本发明涉及一种植物培养方法,尤其涉及一种袋鼠蕨(wart/kangaroofern,拉丁名microsorumscoiopendrium)种苗组培快繁方法。
背景技术:
袋鼠蕨,这容易生在热带的蕨类植物不仅是一个受欢迎的室内植物,而且可以非常优秀地被当作户外地被植物种植,或是装在篮子中置于阴暗的地方生长。它可以生长在排水性良好地基质中。
现有的袋鼠蕨主要采用的分株进行繁殖的方法,一棵袋鼠蕨一年只能繁殖出8~10棵,并需要大量的母本园,因其繁殖系数低,成本高,远不能满足市场的需要。组织培养法,它是一种利用植物细胞的全能性,离体培养植物组织小块,进行植物无性快繁的工厂化育苗技术,具体工艺是:选取袋鼠蕨幼嫩叶片,先诱导出愈伤组织,再分化出不定芽,再培育成可以移栽驯化的壮苗。一般情况下此过程需要12~24个月以上。而且需要较高的生产成本(包括培养基成本和培养条件耗费)等。所以现有的袋鼠蕨苗繁殖技术仍存在以下缺陷:繁殖速度较慢,组培繁殖出苗率低,成本较高。
技术实现要素:
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足,提供一种繁殖速度快、成本低且出苗率高的袋鼠蕨种苗组培快繁方法。
本发明所采用的技术方案是,该方法包括以下步骤:
(1)芽的诱导与分化:挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段并进行无菌处理,将经过无菌处理的带芽点茎段切成若干截,每一截含有一个芽点,插入由0.2~1.0mg/l的ba、0.02~0.05mg/l的naa和0.2~0.5mg/l的kt组成的1/2ms培养基中,培养温度为26~28度,光照2000~2500lux,光照时间每天12小时,培养6~8周后,芽点处分化出不定芽;
(2)无菌苗的增殖培养:取分化出的不定芽,置于由0.1~0.8mg/l的ba和0.1~0.4mg/l的kt组成的ms培养基中,培养6~8周,不定芽长出一丛小苗,把长出的一丛小苗分成4~8株,继续置于由0.1~0.8mg/l的ba和0.1~0.4mg/l的kt组成的培养基中,继续将小苗分成4~8株,如此反复分切,获得数量巨大的植株,上述培养环境要求为:26~28度,光照3000lux,每天光照12小时;
(3)无菌苗的移栽驯化:将经过步骤(2)处理的植株置于由0.3~1.0mg/l的iba、3%的糖和2g/l的活性炭组成的ms培养基中,光照3500lux,培养六周后,无菌苗出现3~4条1.5~2.5cm的根,长成3~5cm的植株后进行移栽驯化,洗净所述无菌苗根部的培养基并移栽入泥炭土和沙石比例为5:1的基质内,保持温度为25~28度,光照3000~7000lux,移栽后的第一周用无纺布覆盖,控制湿度85~95%,保持叶表面水雾不干。
进一步地,所述步骤(1)中,对袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段进行无菌处理的步骤为:将带芽点的茎段先用75%的酒精处理8~12秒,再在0.1%的升汞溶液中浸泡8~12分钟取出,然后用无菌水冲洗4~5次。
进一步地,所述步骤(1)中,挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段为幼嫩茎段。
本发明的有益效果是:本发明采用含有ba(0.2~1.0)mg/l和naa(0.02~0.05)mg/l和kt(0.2~0.5)mg/l的1/2ms培养基,可以有效促进袋鼠蕨芽点分化出不定芽;另外,本发明采用含有ba(0.1~0.8)mg/l、kt(0.1~0.4)mg/l的ms培养基作为增殖培养基,袋鼠蕨植株能旺盛分化出从芽;最后由含有iba(0.3~1.0)mg/l、糖3%和活性炭2g/l组成的ms培养基中培养六周即可快速生根。本发明通过直接诱导出袋鼠蕨不定芽,不定芽又直接快速增殖减少了愈伤组织的诱导这一步骤,简化培养条件或培养方式等工艺,可以降低生产成本,提高商品化生产的效率和利润,因此本发明的袋鼠蕨苗的快繁方法繁殖速度快,成本低。
具体实施方式
本发明公开了一种袋鼠蕨种苗组培快繁方法。以下通过具体实施例对本发明方法作进一步的说明。
(一)芽的诱导和分化
(1)挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的幼嫩茎段;
(2)将所述带芽点幼嫩茎段先用75%的酒精处理8~12秒,再在0.1%的升汞溶液中浸泡8~12分钟取出,然后用无菌水冲洗4~5次;
(3)取经升汞消毒后的带芽点幼嫩茎段,切成一截一截,每一截一个芽点,插入加有ba(0.2~1.0)mg/l和naa(0.02~0.05)mg/l和kt(0.2~0.5)mg/l的1/2ms培养基中;
(4)培养温度为26~28度,光照2000~2500lux,光照时间每天12小时,培养6~8周后,可见芽点处分化出不定芽。
(二)无菌苗的增殖培养
(1)取分化出的不定芽,置于ba(0.1~0.8)mg/l和kt(0.1~0.4)mg/l的ms培养基中,培养6~8周左右,不定芽可以很快长出一丛小苗。把一丛小苗分成4-8株,继续置于ba(0.1~0.8)mg/l和kt(0.1~0.4)mg/l的培养基中,每一丛苗又可以继续分成4~8株,如此反复分切,可以很快获得数量巨大的植株;
(2)培养环境要求为:26~28度,光照3000lux,每天光照12小时。
(三)无菌苗的移栽驯化
(1)所述植株置于由iba(0.3~1.0)mg/l、糖3%和活性炭2g/l组成的ms培养基中,光照3500lux,培养六周后,无菌苗有3~4条2cm左右的根,长成3~5cm的植株,可进行移栽驯化;
(2)栽前3~4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件;
(3)洗净所述无菌苗根部培养基并移栽入泥炭土和沙石比例为5:1的基质内;
(4)保持温度为25~28度,弱光条件(光照3000~7000lux),移栽后的第一周用无纺布覆盖,控制湿度85~95%,保持叶表面水雾不干。
和现有的袋鼠蕨种苗组培方法相比,本发明采用含有ba(0.2~1.0)mg/l和naa(0.02~0.05)mg/l和kt(0.2~0.5)mg/l的1/2ms培养基,可以有效促进袋鼠蕨芽点分化出不定芽;另外,本发明采用含有ba(0.1~0.8)mg/l、kt(0.1~0.4)mg/l的ms培养基作为增殖培养基,袋鼠蕨植株能旺盛分化出从芽;最后由含有iba(0.3~1.0)mg/l、糖3%和活性炭2g/l组成的ms培养基中培养六周即可快速生根;本发明通过直接诱导出袋鼠蕨不定芽,不定芽又直接快速增殖减少了愈伤组织的诱导这一步骤,简化培养条件或培养方式等工艺,可以降低生产成本,提高商品化生产的效率和利润;此外,本发明的繁殖时间大大缩短,半年时间内即可培育出大量的袋鼠蕨种苗,且出苗率极高。
本发明可应用于袋鼠蕨培育领域。