一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法与流程

本发明涉及一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法，属于红鳍东方鲀遗传育种领域。

背景技术：

红鳍东方鲀(takifugurubripes)属于鲀形目，鲀科，红鳍鲀属，分布于北太平洋西部的日本、朝鲜半岛和中国沿海，在中国见于黄渤海和东海。目前，我国沿海已发现有17种东方鲀，红鳍东方鲀是该属中个体最大、经济价值较高的一种。因其肉质细嫩、味道鲜美、蛋白质高、营养丰富，深受广大美食家喜爱，尤其以美味生鱼片著称。红鳍东方鲀肌肉可以食用，但是，其生殖腺、内脏、皮肤等均有毒。成熟雌性的卵巢占体重比例高达20％左右，卵巢有毒，不能食用，因此必须全部扔掉，导致可食部分的比例大幅度下降，从经营上来讲是巨大的损失。然而精巢雄鱼的精巢不仅无毒，还是上等佳肴，是河鲀鱼最贵重的部分。

红鳍东方鲀从外观上区分雌雄是十分困难的，因此，现在是不分雌雄，以相同价格销售。在成熟季节，有经验的人触摸鱼腹部可以区分雌雄，但是也并不是100％准确。在出售时数以万计的数量，通过每尾摸肚子的方式区分雌雄需要巨大的人工和时间，是不经济的。另外，通过分子标记的方法可以准确鉴定雌雄，但是数以万计的数量通过dna方法鉴定，从时间上和成本上考虑，也是不现实的。

作为提高养殖效益的方法，一种是将其全雄化，全部变成雄鱼而没有雌鱼，是改良品种的上策；另一种方法是将其诱导成三倍体，使其没有性腺，既没有精巢也没有卵巢，减少了卵巢的损失，这也不失为一种有价值的改良方法。

三倍体鱼类的性腺一般是不发育的，有的种类即使发育也是不能繁殖后代的。因此，三倍体鱼类具有以下特性：基于生殖腺不发育，其所需的能量转用于生长，因此三倍体一般比二倍体生长快，在水产养殖上具有很大的利用潜力；基于不育性，人工诱导鱼类三倍体，单独进行养殖或放流到自然水域中，具有防止种群过度繁殖的效果；鱼类肌肉质量一般伴随性腺成熟，会产生质量下降的现象，在不育的情况下，可以排除性腺成熟的不良影响，形成保证肉质的效果。对于有毒的河鲀类，卵巢完全不可食用，诱导三倍体后，卵巢不发育，减少能量损耗，并把这部分能量转化为可食部分，实为合理的措施之一。

技术实现要素：

本发明采用静水压法诱导三倍体，具有诱导率高、孵化率高和苗种成活率高的特点。

本发明提供了一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法，所述红鳍东方鲀三倍体诱导方法包括如下步骤：取红鳍东方鲀成熟雄鱼的精液和红鳍东方鲀雌鱼成熟的卵子；在成熟的卵子中加入精液，再加入海水，得到受精卵；将受精卵转移到静水压机的加压腔中，施压30-80mpa，持续2-10min；将静水压处理后的受精卵转移到孵化器中孵化。

本发明优选为利用人工催产方法获得红鳍东方鲀成熟雄鱼的精液和红鳍东方鲀雌鱼成熟的卵子。

本发明优选为受精水温为15-20℃，ph为7.8-8.5，盐度为25-35‰。。

本发明优选为加入海水后2-12min，再将受精卵转移到静水压机的加压腔中。

本发明优选为孵化水温为15-20℃，ph为7.8-8.5，盐度为25-35‰。

本发明诱导的三倍体鱼苗成活率在80％以上。

本发明有益效果为：

本发明所述方法诱导三倍体成功率高，孵化率高，操作简便，节省时间，具有很好的实用性和可操作性，可以作为产业化应用措施。

附图说明

本发明附图2幅，

图1为实施例1的二倍体峰图；

图2为实施例1的三倍体峰图。

具体实施方式

下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法，所述红鳍东方鲀三倍体诱导方法包括如下步骤：

利用人工催产方法获得红鳍东方鲀成熟雄鱼的精液和红鳍东方鲀雌鱼成熟的卵子；

在成熟的卵子中加入精液，搅拌，使精子充分与卵子接触，再加入海水，激活卵子，得到受精卵，受精水温为17℃，ph为8.0，盐度为30‰；

加入海水后4min，再将受精卵转移到静水压机的加压腔中，施压40mpa，持续2min；

将静水压处理后的受精卵转移到孵化器中孵化，孵化水温为17℃，ph为8.0，盐度为30‰。

三倍体率在80％以上。

实施例2

一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法，所述红鳍东方鲀三倍体诱导方法包括如下步骤：

利用人工催产方法获得红鳍东方鲀成熟雄鱼的精液和红鳍东方鲀雌鱼成熟的卵子；

在成熟的卵子中加入精液，搅拌，使精子充分与卵子接触，再加入海水，激活卵子，得到受精卵，受精水温为18℃，ph为7.8，盐度为28‰；

加入海水后4min，再将受精卵转移到静水压机的加压腔中，施压50mpa，持续5min；

将静水压处理后的受精卵转移到孵化器中孵化，孵化水温为18℃，ph为7.8，盐度为28‰。

三倍体率在90％以上。

实施例3

一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法，所述红鳍东方鲀三倍体诱导方法包括如下步骤：

利用人工催产方法获得红鳍东方鲀成熟雄鱼的精液和红鳍东方鲀雌鱼成熟的卵子；

在成熟的卵子中加入精液，搅拌，使精子充分与卵子接触，再加入海水，激活卵子，得到受精卵，受精水温为20℃，ph为8.1，盐度为31‰；

加入海水后6min，再将受精卵转移到静水压机的加压腔中，施压40mpa，持续2min；

将静水压处理后的受精卵转移到孵化器中孵化，孵化水温为20℃，ph为8.1，盐度为31‰。

三倍体率在90％以上。

实施例4

一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法，所述红鳍东方鲀三倍体诱导方法包括如下步骤：

利用人工催产方法获得红鳍东方鲀成熟雄鱼的精液和红鳍东方鲀雌鱼成熟的卵子；

在成熟的卵子中加入精液，搅拌，使精子充分与卵子接触，再加入海水，激活卵子，得到受精卵，受精水温为18℃，ph为8.0，盐度为31‰；

加入海水后6min，再将受精卵转移到静水压机的加压腔中，施压70mpa，持续8min；

将静水压处理后的受精卵转移到孵化器中孵化，孵化水温为18℃，ph为8.0，盐度为31‰。

三倍体率在90％以上。

实施例5

一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法，所述红鳍东方鲀三倍体诱导方法包括如下步骤：

利用人工催产方法获得红鳍东方鲀成熟雄鱼的精液和红鳍东方鲀雌鱼成熟的卵子；

在成熟的卵子中加入精液，搅拌，使精子充分与卵子接触，再加入海水，激活卵子，得到受精卵，受精水温为19℃，ph为8.0，盐度为28‰；

加入海水后8min，再将受精卵转移到静水压机的加压腔中，施压50mpa，持续2min；

将静水压处理后的受精卵转移到孵化器中孵化，孵化水温为19℃，ph为8.0，盐度为28‰。

三倍体率约90％。

实施例6

一种基于静水压法的红鳍东方鲀三倍体诱导方法，所述红鳍东方鲀三倍体诱导方法包括如下步骤：

利用人工催产方法获得红鳍东方鲀成熟雄鱼的精液和红鳍东方鲀雌鱼成熟的卵子；

在成熟的卵子中加入精液，搅拌，使精子充分与卵子接触，再加入海水，激活卵子，得到受精卵，受精水温为21℃，ph为8.0，盐度为30‰；

加入海水后8min，再将受精卵转移到静水压机的加压腔中，施压70mpa，持续8min；

将静水压处理后的受精卵转移到孵化器中孵化，孵化水温为21℃，ph为8.0，盐度为30‰。

三倍体率约80％。