本发明涉及农药领域，具体而言，涉及一种用于防治植物青枯病的药物配方、药剂及其制备方法与应用。
背景技术：
青枯病，是由青枯病菌侵染所致的，其主要表现为：最初，地上部分未见任何异常现象的植株，白天突然失去生机，整个地上部均枯萎，阴天和早晚会有所恢复，如同健株；然而，不久之后便枯萎，呈青枯症状。这一过程进展十分迅猛，是一种广泛分布于热带、亚热带和某些温带地区的世界性病害，是多种经济作物减产的主要原因。
以烟草为例，当青枯病菌侵染烟草后，会引起烟株维管束发生严重病变，最显著的症状是枯萎，在我国俗称为“烟瘟”、“半边疯”。烟草青枯病是烟草种植的毁灭性病害，一旦发病，基本无药可治。目前烟草青枯病已经广泛存在于我国各烟区，给我给烟草种植带来极大损失。湖南烟区青枯病发病率一般为10-30％，严重时高达40-85％。早在2008年全国16个省的病虫害调查结果就显示:青枯病的发生面积为74.70万亩，产量损失为763.93万千克，经济损失高达,11522.15万元。
目前，对烟草青枯病的防治主要以化学农药为主。由于目前还无有效的对烟草青枯病潜伏期的无损监测技术，所以在大田种植时，基本都是发病了才施用农药，但此时用药基本没有效果了。所以采用化学农药来防治烟草青枯病，实践证明防治效果较差，不能满足烟草种植的需求。此外，长期施用农药不但会导致青枯菌产生抗药性，造成土壤、水体、大气的严重污染，破坏了生态平衡，而且影响烟叶品质，危害人体健康。大量施用农药已经有违农业绿色可持续发展的战略。因此，通过大量的施用农药来防治病害已不可取。
技术实现要素：
本发明的第一目的在于提供一种用于防治植物青枯病的药物配方，通过该药物配方制备的药剂对青枯草菌具有很好的抑菌作用，能够有效抑制青枯病菌对植物的侵染，从而有效预防和治疗植物的青枯病。
本发明的第二目的在于提供一种上述用于防治植物青枯病的药剂的制备方法，通过该方法所制得的药剂的药效好，且该方法工艺简单、对设备需求低，易于工业化大生产。
本发明的第三目的在于提供上述药剂在防治烟草青枯病中的应用。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
一种用于防治植物青枯病的药物配方，该药物配方按重量份数计包括：
苦豆子7～9份、山鸡椒5～7份、博落回7～9份、苍耳子6～9份、艾叶6～9份、紫茎泽兰8～10份、及大蒜0.5～1.5份。
一种用于防治植物青枯病的药剂，该药剂由上述药物配方制备得到。
一种用于防治植物青枯病的药剂的制备方法，其包括：
按重量份数将苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、以及紫茎泽兰混合后，以80～95wt％的醇溶液为溶剂进行提取，得到第一提取物；按重量份数将大蒜用极性溶剂进行提取，得到第二提取物；将第一提取物与第二提取物混合。
一种上述药剂在防治烟草青枯病中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
通过本发明提供的药物配方制备的药剂，其对青枯草菌具有很好的抑菌作用，能够有效抑制青枯病菌对植物的侵染，且能有效防止青枯病菌产生抗药性，从而有效预防和治疗植物的青枯病，尤其适用于烟草青枯病的防治，降低青枯病对经济作物的产量的影响。此外，该药物配方中的药材均来源于天然植物，绿色环保，不会对土壤和环境造成污染、且药材廉价易得。本发明提供的这种药剂的制备方法，针对不同药材的性质，采用不同的提取溶剂，将大蒜进行单独提取，将其它药材进行混合提取，有助于提高药物配方中的各药材中有效成分的提取效率，从而增大药效。此外，这种制备方法工艺简单、对设备需求低，易于工业化大生产。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本实施方式提供一种用于防治植物青枯病的药物配方，该药物配方包括：
苦豆子7～9份、山鸡椒5～7份、博落回7～9份、苍耳子6～9份、艾叶6～9份、紫茎泽兰8～10份、及大蒜0.5～1.5份。
为进一步提高该药物配方制成的药剂防治青枯病的药效，优选的，该药物配方按重量份数计包括：苦豆子8份、山鸡椒6份、博落回8份、苍耳子8份、艾叶7份、紫茎泽兰9份、及大蒜1份。
该药物配方中，苦豆子、山鸡椒、博落回、紫茎泽兰以及大蒜均具有一定的抑菌消毒的作用，其中，苦豆子主要含生物碱类成分，如槐果碱、苦参碱、槐胺碱、苦豆碱等，苦豆子总生物碱有抗炎杀菌的功效。山鸡椒，具有抗真菌作用。博落回，其主要成分为生物碱，如血根碱、白屈菜红碱、博落回碱等，具有杀虫抑菌的功效，对某些细菌及真菌有较好的抑制作用。大蒜，其中的含硫化合物具有奇强的抗菌消炎作用，对多种球菌、杆菌、真菌和病毒等均有抑制和杀灭作用，是当前发现的天然植物中抗菌作用最强的一种。
此外，苍耳子，在中医中具有发散止痒的功效；艾叶，在中医中具有温经止痛的功效。在本发明中，发明人通过多次研究实践发现，在该药物配方中加入苍耳子和艾叶，能够协同性的增强苦豆子、山鸡椒、博落回、紫茎泽兰以及大蒜这几味药物对青枯菌的抑菌能力，从而大幅提高由该药物配方所制得的药剂防治植物青枯病的能力。
本法明实施方式提供的这种药物配方所制备的药剂，通过上述配方中的药材之间的相互配伍以及对各药材的具体比例的优化，使得该药剂对青枯草菌具有很好的抑菌作用，能够有效抑制青枯病菌对植物的侵染，且能有效防止青枯病菌产生抗药性，从而有效预防和治疗植物的青枯病，尤其适用于烟草青枯病的防治，降低青枯病对经济作物的产量的影响。
此外，相比于现有的化学农药，该药物配方中的药材均来源于天然植物，绿色环保，不会对土壤和环境造成污染、且廉价易得。
在本发明较佳的实施例中，该药物配方还进一步包括按重量份数计的2～4份的黄连、及2～5份的苦参。黄连和苦参中均含有丰富的生物碱成分，在该药物配方中加入黄连和苦参，能够进一步的增强其抑制青枯菌的功效。
较为优选的，本实施方式还提供一种用于防治植物青枯病的药剂，其制备方法包括：
S1：按重量份数将苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、以及紫茎泽兰混合后，以80～95wt％的醇溶液为溶剂进行提取，得到第一提取物。
苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、以及紫茎泽兰这几味药材的主要活性成分为生物碱，此外还有一些黄酮和脂肪油类成分，在本实施方式中，以80～95wt％的醇溶液为溶剂进行提取，溶剂的极性适中，有利于较为全面的将药材中的有效活性成分提取出来。所得到的提取液，经过减压浓缩后，得到第一提取物。
制备第一提取物的提取方法为溶剂提取法，比如采用加热回流提取法、超声波震荡提取法、浸渍法、渗漉法等。在本发明较佳的实施例中，优先采用超声回流提取法，即将混合后的药材用80～95wt％的醇溶液在55～65℃下保温超声回流2～4h，超声频率为40～45kHz，功率为40～50W。
S2:按重量份数将大蒜用极性溶剂进行提取，得到第二提取物。
大蒜中的活性成分为生物碱，其易溶于极性溶剂中，且其为该药剂中主要发挥抑菌活性的成分，为了提高大蒜中有效成分的溶出率，在本发明较佳的实施例中，以水为溶剂，采用声波震荡提取法进行提取，提取完成后，过滤得滤液，浓缩至一定体积后，得到第二提取物。
因此，本发明提供的这种药剂的制备方法，针对不同药材的性质，采用不同的提取溶剂，将大蒜进行单独提取，将其它药材进行混合提取，有助于提高药物配方中各药材的有效成分的提取效率，从而增大该药剂的药效。
进一步的，在本发明较佳的实施例中，将第一提取物和第二提取物与表面活性剂混合，得到混合药剂。加入表面活性剂，提高第一提取物与第二提取物的混合效果，避免混合药剂中出现分层或者混合不均的现象。须注意，此处既可以是第一提取物先与表面活性剂混合，最后再与第二提取物混合；这种方式可以有效避免第一提取物的浪费，即第一提取物粘附在容器壁上，难以溶解下来。当然也可以是，表面活性剂先与第二提取物混合，最后再与第一提取物混合。优选的，表面活性剂包括但不限于：十二烷基苯磺酸钙、木质素磺酸钠、木质素磺酸钙、十二烷基磺酸钠。
S3：将第一提取物与第二提取物混合，得到混合药剂。
这种药剂的制备方法，针对不同原料的性质，采用不同的提取溶剂，将大蒜进行单独提取，将其它材料进行混合提取，有助于提高原料中各药材中有效成分的提取效率，从而增大药效。此外，这种制备方法工艺简单、对设备需求低，易于工业化大生产。
进一步的，为了减缓混合药剂的降解速率，在本发明较佳的实施例中，将混合药剂负载于多孔性吸附载体上，形成缓释药剂。在该缓释药剂中，混合药剂位于多孔性吸附载体的孔道内，当其施用到植物上后，药剂会缓慢而持续的被多孔性吸附载体释放，从而延长混合药剂的降解时间，使其更加长效发挥防治青枯病的功效。优选的，多孔性吸附载体包括白炭黑、高岭土、氧化铝、硅藻土、沸石、以及膨润土中的一种或多种，更为优选的，多孔性吸附载体为白炭黑。进一步，为了保证较好的缓释效果，混合药剂与多孔性吸附载体的质量比为1：0.45～1.5，该质量比优选为1：1。
为了进一步的减慢混合药剂的释放速度，在本发明较佳的实施例中，将混合药剂负载于多孔性吸附载体后，再将所得到的混合物与孔道封闭材料混合，孔道封闭材料包括液体石蜡、海藻酸盐、矿物油、聚乙二醇、麦芽糖糊精中的一种或多种。通过孔道封闭材料的使用，将混合药剂相对稳定的限制在多孔性吸附载体的孔道中，使其释放时间更加缓慢，从而达到更好的缓释效果。优选的，为了保证较佳的缓释效果，混合药剂与孔道封闭材料的质量比为1：0.035～0.38，更为优选的，该质量比为1：0.18。
更进一步的，将与孔道封闭材料混合后的药剂与其他辅料混合，制成粉剂或者颗粒剂等方便施用的剂型，该辅料可以为粘土粉末或农药领域中的常用辅料。
本实施方式还提供一种用于防治植物青枯病的药剂的制备方法，该药剂的药物配方包括：苦豆子7～9份、山鸡椒5～7份、博落回7～9份、苍耳子6～9份、艾叶6～9份、紫茎泽兰8～10份、及大蒜0.5～1.5份。该药剂的制备方法包括：按重量份数将苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、以及紫茎泽兰混合后，以80～95wt％的醇溶液为溶剂进行提取，得到第一提取物；按重量份数将大蒜用极性溶剂进行提取，得到第二提取物；将第一提取物与第二提取物混合。这种制备方法工艺简单、对设备需求低，易于工业化大生产，且所制备的药剂的药效好。
本实施方式还提供一种上述药剂在防治植物青枯病中的应用。发明人通过多次试验证实，该药剂对多种植物的青枯病均具有较好的防治作用，比如对烟草、小麦、水稻、番茄等农作物，而其中，该药剂对烟草青枯病的防治效果更加。
该药剂在使用时，较为优选的方式是，分为两次施入至植物根系周围的土壤中，其中第一次为在烟草以前随基肥一并施入；第二次为随烟草追肥一并施在烟株的根茎结合部周围，两次施用的药剂的量基本保持一致。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述：
实施例1
本实施例提供一种用于防治植物青枯病的药剂，该药剂的药物配方按重量份数计包括：
苦豆子7份、山鸡椒5份、博落回9份、苍耳子6份、艾叶6份、紫茎泽兰8份、及大蒜1.5份。
该药剂的制备方法为：
a.将上述苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、以及紫茎泽兰混合后，用80wt％的甲醇溶液对其进行加热回流提取，将所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第一提取物；
b.将大蒜用水进行声波震荡提取，所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第二提取物；
c.将第一提取物与第二提取物混合，再与辅料混合，制得该药剂。
实施例2
本实施例提供一种用于防治植物青枯病的药剂，该药剂的药物配方按重量份数计包括：
苦豆子9份、山鸡椒7份、博落回7份、苍耳子9份、艾叶9份、紫茎泽兰10份、及大蒜0.5份。
该药剂的制备方法为：
a.将上述苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、以及紫茎泽兰混合后，采用声波震荡提取法，以95wt％的乙醇溶液对其进行提取，将所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第一提取物；
b.将大蒜用水进行煎煮提取，所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第二提取物；
c.将第一提取物与第二提取物混合，再与辅料混合，制得该药剂。
实施例3
本实施例提供一种用于防治植物青枯病的药剂，该药剂的药物配方按重量份数计包括：
苦豆子8份、山鸡椒6份、博落回8份、苍耳子8份、艾叶7份、紫茎泽兰9份、及大蒜1份。
该药剂的制备方法为：
a.将上述苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、以及紫茎泽兰混合后，采用超声回流提取法，将混合后的药材用90wt％的乙醇溶液在60℃下保温超声回流3h，超声频率为42kHz，功率为45W。将所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第一提取物；
b.将大蒜用水进行声波震荡提取，所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第二提取物；
c.将第一提取物与第二提取物混合，再与辅料混合，制得该药剂。
实施例4
本实施例提供一种用于防治植物青枯病的药剂，该药剂的药物配方按重量份数计包括：
苦豆子8份、山鸡椒6份、博落回8份、苍耳子8份、艾叶7份、紫茎泽兰9份、大蒜1份、黄连2份、及苦参5份。
该药剂的制备方法为：
a.将上述苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、紫茎泽兰、黄连和苦参混合后，采用超声回流提取法，将混合后的药材用90wt％的乙醇溶液在60℃下保温超声回流3h，超声频率为42kHz，功率为45W。将所得提取液进行过滤并减压浓缩至固体，随后加入少量水以及十二烷基苯磺酸钙，使所得到的固体全部溶于水中并混合均匀，得到第一提取物；
b.将大蒜用水进行声波震荡提取，所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第二提取物；
c.将第一提取物与第二提取物混合，再与辅料混合，制得该药剂。
实施例5
本实施例提供一种用于防治植物青枯病的药剂，该药剂的药物配方按重量份数计包括：
苦豆子8份、山鸡椒6份、博落回8份、苍耳子8份、艾叶7份、紫茎泽兰9份、大蒜1份、黄连4份、及苦参2份。
该药剂的制备方法与实施例4基本一致。
实施例6
本实施例提供一种用于防治植物青枯病的药剂，该药剂的药物配方按重量份数计包括：
苦豆子8份、山鸡椒6份、博落回8份、苍耳子8份、艾叶7份、紫茎泽兰9份、大蒜1份、黄连3份、及苦参4份。
该药剂的制备方法与实施例4基本一致。
实施例7
本实施例提供一种用于防治植物青枯病的缓释型药剂，该药剂的药物配方按重量份数计包括：
苦豆子8份、山鸡椒6份、博落回8份、苍耳子8份、艾叶7份、紫茎泽兰9份、大蒜1份。
该药剂的制备方法为：
a.将上述苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、以及紫茎泽兰混合后，采用超声回流提取法，将混合后的药材用90wt％的乙醇溶液在60℃下保温超声回流3h，超声频率为42kHz，功率为45W。将所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第一提取物；
b.将大蒜用水进行声波震荡提取，所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第二提取物；
c.将第一提取物与第二提取物混合，得到混合药剂。
d.将混合药剂与白炭黑按照1：0.6的质量比混合，使混合药剂负载于白炭黑的孔道内，再将其与辅料混合，得到该药剂。
实施例8
本实施例提供一种用于防治植物青枯病的缓释型药剂，该药剂的药物配方按重量份数计包括：
苦豆子8份、山鸡椒6份、博落回8份、苍耳子8份、艾叶7份、紫茎泽兰9份、大蒜1份、黄连3份、及苦参4份。
该药剂的制备方法为：
a.将上述苦豆子、山鸡椒、博落回、苍耳、艾叶、紫茎泽兰、黄连及苦参混合后，采用超声回流提取法，将混合后的药材用90wt％的乙醇溶液在60℃下保温超声回流3h，超声频率为42kHz，功率为45W。将所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第一提取物；
b.将大蒜用水进行声波震荡提取，所得提取液进行过滤并减压浓缩，得到第二提取物；
c.将第一提取物与第二提取物混合，得到混合药剂。
d.将混合药剂与硅藻土按照1：1的质量比混合，使混合药剂负载于白炭黑的孔道内，随后再将其与液体石蜡混合以封闭白炭黑的孔道的入口和出口，其中混合药剂与液体石蜡的质量比为1：0.18。最后，再将其与辅料混合，得到该药剂。
实验例1
本实验例为实施例中的药剂对烟草青枯病的防治试验：
在湖南湘西保靖县千陵基地大田试验，选取上年度烟草青枯病发病严重的烟田进行随机分组试验，设置10个实验组，每个实验组的日常管理一致。其中：第1～8组分别施用本发明实施例1～8中提供的药剂。使用方法：药剂分二次施入，第一次在移栽烟草以前随基肥一并施入，每亩用量0.5kg。第二次随烟草追肥一并施在烟株根茎结合部周围，每亩用量0.5kg。第9组为常规对照组，此为目前采用的常规防治方式，即：采用72％硫酸链霉素，稀释1500倍后的溶液为药液，在移栽烟草7天后灌根1次，在施追肥时候叶面喷洒一次。第10组为空白对照组，即在在移栽烟草7天后施用等量的清水，在施追肥时候叶面喷洒一次清水。
在烟草移栽30天和70天时，根据GB/T 2322-2008统计病级数，然后计算防治效果、病情指数，计算方法如下：
表1烟草根系发育情况及青枯病防治效果
如表1所示，烟草移栽后30天，实施例1～8中提供的药剂和硫酸链霉素处理的烟草的病情指数和防治效果相当，统计学上无显著差异。这说明本发明提高的药剂对烟草青枯病的防治效果与硫酸链霉素相当，而本发明提供的药剂为植物源农药，绿色健康，对环境无污染。
移栽后70天，实施例1～6中提供的药剂处理后的烟草的病情指数低于硫酸链霉素组，防治效果也稍高于硫酸链霉素组。说明本发明实施例1～6提供的药剂相对于硫酸链霉素，药效持续的时间长，对烟草青枯病的防治效果好。
而更加需要注意的是，移栽后70天，实施例1～8中提供的药剂处理后的烟草的病情指数极显著低于硫酸链霉素组，防治效果也极显著高于硫酸链霉素组，尤其以实施例7和8的效果更佳，说明实施例7和8提供的药剂的缓释效果好，能够长效的防治青枯菌对烟草的侵染。
实验例2
本实验例为该药剂的平板抑菌效果实验：
分别取实施例3、6～8提供的药剂10g溶解于90ml蒸馏水中，每隔5天取溶液，通过平板抑菌试验，测定不同实施例提供的药剂对青枯菌的抑制率，结果如表2所示：
表2药剂缓释效果研究
由表2可知，本实施例3、6～8提供的药剂对青枯菌有较好的抑制作用，其中实施例7和8提供的药剂具有极好的缓释效果，以实施例8最佳。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。