要填充部位进行填充，使其形态更加逼真；脱水过程中使用了酒石酸进行前期处理，使标本不仅容易吸收试剂，而且能使标本在处理过程中变得柔软，不僵硬；
(2)塑化标本制作更加简单易行，制作过程不受时间、设备等因素的限制，一般在5天内即可完成标本的制作，标本表面油亮有光泽，没有明显的皱缩，保存过程中不易褪色，不易沾染灰尘，常规条件下即可长时间保存；
(3)在收藏展示和科研教学中，使人们能够直接与标本生物接触，经久耐用，不易霉变和虫蛀、不遭鼠咬且无味，有效地控制了标本室内的空气污染。
【具体实施方式】
[0018]利用上述塑化技术完成的菲律宾蛤仔、虾夷扇贝、栉孔扇贝、红螺、寄居蟹、巴蛸、乌贼、海鲶鱼等小型海洋动物的塑化标本，具有保存时间长，可以直接接触，形态较为真实等有点。标本制作过程如下:
1、瓣鳃纲海洋动物标本制作方法:
(1)选取活体或新鲜的瓣鳃纲海洋动物，活体采用冷冻法处死；
(2)使标本的贝壳保持张开状态，浸入含1%酒石酸的水溶液中浸泡3小时，然后将其放入95%~100%的乙醇中浸泡5min ；(3)将标本置于45%乙醇中浸泡40小时,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小时,完成脱水、脱脂过程；
(4)将处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥；
(5)再将标本放入塑化用试剂A中塑化15min，需暴露其器官形态；
(6)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，并除去表面多余塑化用试剂后，将其放入15% PVP水溶液中浸泡5min，
(7)取出后在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干；
(8)将标本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30 中数分钟，直至标本湿润，取出干燥，从步骤
(4)开始，重复三次。
[0019]2、软体纲海洋动物标本制作方法:
(1)选取活体或新鲜的软体纲海洋动物，长度不超过55厘米，宽度和高度不超过10厘米，活体动物采用冷冻法处死；
(2)将标本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min，取出时，注意将其外面包裹的白色膜状物小心擦除；
(3)将处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥；
(4)再将标本放入塑化用试剂A中塑化15min；
(5)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，并除去表面多余塑化用试剂后，将其放入30% PVP水溶液中浸泡5min ；
(6)取出标本在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干；
(7)将标本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中数分钟，直至标本湿润，取出干燥，从步骤
(3)开始，重复三次；
(8)将标本置于45%乙醇和1%磨香草酹溶液中浸泡36小时,然后放入80%乙醇和1%麝香草酚溶液中处理18小时，之后将其放入35°C的40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡5小时,置于干燥阴凉处自然晾干；
(9)而后放入15%聚乙烯吡咯烷酮K-30水溶液中浸泡5小时，再将其放入40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡I小时，于光照充足处放置一天，再放入阴暗干燥处自然晾干；
分子量400的聚乙二醇可对软体动物的外表面和近表处内部进行塑化固定，保持其外形，并可使标本塑化、脱水，因此低浓度聚乙二醇短时间内可实现标本内部塑化，较高浓度短时间内可对标本表面塑化。
[0020]3、海洋鱼类标本制作方法:
(1)选取活体或新鲜的海洋鱼类，长度不超过55厘米，高度不超过25厘米，宽度不超过10厘米，活体采用冷冻法处死；
(2)将标本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min，将鱼类的腹鳍、胸鳍、背鳍、尾鳍尽最大可能的展开与溶液充分接触，取出时，注意将其外面包裹的白色膜状物小心擦除；
(3)将标本置于45%乙醇中浸泡40小时,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小时,完成脱水、脱脂过程；
(4)将处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥；
(5)从标本口腔和腹部向体内注入塑化剂用试剂A，再将标本放入塑化用试剂A中塑化15min ；
(6)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，并除去表面多余塑化用试剂后，将其放入30% PVP水溶液中浸泡5min ；
(7)取出在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干；
(8)浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30数分钟，直至标本湿润，再取出干燥，从步骤(4)开始，重复三次，每次操作需将鱼类脱水干瘪的眼部浸满PVP溶液，以便保持其形态；
所述塑化用试剂A的配方:31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇，10mL水；此溶液45°C左右完全融化，38°C左右对标本可进行常压塑化；
所述塑化用试剂B的配方:12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇，1mL水；此溶液45°C左右完全融化，38°C左右对标本可进行常压塑化。
[0021] 以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.小型海洋动物塑化标本制作技术，其特征在于，所述海洋动物为瓣鳃纲海洋动物，标本制作步骤如下: (1)选取活体或新鲜的瓣鳃纲海洋动物； (2)使动物贝壳保持张开状态，浸入含1%酒石酸的水溶液中，浸泡3小时，然后将其放入95%~100%的乙醇中浸泡5min ； (3)将标本置于45%乙醇中浸泡40小时,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小时,完成脱水、脱脂过程； (4)将脱水脱脂处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥； (5)再将标本放入塑化用试剂A中塑化15min； (6)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，除去多余塑化用试剂，将其放入15%PVP水溶液中浸泡5min ； (7)取出后在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干； (8)浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中数分钟，直至标本湿润，取出干燥，从步骤(4)开始，重复三次； 所述塑化用试剂A是由31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇和10mL水混合，在常温常压下，加热至完全溶解制得； 所述塑化用试剂B是由12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇和1mL水混合，在常温常压下，加热至完全溶解制得。
2.小型海洋动物塑化标本制作技术，其特征在于,所述海洋动物为软体纲海洋动物,标本制作步骤如下: (1)选取活体或新鲜的软体纲海洋动物，长度不超过55厘米，宽度和高度不超过10厘米，活体动物采用冷冻法处死； (2)将标本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min； (3)处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥； (4)再将海洋动物放入塑化用试剂A中塑化15min； (5)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，并除去表面多余塑化用试剂，放入30%PVP水溶液中浸泡5min ； (6)取出标本在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干； (7)浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30中数分钟，直至标本湿润，取出干燥，从步骤(3)开始，重复三次； (8)将标本置于45%乙醇和1%磨香草酹溶液中浸泡36小时,然后放入80%乙醇和1%麝香草酚溶液中处理18小时，之后将其放入35°C的40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡5小时,置于干燥阴凉处自然晾干； (9)放入15%聚乙烯吡咯烷酮K-30水溶液中浸泡5小时，再将其放入40%分子量400的聚乙二醇溶液中浸泡I小时，于光照充足处放置一天，再放入阴暗干燥处自然晾干； 所述塑化用试剂A是由31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇和10mL水混合，在常温常压下，加热至完全溶解制得；所述塑化用试剂B是由12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇和1mL水混合，在常温常压下，加热至完全溶解制得。
3.小型海洋动物塑化标本制作技术，其特征在于，所述海洋动物为海洋鱼类，标本制作步骤如下: (1)选取活体或新鲜的海洋鱼类，长度不超过55厘米，高度不超过25厘米，宽度不超过10厘米，活体采用冷冻法处死； (2)将标本放入95%~100%的乙醇中浸泡5min； (3)将标本置于45%乙醇中浸泡40小时,然后置于80%乙醇溶液中浸泡15小时,完成脱水、脱脂过程； (4)将脱水脱脂处理后的标本放入塑化用试剂B中塑化15min，取出后使用脱脂棉将表面多余塑化用试剂B除去，置于阴暗干燥处自然干燥； (5)从口腔和腹部向体内注入塑化剂用试剂A，再将标本放入塑化用试剂A中塑化15min ； (6)用无水乙醇和1%麝香草酚擦拭标本表面，并除去表面多余塑化用试剂，放入30%PVP水溶液中浸泡5min ； (7)取出标本在光照充足处放置一天，再于阴暗干燥处自然晾干； (8)将标本浸入30%聚乙烯吡咯烷酮K-30数分钟，直至标本湿润，取出干燥，从步骤(4)开始,重复三次,每次操作将鱼类脱水干瘪的眼部浸满PVP溶液； 所述塑化用试剂A是由31g分子量10000的聚乙二醇，400mL分子量600的聚乙二醇和10mL水混合，在常温常压下，加热至完全溶解制得； 所述塑化用试剂B是由12g分子量10000的聚乙二醇，178g分子量1000的聚乙二醇和1mL水混合，在常温常压下，加热至完全溶解制得。
【文档编号】A01N1/00GK104041483SQ201410178931
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年4月30日 优先权日:2014年4月30日
【发明者】曹阳, 赵捷, 付爽, 杨超, 霍晋彦 申请人:大连大学