本发明属于植物组织培养技术范围内的试管苗生根技术，具体涉及一种提高甘蔗试管苗生根率和存活率的技术。
背景技术
植物组织培养一般要经过四个阶段，即初代培养（或建立无菌培养体系）、继代增殖培养、生根培养和炼苗移栽。目前，已在生产上大规模应用的甘蔗试管苗快速繁育技术也包括了以上四个阶段。然而这种传统的甘蔗试管苗生产过程复杂，且对培养环境条件高，致使甘蔗组织培养工厂化生产试管苗的成本居高不下，越来越不适应甘蔗生产要求，限制了甘蔗健康种苗的种植和推广。因而，简化甘蔗试管苗生产程序，降低生产成本，是解决制约甘蔗健康种苗大规模生产推广这一难题的最有效途径。
研究表明，在植物组织培养过程中，试管苗的生根成本占整个试管苗生产成本的35%-75%，因此简化试管苗生根技术可使植物试管苗生产成本大幅度下降。试管苗瓶外生根技术是近年研究成功的一项先进的组培生根技术，是植物试管苗简化生产技术的重要组成部分。试管苗瓶外生根技术是将无根试管苗直接栽培于温室苗圃中进行生根，将传统的生根和驯化两个阶段结合起来，省去了无根试管苗的试管内生根的传统程序，用自养生根代替传统的异养生根，缩短育苗周期，节约生产成本。同时，植物组织培养技术的发展非常迅速，国内外对满天星、罗汉果、牡丹、甘蔗、草莓等一大批植物试管苗瓶外生根技术进行了研究，并获得了成功。
试管苗叶面喷施液和试管苗的栽培基质都是影响试管苗存活率的关键因素，良好的叶面喷施液配方再辅以合适的栽培基质可以有效提高试管苗的抗逆性和存活率，而不合适的栽培基质却会降低试管苗的存活率。如专利号为201510273074.7的中国专利公开了一种提高甘蔗试管苗光合自养生根效率的生长促进液及方法，其采用生根粉、脯氨酸和吐温-80配制生长促进液在炼苗阶段对试管苗进行喷施，可以提高甘蔗试管苗存活率，延缓叶片衰老和增强试管苗抗逆境的能力。
技术实现要素：
针针对上述不足，本发明对促进自养生根的生长调节剂进行进一步的改进和完善，提出一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，可以有效增强试管苗的抗逆性，使得试管苗在高温高湿和病害为害严重环境中种植的存活率都能得到有效提高，进一步扩展了栽培基质原料来源，降低栽培基质制作成本。
本发明是采用如下技术方案实现的：
一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，其包括以下浓度的组分：
吲哚丁酸20mg/l、萘乙酸10mg/l、蔗糖20g/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l。
优选的，所述的一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，其还包括以下浓度的组分：土菌消400-1000mg/l。
优选的，所述的一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，其由以下浓度的组分组成：吲哚丁酸20mg/l、萘乙酸10mg/l、蔗糖20g/l、土菌消600mg/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l。
所述的一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法如下：
（1）炼苗：将完成继代增殖培养周期，且含继代增殖培养基的无根甘蔗苗瓶放于阴凉、避风处，打开瓶盖，喷施上述配方的叶面喷施液，然后在温度20～30℃，湿度65～80%，光照强度2000～10000lux下，炼苗24小时；
（2）分割试管苗：炼苗后从瓶中取出试管苗，高度大于1cm的试管苗单株分割，高度小于1cm的试管苗按2-3株连体分割，用清水洗净培养基，清除老叶；
（3）消毒：将分割清洁后的试管苗用500倍亮盾溶液浸泡8～10分钟；
（4）种植：将消毒后的试管苗分成单株或小丛种植于放有栽培基质的种植盆中，浇足定根水；
（5）生根培育管理：将带有试管苗的种植盆移入自动调节温度湿度的育苗温室，盖上遮阳网，调节育苗温室环境：温室湿度控制在60～80%，光照强度2000～10000lux；当90%的甘蔗试管苗长出新叶后，揭开遮阳网，温室湿度控制为70%，每间隔30分钟淋水30秒，直到试管苗出圃；试管苗长出新叶后，开始施液体肥和除草，苗圃管理与常规甘蔗试管苗育苗方法相同。
上述的叶面喷施液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法中，在步骤（4）中里所述的栽培基质为体积比1：1的塘泥与新鲜河沙混合物。
上述的叶面喷施液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法中，在步骤（3）中里所述的亮盾为先正达作物保护有限公司生产的杀菌剂产品。
本技术方案与现有技术相比较具有以下有益效果：
（1）本发明的叶面喷施液有效增强试管苗的抗逆性，在高温高湿和病原微生物为害严重的环境中种植，试管苗的存活率都能得到有效提高，进一步扩展了栽培基质原料来源，拓展了试管种植环境范围，降低栽培基质制作成本。
（2）本发明中将吲哚丁酸和萘乙酸混合使用，并且将它们的浓度分别控制为20mg/l和10mg/l，相比现有技术中的吲哚丁酸或萘乙酸单独使用所添加的浓度有大幅减少，降低本发明的原料成本，而且本发明的喷施液仍然可以有效促进试管苗的生长，提高其存活率。
（3）本发明中添加的土菌消是一种广谱杀菌剂，被试管苗吸收后能在24小时内迅速传导到试管苗各个部位，能增强甘蔗试管苗对镰刀菌属(fusarium)、髓毛菌属(pithium)等土壤病害的抗性，而且土菌消在植株内代谢产生两种糖苷，有提高试管苗生理活性的效果，从而能促进植株生长，根的分蘖，根毛的增加和根的活性提高，提高试管苗抗逆性，进一步提高试管苗在不同栽培环境中的移栽存活率，特别是使用塘泥类栽培基质的病原微生物较多的栽培环境。
（4）本发明中还添加了蔗糖，蔗糖是试管苗生长的能量来源，添加蔗糖可促进试管苗健康生长和提高试管苗的抗逆境能力。
（5）本发明的叶面喷施液原料消耗少，成本低廉、配制简单、使用方便，利于大规模生产和应用。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的限制。下列实施例中未注明的具体实验条件和方法，所采用的技术手段通常为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1：
一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，其由以下浓度的组分组成：
吲哚丁酸20mg/l、萘乙酸10mg/l、蔗糖20g/l、土菌消400mg/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l。
所述的叶面喷施液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法如下：
（1）炼苗：将完成继代增殖培养周期，且含继代增殖培养基的无根甘蔗苗瓶放于阴凉、避风处，打开瓶盖，喷施上述配方的叶面喷施液，然后在温度20～30℃，湿度65～80%，光照强度2000～10000lux下，炼苗24小时；
（2）分割试管苗：炼苗后从瓶中取出试管苗，高度大于1cm的试管苗单株分割，高度小于1cm的试管苗按2-3株连体分割，用清水洗净培养基，清除老叶；
（3）消毒：将分割清洁后的试管苗用500倍亮盾溶液浸泡8～10分钟；
（4）种植：将消毒后的试管苗分成单株或小丛种植于放有栽培基质的种植盆中，浇足定根水，所述的栽培基质为体积比1：1的塘泥与新鲜河沙混合物；
（5）生根培育管理：将带有试管苗的种植盆移入自动调节温度湿度的育苗温室，盖上遮阳网，调节育苗温室环境：温室湿度控制在60～80%，光照强度2000～10000lux；当90%的甘蔗试管苗长出新叶后，揭开遮阳网，温室湿度控制为70%，每间隔30分钟淋水30秒，直到试管苗出圃；试管苗长出新叶后，开始施液体肥和除草，苗圃管理与常规甘蔗试管苗育苗方法相同。
实施例2：
一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，其由以下浓度的组分组成：
吲哚丁酸20mg/l、萘乙酸10mg/l、蔗糖20g/l、土菌消600mg/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l。
所述的叶面喷施液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法如下：
（1）炼苗：将完成继代增殖培养周期，且含继代增殖培养基的无根甘蔗苗瓶放于阴凉、避风处，打开瓶盖，喷施上述配方的叶面喷施液，然后在温度20～30℃，湿度65～80%，光照强度2000～10000lux下，炼苗24小时；
（2）分割试管苗：炼苗后从瓶中取出试管苗，高度大于1cm的试管苗单株分割，高度小于1cm的试管苗按2-3株连体分割，用清水洗净培养基，清除老叶；
（3）消毒：将分割清洁后的试管苗用500倍亮盾溶液浸泡8～10分钟；
（4）种植：将消毒后的试管苗分成单株或小丛种植于放有栽培基质的种植盆中，浇足定根水，所述的栽培基质为体积比1：1的塘泥与新鲜河沙混合物；
（5）生根培育管理：将带有试管苗的种植盆移入自动调节温度湿度的育苗温室，盖上遮阳网，调节育苗温室环境：温室湿度控制在60～80%，光照强度2000～10000lux；当90%的甘蔗试管苗长出新叶后，揭开遮阳网，温室湿度控制为70%，每间隔30分钟淋水30秒，直到试管苗出圃；试管苗长出新叶后，开始施液体肥和除草，苗圃管理与常规甘蔗试管苗育苗方法相同。
实施例3：
一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，其由以下浓度的组分组成：
吲哚丁酸20mg/l、萘乙酸10mg/l、蔗糖20g/l、土菌消800mg/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l。
所述的叶面喷施液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法如下：
（1）炼苗：将完成继代增殖培养周期，且含继代增殖培养基的无根甘蔗苗瓶放于阴凉、避风处，打开瓶盖，喷施上述配方的叶面喷施液，然后在温度20～30℃，湿度65～80%，光照强度2000～10000lux下，炼苗24小时；
（2）分割试管苗：炼苗后从瓶中取出试管苗，高度大于1cm的试管苗单株分割，高度小于1cm的试管苗按2-3株连体分割，用清水洗净培养基，清除老叶；
（3）消毒：将分割清洁后的试管苗用500倍亮盾溶液浸泡8～10分钟；
（4）种植：将消毒后的试管苗分成单株或小丛种植于放有栽培基质的种植盆中，浇足定根水，所述的栽培基质为体积比1：1的塘泥与新鲜河沙混合物；
（5）生根培育管理：将带有试管苗的种植盆移入自动调节温度湿度的育苗温室，盖上遮阳网，调节育苗温室环境：温室湿度控制在60～80%，光照强度2000～10000lux；当90%的甘蔗试管苗长出新叶后，揭开遮阳网，温室湿度控制为70%，每间隔30分钟淋水30秒，直到试管苗出圃；试管苗长出新叶后，开始施液体肥和除草，苗圃管理与常规甘蔗试管苗育苗方法相同。
实施例4：
一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，其由以下浓度的组分组成：
吲哚丁酸20mg/l、萘乙酸10mg/l、蔗糖20g/l、土菌消1000mg/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l。
所述的叶面喷施液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法如下：
（1）炼苗：将完成继代增殖培养周期，且含继代增殖培养基的无根甘蔗苗瓶放于阴凉、避风处，打开瓶盖，喷施上述配方的叶面喷施液，然后在温度20～30℃，湿度65～80%，光照强度2000～10000lux下，炼苗24小时；
（2）分割试管苗：炼苗后从瓶中取出试管苗，高度大于1cm的试管苗单株分割，高度小于1cm的试管苗按2-3株连体分割，用清水洗净培养基，清除老叶；
（3）消毒：将分割清洁后的试管苗用500倍亮盾溶液浸泡8～10分钟；
（4）种植：将消毒后的试管苗分成单株或小丛种植于放有栽培基质的种植盆中，浇足定根水，所述的栽培基质为体积比1：1的塘泥与新鲜河沙混合物；
（5）生根培育管理：将带有试管苗的种植盆移入自动调节温度湿度的育苗温室，盖上遮阳网，调节育苗温室环境：温室湿度控制在60～80%，光照强度2000～10000lux；当90%的甘蔗试管苗长出新叶后，揭开遮阳网，温室湿度控制为70%，每间隔30分钟淋水30秒，直到试管苗出圃；试管苗长出新叶后，开始施液体肥和除草，苗圃管理与常规甘蔗试管苗育苗方法相同。
实施例5：
一种提高甘蔗试管苗存活率的叶面喷施液，其由以下浓度的组分组成：
吲哚丁酸20mg/l、萘乙酸10mg/l、蔗糖20g/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l。
所述的叶面喷施液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法如下：
（1）炼苗：将完成继代增殖培养周期，且含继代增殖培养基的无根甘蔗苗瓶放于阴凉、避风处，打开瓶盖，喷施上述配方的叶面喷施液，然后在温度20～30℃，湿度65～80%，光照强度2000～10000lux下，炼苗24小时；
（2）分割试管苗：炼苗后从瓶中取出试管苗，高度大于1cm的试管苗单株分割，高度小于1cm的试管苗按2-3株连体分割，用清水洗净培养基，清除老叶；
（3）消毒：将分割清洁后的试管苗用500倍亮盾溶液浸泡8～10分钟；
（4）种植：将消毒后的试管苗分成单株或小丛种植于放有栽培基质的种植盆中，浇足定根水，所述的栽培基质为体积比1：1的塘泥与新鲜河沙混合物；
（5）生根培育管理：将带有试管苗的种植盆移入自动调节温度湿度的育苗温室，盖上遮阳网，调节育苗温室环境：温室湿度控制在60～80%，光照强度2000～10000lux；当90%的甘蔗试管苗长出新叶后，揭开遮阳网，温室湿度控制为70%，每间隔30分钟淋水30秒，直到试管苗出圃；试管苗长出新叶后，开始施液体肥和除草，苗圃管理与常规甘蔗试管苗育苗方法相同。
对比例1：
一种提高甘蔗试管苗光合自养生根效率的生长促进液，该配方为：
abt2号生根粉200mg/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l。
所述的提高甘蔗试管苗光合自养生根效率的生长促进液使用方法及试管苗的处理、种植、管理方法如下：
（1）炼苗：将完成继代增殖培养周期，且含继代增殖培养基的无根甘蔗苗瓶放于阴凉、避风处，打开瓶盖，喷施叶面喷施液：abt2号生根粉200mg/l、脯氨酸100mg/l、吐温-802ml/l，然后在温度20～30℃，湿度65～80%，光照强度2000～10000lux下，炼苗24-48小时；
（2）分割试管苗：炼苗后从瓶中取出试管苗，高度大于1cm的试管苗单株分割，高度小于1cm的试管苗按2-3株连体分割，用清水洗净培养基，清除老叶；
（3）消毒：将分割清洁后的试管苗用0.2～0.3%的高锰酸钾溶液浸泡消毒3～6分钟；
（4）种植：将消毒后的试管苗分成单株或小丛种植于放有栽培基质的种植盆中，浇足定根水，所述的栽培基质为体积比1：1的塘泥与新鲜河沙混合物；
（5）生根培育管理：将带有试管苗的种植盆移入自动调节温度湿度的育苗温室，盖上遮阳网，调节育苗温室环境：种植后的12天内，温室湿度控制在80%以上，光照强度2000～10000lux；种植12天后，温室湿度控制在70%以上，光照强度2000～10000lux；当90%的甘蔗试管苗长出新叶后，揭开遮阳网，温室湿度控制为70%，每间隔30分钟淋水30秒，直到试管苗出圃；试管苗长出新叶后，开始施液体肥和除草，苗圃管理与常规甘蔗试管苗育苗方法相同。
选用桂糖49号甘蔗品种，进行甘蔗试管苗的继代增殖培养，继代增殖培养基为ms、6-苄氨基腺嘌呤1mg/l、萘乙酸0.01mg/l、蔗糖20g/l，继代培养12～15天后按照实施例1-5和对比例1所述的方法处理甘蔗试管苗250瓶，种植5盆,种植盆规格为9孔×6孔，种植30天后调查存活率，其结果见表1：
表1
由上表可知，与现有技术中常用的生长促进液相比较，本发明的叶面喷施液可以大幅提高甘蔗试管苗的存活率。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。