一种促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法与流程

本发明涉及一种营养强化方法，特别是涉及一种促进日本沼虾幼体发育的微量元素强化卤虫的方法。

背景技术：

人工繁育日本沼虾幼体需要大量的活体饵料，人工培育的卤虫普遍作为虾蟹类幼体的活体饵料。在人工养殖过程中，发育阶段的开口饵料的营养平衡对后期的苗种产量起到关键作用。微量元素作为一些酶的辅基及金属结合位点，能够维持骨骼发育，促进机体免疫机能和保持物质代谢的正常进行。本实验室研究表明，人工培育的卤虫中铜、锌和硒含量低于不能满足日本沼虾幼体发育的需要量。相比于自然水域，日本沼虾幼体在人工养殖环境下摄食的活体饵料种类有限，实践生产通常对活体饵料轮虫营养强化后投喂，但往往忽略了微量元素的营养强化。

目前营养强化卤虫的方法有多种，其成本和效果也各有不同，给卤虫投喂单胞藻、酵母和鱼油是较为常见的强化方式，已有的强化方法仅仅局限于在活体饵料轮虫中补充脂肪酸和维生素，往往忽略了外源微量元素的补充。铜、锌和硒都是水溶性物质，卤虫不能够吸收水体中微量元素。迄今，脂肪酸和维生素强化卤虫的方法不能直接应用到微量矿物元素，而水溶性微量元素的强化卤虫方法尚未建立。所以，寻找卤虫微量元素强化技术，以满足日本沼虾幼体发育需求，成为亟需解决的问题。

技术实现要素：

本发明的目的在于为了克服以上现有技术的不足而提供一种促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，通过利用高浓缩小球藻来富集微量元素，通过利用富集微量元素后的小球藻对卤虫喂食进一步强化卤虫，同时利用乳化型鱼油和酵母硒直接对卤虫进行强化，使得卤虫达到了日本沼虾幼体发育所需要的全营养状态，能够极大程度提升日本沼虾幼体的生长发育。

本发明的技术方案如下：

一种促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，具体方法包括以下步骤：

步骤一，采用高度浓缩小球藻为富集微量元素载体；

步骤二，配制浓度为500-1000 mg L⁻¹的硫酸铜溶液和浓度为200-500 mg L^-1的硫酸锌溶液；

步骤三，取步骤一的高度浓缩小球藻加入步骤二配制好的硫酸铜溶液和硫酸锌溶液的混合溶液中进行富集微量元素铜和锌；

步骤四，将步骤二富集微量元素铜和锌后的小球藻取出；放入养殖有卤虫的水槽中，同时加入乳化型鱼油和酵母硒对卤虫进行强化；

步骤五，使用强化后的卤虫对日本沼虾幼体进行喂食。

进一步地，所述的促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，步骤一中配置小球藻的湿重为7×10¹⁰ cells g⁻¹。

进一步地，所述的促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，步骤三中将10g小球藻加入到3-5ml硫酸铜溶液和3-5ml硫酸锌溶液的混合液中。

进一步地，所述的促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，步骤三中富集微量元素铜和锌的富集时间为1-3h。

进一步地，所述的促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，步骤四中强化温度为28±0.5℃、pH 7.8-8.2、溶解氧大于6 mg/L、盐度20‰。

进一步地，所述的促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，步骤四中乳化型鱼油的加入量为2mg/L。

进一步地，所述的促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，步骤四中酵母硒的加入量为2mg/L。

进一步地，所述的促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，步骤四中强化时间为8-12h。

进一步地，所述的促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，步骤四中加入乳化型鱼油和酵母硒对卤虫进行强化的过程分两个阶段进行，第一阶段为将水槽中通入氧气并将体系温度升温至30-32℃，保持1-2h，然后加入乳化型鱼油，加入乳化型鱼油与水槽养殖液的质量体积比为1mg/L，保持1-2h，然后再加入酵母硒，保持1-2h，加入酵母硒的量与乳化型鱼油的量相同；然后将体系温度降为15-18℃，保持8-10h，进入第二阶段，在保持体系温度为15-18℃的条件下加入乳化型鱼油和酵母硒，加入的乳化型鱼油和酵母硒的量与水槽养殖液体系的质量体积比均为1mg/L，加入后维持体系溶氧量大于6mg/L，pH7.8-8.2，盐度20‰，在3-4h内将水槽养殖液体系温度升至30℃，保持1-2h，强化完成。

本发明通过采用小球藻对铜和锌等微量元素的富集，使用富集后的小球藻对卤虫进行喂食强化，极大提高了卤虫体内微量元素的含量，同时采用分阶段强化卤虫的方式进一步提高了卤虫营养元素的强化效果，利用强化后的卤虫对日本沼虾幼体进行喂食，能够显著提升沼虾幼体的成活率。

附图说明

图1为本发明实施例1中对照组与强化后的卤虫微量元素含量对比图；

图2为本发明实施例2中对照组与强化后的卤虫微量元素含量对比图；

图3为本发明实施例3中为强化的日本沼虾幼体对照组与强化后的幼体成活率对比图。

具体实施方式：

实施例1

一种促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，具体方法包括以下步骤：

步骤一，采用高度浓缩小球藻为富集微量元素载体，其中小球藻的湿重为7×10¹⁰cells g⁻¹；

步骤二，配制浓度为1000 mg L⁻¹的硫酸铜溶液和浓度为500 mg L^-1的硫酸锌溶液；

步骤三，取步骤一的高度浓缩小球藻 10 g加入步骤二配制好的3 ml硫酸铜溶液和3 ml硫酸锌溶液的混合溶液中进行富集微量元素铜和锌，富集1-3h，存活或死亡的海水小球藻均可富集适量浓度微量元素铜和锌；

步骤四，将步骤二富集微量元素铜和锌后的小球藻取出；放入养殖有卤虫的水槽中，同时加入乳化型鱼油和酵母硒对卤虫进行强化，强化过程温度为28±0.5℃、pH 7.8-8.2、溶解氧大于6 mg/L、盐度20‰，加入乳化型鱼油和酵母硒的量与水槽养殖液的质量体积比均为2mg/L，强化时间8-12h。

对以上强化后的卤虫进行营养元素测定，同时与未进行强化的对照组进行对比，结果见图1，可以看出，强化后的卤虫铜元素含量达到了35（μg/g干物质）左右，是未强化的对照组含量的3倍以上，锌元素的含量将近60（μg/g干物质），是未强化的对照组含量的2倍以上，而未强化的对照组中并没有检测出硒元素的含量，在强化后的卤虫中能够明显检测到硒元素含量。

实施例2

一种促进日本沼虾幼体发育的微量元素营养强化方法，具体方法包括以下步骤：

步骤一，采用高度浓缩小球藻为富集微量元素载体，其中小球藻的湿重为7×10¹⁰cells g⁻¹；

步骤二，配制浓度为500 mg L⁻¹的硫酸铜溶液和浓度为200 mg L^-1的硫酸锌溶液；

步骤三，取步骤一的高度浓缩小球藻10 g加入步骤二配制好的5 ml硫酸铜溶液和 5 ml硫酸锌溶液的混合溶液中进行富集微量元素铜和锌，富集1-3h，存活或死亡的海水小球藻均可富集适量浓度微量元素铜和锌；

步骤四，将步骤二富集微量元素铜和锌后的小球藻取出；放入养殖有卤虫的水槽中，同时加入乳化型鱼油和酵母硒对卤虫进行强化，强化的过程分两个阶段进行，第一阶段为将水槽中通入氧气并将体系温度升温至30-32℃，保持1-2h，然后加入乳化型鱼油，加入乳化型鱼油与水槽养殖液的质量体积比为1mg/L，保持1-2h，然后再加入酵母硒，保持1-2h，加入酵母硒的量与乳化型鱼油的量相同；然后将体系温度降为15-18℃，保持8-10h，进入第二阶段，在保持体系温度为15-18℃的条件下加入乳化型鱼油和酵母硒，加入的乳化型鱼油和酵母硒的量与水槽养殖液体系的质量体积比均为1mg/L，加入后维持体系溶氧量大于6mg/L，pH7.8-8.2，盐度20‰，在3-4h内将水槽养殖液体系温度升至30℃，保持1-2h，强化完成。

对于以上强化后的卤虫进行营养元素检测，并与未做强化的对照组进行对比，结果见图2，可以看出，强化后的卤虫铜元素含量超过了40（μg/g干物质），是对照组的4倍以上，强化后卤虫锌元素含量达到了70（μg/g干物质）以上，是未强化的对照组的3倍以上，而硒的含量也更加明显。

本实施例与实施例1相比，在微量元素对卤虫的强化方法上进行了改变，其中本实施例采用了两个阶段对卤虫进行强化，通过最终结果可以看出，本实施例强化后卤虫体内微量元素含量明显高于按照实施例1的方式强化后的微量元素含量。本实施例中通过两个阶段对卤虫进行强化，提高了卤虫对营养元素的吸收，增加了强化后卤虫体内营养元素的含量，提升了品质，能够更好地作为营养强化饲料对日本沼虾幼体进行强化。

实施例3

在工厂化育苗中，将卤虫按以上实施例所述的方法强化后，对日本沼虾幼体每天投喂卤虫20-30个/L，共投喂22天。幼体的发育状况表明，与对照组为投喂强化卤虫相比，营养强化后的卤虫对日本沼虾幼体的成活率有显著的促进作用，能够促进幼体的蜕皮变态，进而减小青虾幼体自残现象的发生。如图3所示，强化后的幼体成活率相对于为强化的对照组成活率提高了15%以上。