本发明属于植物种子休眠
技术领域：
，尤指一种打破定心藤种子休眠的方法。
背景技术：
：定心藤为茶茱萸科定心藤属植物，又名甜果藤、铜钻。定心藤以根或藤茎入药，为瑶族常用药材“十八钻”之一，性平，味微苦、涩，具有传经走脉、祛风除湿、调经活血、清热解毒和消肿止痛的功效，用于黄疸型肝炎、风湿痹痛、月经不调、痛经、闭经、产后风痛、心慌心跳、尿频尿急、风湿关节炎、类风湿性关节炎；外用治跌打损伤、毒蛇咬伤。定心藤分布在我国广西、广东、云南、贵州、福建、湖南等省区，主要产于广西的武鸣、上林、融水、桂林、临桂、兴安、龙胜、藤县、蒙山、上思、东兴、平南、容县、那坡、凌云、贺州、钟山、罗城、金秀等地。定心藤地域分布零散且蕴藏量稀少。随着人们生活水平的提高和健康意识的增强，定心藤的市场需求量逐年攀升，野生资源遭到过度采挖，濒临枯竭。自然条件下，定心藤主要依靠种子进行繁殖，但是定心藤的种子数量极为稀少，且存在休眠特性，即在自然状态下萌发时间长、发芽率低，给科学研究和引种栽培带来极大困难。目前，现有技术中也没有关于打破定心藤种子休眠的报道。技术实现要素：本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。本发明还有一个目的是提供一种打破定心藤种子休眠的方法，其能快速解除定心藤的种子休眠，显著提高了其种子萌发率，为定心藤的繁殖和规模化种植提供有力的保障。本发明提供的一种打破定心藤种子休眠的方法，包括以下步骤：将经过预处理的定心藤种子完全浸泡于浸种剂溶液中，浸种剂溶液包括以下组分：赤霉素50～200mg/l，灵发素10～40mg/l，双氧水200～800mg/l，硝酸钾10～30mg/ml，浸泡时间为24h。优选的是，浸种剂溶液包括以下组分：赤霉素100mg/l，灵发素10mg/l，双氧水400mg/l，硝酸钾30mg/ml，浸泡时间为24h。优选的是，用浸种剂浸泡定心藤种子之前需要对其预处理，预处理包括以下步骤：1)采集种子：采集成熟的定心藤果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损、无病虫害的种子备用；2)种子消毒：将步骤1)挑选的种子置于质量分数为2％的次氯酸钠溶液浸泡25min，再置于质量分数为1％的过氧化氢溶液浸泡30min，蒸馏水冲洗5次，其中次氯酸钠溶液经搅拌器充分搅拌以排除其内部气泡；3)温水处理：将步骤2)消毒处理过的种子放入45℃温水中浸泡48h。优选的是，预处理的步骤2)中将消毒处理之后的种子放于磁场强度为100mt的磁场中处理3min，然后置于6-苄基腺嘌呤、三十烷醇、油菜素内酯的混合液中浸泡2h，取出后用紫外灯进行照射30s，关闭紫外灯静置5min，再放入由硫酸锌、硫酸锰、硒酸铵组成的微量元素溶液中浸泡30min，如此连续循环处理3次，之后再经过步骤3)放入45℃温水中浸泡48h；其中，6-苄基腺嘌呤的含量为20～30mg/l，三十烷醇含量为10～40mg/l，油菜素内酯含量为5～10mg/l紫外灯采用波长为275～320nm的uvb紫外线，硫酸锌、硫酸锰、硒酸铵的重量比为4:2:1，其混合后在微量元素溶液中的含量为5ml/l。优选的是，将预处理后经浸种剂浸泡过的定心藤种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，并盖上盖子，最后将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，其温度设为24℃，湿度为60～70％，时间为30天。优选的是，光照和黑暗培养分为两个阶段：第一阶段光照培养5h和暗培养6h，其中光照强度为2200～3400lx；第二阶段为光照培养7h和暗培养6h，其中光照强度为3700～4800lx。优选的是，每三天向恒温培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中气体的含氧量为20～22％。优选的是，预处理的步骤2)中的次氯酸钠溶液始终处于黑暗避光的空间内，搅拌器转速为50r/min。本发明所能达到的功效增进为：1.本发明的打破定心藤种子休眠的方法，采用自配的浸种剂浸种处理，能够有效解除定心藤种子休眠的各种因素，包括种皮障碍和萌发抑制物等，提高定心藤种子吸水能力，最终促进种子打破休眠，提高种子萌发率。2.本发明的打破定心藤种子休眠的方法，将消毒浸泡的种子进行磁化-浸泡-紫外灯照射-浸泡的循环处理，有效诱导种子内细胞的分裂和分化，在唤醒种子的同时，补充其所需的微量元素，进一步提高了定心藤种子的萌发率。在培养箱中通入氧气，保证了定心藤种子在萌发的过程中对氧气的需求量促进种子的新陈代谢。3.本发明属首次对打破定心藤种子休眠技术的研究成果，快速解除定心藤的种子休眠，显著提高了其种子萌发率，同时本发明方法操作简便、成本低、实用性强、无污染以及易推广，为定心藤的繁殖和规模化种植提供有力的保障，具有较强的实用性和推广价值以及良好的经济效益和社会效益。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。具体实施方式下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。<实施例1>一种打破定心藤种子休眠的方法，包括以下步骤：用浸种剂浸泡定心藤种子之前需要对其预处理，预处理包括以下步骤：1)采集种子：采集成熟的定心藤果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损、无病虫害的种子备用；2)种子消毒：将步骤1)挑选的种子置于质量分数为2％的次氯酸钠溶液浸泡25min，再置于质量分数为1％的过氧化氢溶液浸泡30min，蒸馏水冲洗5次，其中次氯酸钠溶液经搅拌器充分搅拌以排除其内部气泡；3)温水处理：将步骤2)消毒处理过的种子放入45℃温水中浸泡48h。将经过预处理的定心藤种子完全浸泡于浸种剂溶液中，浸种剂溶液包括以下组分：赤霉素50mg/l，灵发素10mg/l，双氧水200mg/l，硝酸钾10mg/ml，浸泡时间为24h。将预处理后经浸种剂浸泡过的定心藤种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，并盖上盖子，最后将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，其温度设为24℃，湿度为60～70％，时间为30天。<实施例2>一种打破定心藤种子休眠的方法，包括以下步骤：用浸种剂浸泡定心藤种子之前需要对其预处理，预处理包括以下步骤：1)采集种子：采集成熟的定心藤果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损、无病虫害的种子备用；2)种子消毒：将步骤1)挑选的种子置于质量分数为2％的次氯酸钠溶液浸泡25min，再置于质量分数为1％的过氧化氢溶液浸泡30min，蒸馏水冲洗5次，其中次氯酸钠溶液经搅拌器充分搅拌以排除其内部气泡；3)温水处理：将步骤2)消毒处理过的种子放入45℃温水中浸泡48h。将经过预处理的定心藤种子完全浸泡于浸种剂溶液中，浸种剂溶液包括以下组分：赤霉素100mg/l，灵发素10mg/l，双氧水400mg/l，硝酸钾30mg/ml，浸泡时间为24h。将预处理后经浸种剂浸泡过的定心藤种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，并盖上盖子，最后将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，其温度设为24℃，湿度为60～70％，时间为30天。<实施例3>一种打破定心藤种子休眠的方法，包括以下步骤：用浸种剂浸泡定心藤种子之前需要对其预处理，预处理包括以下步骤：1)采集种子：采集成熟的定心藤果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损、无病虫害的种子备用；2)种子消毒：将步骤1)挑选的种子置于质量分数为2％的次氯酸钠溶液浸泡25min，再置于质量分数为1％的过氧化氢溶液浸泡30min，蒸馏水冲洗5次，其中次氯酸钠溶液经搅拌器充分搅拌以排除其内部气泡；3)温水处理：将步骤2)消毒处理过的种子放入45℃温水中浸泡48h。将经过预处理的定心藤种子完全浸泡于浸种剂溶液中，浸种剂溶液包括以下组分：赤霉素200mg/l，灵发素40mg/l，双氧水800mg/l，硝酸钾30mg/ml，浸泡时间为24h。将预处理后经浸种剂浸泡过的定心藤种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，并盖上盖子，最后将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，其温度设为24℃，湿度为60～70％，时间为30天。<实施例4>本发明提供的一种打破定心藤种子休眠的方法，包括以下步骤：用浸种剂浸泡定心藤种子之前需要对其预处理，预处理包括以下步骤：1)采集种子：采集成熟的定心藤果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损、无病虫害的种子备用；2)种子消毒：将步骤1)挑选的种子置于质量分数为2％的次氯酸钠溶液浸泡25min，再置于质量分数为1％的过氧化氢溶液浸泡30min，蒸馏水冲洗5次，其中次氯酸钠溶液经搅拌器充分搅拌以排除其内部气泡；3)温水处理：将步骤2)消毒处理过的种子放入45℃温水中浸泡48h。预处理的步骤2)中将消毒处理之后的种子放于磁场强度为100mt的磁场中处理3min，然后置于6-苄基腺嘌呤、三十烷醇、油菜素内酯的混合液中浸泡2h，取出后用紫外灯进行照射30s，关闭紫外灯静置5min，再放入由硫酸锌、硫酸锰、硒酸铵组成的微量元素溶液中浸泡30min，如此连续循环处理3次，之后再经过步骤3)放入45℃温水中浸泡48h。其中，6-苄基腺嘌呤的含量为20mg/l，三十烷醇含量为10mg/l，油菜素内酯含量为5mg/l紫外灯采用波长为275nm的uvb紫外线，硫酸锌、硫酸锰、硒酸铵的重量比为4:2:1，其混合后在微量元素溶液中的含量为5ml/l。将经过预处理的定心藤种子完全浸泡于浸种剂溶液中，浸种剂溶液包括以下组分：赤霉素50mg/l，灵发素10mg/l，双氧水200mg/l，硝酸钾10mg/ml，浸泡时间为24h。将预处理后经浸种剂浸泡过的定心藤种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，并盖上盖子，最后将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，其温度设为24℃，湿度为60～70％，时间为30天。其中，光照和黑暗培养分为两个阶段：第一阶段光照培养5h和暗培养6h，其中光照强度为2200lx；第二阶段为光照培养7h和暗培养6h，其中光照强度为3700lx。此外，每三天向恒温培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中气体的含氧量为20％。预处理的步骤2)中的次氯酸钠溶液始终处于黑暗避光的空间内，搅拌器转速为50r/min。<实施例5>本发明提供的一种打破定心藤种子休眠的方法，包括以下步骤：用浸种剂浸泡定心藤种子之前需要对其预处理，预处理包括以下步骤：1)采集种子：采集成熟的定心藤果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损、无病虫害的种子备用；2)种子消毒：将步骤1)挑选的种子置于质量分数为2％的次氯酸钠溶液浸泡25min，再置于质量分数为1％的过氧化氢溶液浸泡30min，蒸馏水冲洗5次，其中次氯酸钠溶液经搅拌器充分搅拌以排除其内部气泡；3)温水处理：将步骤2)消毒处理过的种子放入45℃温水中浸泡48h。预处理的步骤2)中将消毒处理之后的种子放于磁场强度为100mt的磁场中处理3min，然后置于6-苄基腺嘌呤、三十烷醇、油菜素内酯的混合液中浸泡2h，取出后用紫外灯进行照射30s，关闭紫外灯静置5min，再放入由硫酸锌、硫酸锰、硒酸铵组成的微量元素溶液中浸泡30min，如此连续循环处理3次，之后再经过步骤3)放入45℃温水中浸泡48h。其中，6-苄基腺嘌呤的含量为25mg/l，三十烷醇含量为30mg/l，油菜素内酯含量为7mg/l紫外灯采用波长为300nm的uvb紫外线，硫酸锌、硫酸锰、硒酸铵的重量比为4:2:1，其混合后在微量元素溶液中的含量为5ml/l。将经过预处理的定心藤种子完全浸泡于浸种剂溶液中，浸种剂溶液包括以下组分：赤霉素100mg/l，灵发素10mg/l，双氧水400mg/l，硝酸钾30mg/ml，浸泡时间为24h。将预处理后经浸种剂浸泡过的定心藤种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，并盖上盖子，最后将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，其温度设为24℃，湿度为60～70％，时间为30天。其中，光照和黑暗培养分为两个阶段：第一阶段光照培养5h和暗培养6h，其中光照强度为2600lx；第二阶段为光照培养7h和暗培养6h，其中光照强度为4000lx。此外，每三天向恒温培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中气体的含氧量为22％。预处理的步骤2)中的次氯酸钠溶液始终处于黑暗避光的空间内，搅拌器转速为50r/min。<实施例6>本发明提供的一种打破定心藤种子休眠的方法，包括以下步骤：用浸种剂浸泡定心藤种子之前需要对其预处理，预处理包括以下步骤：1)采集种子：采集成熟的定心藤果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损、无病虫害的种子备用；2)种子消毒：将步骤1)挑选的种子置于质量分数为2％的次氯酸钠溶液浸泡25min，再置于质量分数为1％的过氧化氢溶液浸泡30min，蒸馏水冲洗5次，其中次氯酸钠溶液经搅拌器充分搅拌以排除其内部气泡；3)温水处理：将步骤2)消毒处理过的种子放入45℃温水中浸泡48h。预处理的步骤2)中将消毒处理之后的种子放于磁场强度为100mt的磁场中处理3min，然后置于6-苄基腺嘌呤、三十烷醇、油菜素内酯的混合液中浸泡2h，取出后用紫外灯进行照射30s，关闭紫外灯静置5min，再放入由硫酸锌、硫酸锰、硒酸铵组成的微量元素溶液中浸泡30min，如此连续循环处理3次，之后再经过步骤3)放入45℃温水中浸泡48h。其中，6-苄基腺嘌呤的含量为30mg/l，三十烷醇含量为40mg/l，油菜素内酯含量为10mg/l紫外灯采用波长为320nm的uvb紫外线，硫酸锌、硫酸锰、硒酸铵的重量比为4:2:1，其混合后在微量元素溶液中的含量为5ml/l。将经过预处理的定心藤种子完全浸泡于浸种剂溶液中，浸种剂溶液包括以下组分：赤霉素200mg/l，灵发素40mg/l，双氧水800mg/l，硝酸钾30mg/ml，浸泡时间为24h。将预处理后经浸种剂浸泡过的定心藤种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，并盖上盖子，最后将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，其温度设为24℃，湿度为60～70％，时间为30天。其中，光照和黑暗培养分为两个阶段：第一阶段光照培养5h和暗培养6h，其中光照强度为3400lx；第二阶段为光照培养7h和暗培养6h，其中光照强度为4800lx。此外，每三天向恒温培养箱中通入一次氧气，控制培养箱中气体的含氧量为21％。预处理的步骤2)中的次氯酸钠溶液始终处于黑暗避光的空间内，搅拌器转速为50r/min。<对比试验>取新鲜的定心藤种子播种于室外自然条件下的土地中作为对比例与实施例1～6一起进行萌发试验，30天后统计萌发率，如表1所示。表1实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5实施例6对比例萌发率/％82.185.783.289.393.691.544.6从表1可以看出，定心藤种子经预处理、浸种液浸泡、培养箱培养，能打破其休眠，有效提高定心藤种子的发芽率，其最佳浸种液配比为：赤霉素100mg/l，灵发素10mg/l，双氧水400mg/l，硝酸钾30mg/ml。特别地，在经过磁化-浸泡-紫外灯照射-浸泡的循环处理后，进一步打破休眠，发芽率明显提高。尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。当前第1页12