专利名称：：一种生物化学杀鼠剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种大分子毒性蛋白杀鼠组合物，特别是涉及一种以Cα型或D型肉毒梭菌毒素作为活性成分的生物化学杀鼠剂。鼠患危害，由来已久。随着人口膨胀，生态平衡失调，鼠口有增无减的现象，日趋严重。千百年来，人类就有利用低分子毒性化合物防治鼠类的实践。因天然低分子毒性作用缺乏特异的选择性作用，适口性差，提取困难，成本高等问题，故一直未能发展。自本世纪初人工合成化学杀鼠剂问世以来，由于急性杀鼠剂对非靶动物安全性差，已被禁用或被控制使用。慢性杀鼠剂又因毒性作用缓慢，费工费料，不易被群众接受。所以，探索高效、低毒、无残留的理想杀鼠剂一直是灭鼠学科的重要课题之一。1985年我国利用C型肉毒梭菌毒素是某些动物食物中毒的病原特性，利用鼠类与常见动物不同敏感性机理，首先设计与试验了C型肉毒梭菌毒素在高寒草地杀灭高原鼠兔，并已获得成功。但由于C型肉毒梭菌毒素在人口密集、动物种类复杂地区使用的安全性问题，及在温暖平原地区难以保持毒力的稳定性问题，并不具备普遍的指导意义。因此，多年来这一方法的进一步推广受到了阻碍，未能发挥更大的优势。本发明提供一种生物化学杀鼠剂，该剂以Cα型或D型肉毒梭菌毒素作为活性成分，不仅提高了对人畜的安全性，同时增强了对鼠类的毒性。还提供了非毒性成分的保护剂、防腐剂等稳定功能助剂，克服了“单纯”肉毒梭菌毒素只能在高寒地区使用的局限性，从而扩大了适用范围。本发明另一个目的，明显地改善了杀鼠剂的保存与运输的条件，为适应不同灭鼠需求增强了实用性。本发明的技术方案1、活性成份肉毒梭菌毒素有A、B、C、D、E、F和G等七种不同的型别，其中仅C型又分为Cα与Cβ二个亚型。其菌株型别与毒素型别具有一致性。本发明通过长期查阅资料与试验研究证明，毒素型别与动物种类之间存在着不同敏感程度的规律，各型肉毒梭菌毒素对人与猴的敏感性顺序，由强至弱依次为B＞A＞E＞Cβ＞F＞Cα＞D型，其中Cα及D型肉毒梭菌毒素与Cβ型肉毒梭菌毒素的差距为100与330倍，与A型肉毒梭菌毒素的差距达数百倍至数千倍。因此，利用Cα与D型肉毒梭菌毒素的这一特性作为杀鼠剂的活性成分，是在已知化学毒素与生物毒素中具有理想的得天独厚的优势(见表)。表各型肉毒梭菌毒素对猴、人的敏感性动物种类给毒途径中毒剂量各型肉毒梭菌毒素剂量(鼠单位)BAECβFCαD猴①食入性小白鼠灌胃致死量/猴每公斤体重1.8×1026.5×1021.8×1031.8×1036.25×1041.8×1056×105人②食入性(各国流行病学资料)+++++++++±+--吸入性致死量/人③2万④＞600万⑤＞3000万注“++++”系主要中毒病原，“+++”系一般中毒病原，“+”迄今仅发生二例，“±”尚未有确切资料证明，“-”未有中毒资料。①、DolmanC.E.andMarailmiL.J.Infect.Dis.109/2107.1961.②、夏宏田等著，肉毒中毒，新疆人民出版社出版，1982年，第108页③、余贺等医学微生物学，人民卫生出版社出版，1983年，第483页。④、系本发明人试验资料。</table></tables>2、稳定剂Cα与D型肉毒梭菌毒素属高分子毒性蛋白，对温度、光辐射、湿度、PH值、有害气体(氧)等理化因素较为敏感，易引起迅速失毒。本发明经试验，通过天然有机高分子絮凝剂、低分子化合物的还原剂与缓冲剂与醣，以及防腐剂的作用，将显著提高活性成分的稳定性。3、实现本发明目的的技术方案(1)、鼠单位及其测定Cα与D型肉毒梭菌毒素的毒力衡量标准可用“鼠单位”(motuseunit，M.U.)表示。本发明规定以肉毒梭菌毒素静脉注射体重为14～16克小白鼠的最小致死量(MLD)作为基数计算，即1个MLD为1个MU。(2)、具体技术方案一种生物化学杀鼠剂，含有Cα型肉毒梭菌毒素或D型肉毒梭菌毒素、絮凝剂、缓冲剂、醣和水。还含有还原剂、防腐剂。絮凝剂为明胶、果胶、淀粉、脱脂乳。缓冲剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、谷氨酸钠。醣为蔗糖、葡萄糖。还原剂为半胱氨酸、硫乙醇酸钠、维生素C。防腐剂为山梨酸或青霉素、链霉素的混合物。将絮凝剂、缓冲剂、醣配成水溶液，与毒素混合，使每百毫升的混合物中含0.1×107～20×108MU毒素，0.2～8g絮凝剂、0.1～8g缓冲剂、0.5～10g醣。每百毫升杀鼠剂中还含0.01～0.1g还原剂、0.01～0.1g(或2～20万单位)防腐剂。当防腐剂是山梨酸时，其量是0.01～0.1g；当防腐剂是青霉素、链霉素的混合物时，其量是2～20万单位。(3)、生物化学杀鼠剂的制作按比例，将稳定剂的各种成分，经高压灭菌处理，依次加入于Cα或D型肉毒梭菌毒素中，使之符合所需含量，并不时缓慢摇动毒素，混和均匀，防止凝块出现。其中，当每百毫升混合物中明胶含量为0.2～5g时为水剂剂型。当每毫升明胶含量为5～8％时为胶凝剂剂型。将胶凝剂杀鼠剂，经真空冷冻干燥工艺后，即为干冻剂。产品制成后密封避光贮存。本发明的技术特点及实施效果1、靶谱广、毒性强Cα型与D型肉毒梭菌毒素对黑线姬鼠、棕色田鼠、褐家鼠、黄胸鼠等主要害鼠灌胃致死量分别为250～500MU，与500～1500MU，经草原、农田、城市十余种常见害鼠的现场试验，上述毒素都较敏感，并显示出足够的毒力。2、人畜安全试验证明，Cα型肉毒梭菌毒素对鸭经口致死量大于105MU，对鸡、猫、狗、猪大干106MU。尤其是Cα与D型肉毒梭菌毒素，对人与猴的安全度比Cβ型肉毒梭菌毒素大100与333倍，比A、B型肉毒梭菌毒素大数百至数千倍。根据流行病学与实验室资料，Cα型肉毒梭菌毒素在无水禽、小形体鸟类的地区，D型肉毒梭菌毒素在无牛、貂的地区，按毒饵使用的浓度对其它非靶动物危险性小，且无二次中毒的可能。这是现有化学杀鼠剂无法相比的。3、适口性好一般杀鼠剂的摄食系数标准为大于0.3，而Cα型肉毒梭毒素毒饵对褐家鼠、黄胸鼠的摄食系数分别为1.12和0.61。前者有毒毒饵摄取率大于无毒毒饵。4、亚急性中毒作用肉毒毒素是典型的神经麻庳毒素，中毒鼠类呈现肌肉麻庳、四肢瘫痪，因呼吸障碍致死。其中毒潜伏期1～2天，死亡时间2～4天。这种“亚急性”病程，有利于对鼠类的群体防治，在目前化学杀鼠剂中有着独特的重要地位，符合缩小急性与慢性杀鼠剂界限的发展需要。5、保护鼠类天敌、维护生态平衡实践证明，鹰、狐、猫、狗等鼠类天敌，对Cα与D型肉毒梭菌毒素有较强的抵抗力。毒素毒饵在开放性条件下残留期短，不易污染环境，对维护生态平衡有着重要的战略意义。6、现场效果多年来，生物化学杀鼠剂经草原、农田、城镇地区共有200多万亩现场试验证实，在所试的鼠种平均杀灭率达85～100％，未发现人畜中毒事故。由于弥补了现有急性与慢性化学杀鼠剂的不足，具有省工、省时、省料、高效、安全的特点。随着本发明的实施，其防治费用明显低于慢性杀鼠剂，与急性杀鼠剂相近，将会发挥更大的社会效益，经济效益和生态效益。7、适用范围广不仅可在高寒、人迹稀少地区使用，而且还可在温暖平原地区及人口密集、动物种类复杂地区使用。实施例1以Cα型肉毒梭菌毒素作活性成分的杀鼠剂。分别取Cα型肉毒梭菌毒素、明胶、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、蔗糖、青霉素、链霉素。将明胶、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、蔗糖分别配成水溶液，高压灭菌后待用。将青霉素、链霉素分别用灭菌蒸馏水稀释后待用。将上述所有水溶液加入到Cα型肉毒梭菌毒素中，使每百毫升的混合物中含0.1×107MU毒素、0.2g明胶、0.3g磷酸氢二钠、0.1g磷酸二氢钾、1g蔗糖、2万单位青霉素、2万单位链霉素，充分混合均匀后，即制得水状生物化学杀鼠剂。该剂所配制的毒素毒饵具有杀鼠效力强，不危及人畜，尤其适宜在无水禽、小体形鸟类的地区使用。此外，在该剂中增加了非毒性的功能性助剂，克服了单纯肉毒梭菌毒素只能在高寒地区使用的局限性，扩大了适用范围。实施例2分别取Cα型肉毒素菌毒素、明胶、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、蔗糖、青霉素、链霉素。按实施例1所叙方法配制，并使制成的杀鼠剂每百毫升中含5×108MU毒素、6g明胶、5.5g磷酸氢二钠、2.5g磷酸二氢钾、8g蔗糖、5万单位青霉素、5万单位链霉素，即制成胶凝状生物化学杀鼠剂。制成的杀鼠剂杀鼠效力高，不危及人畜，尤其适宜在无水禽、小体形鸟类的地区使用。此外，在该剂中增加了非毒性的功能性助剂，克服了单纯肉毒梭菌毒素只能在高寒地区使用的局限性，扩大了适用范围。且体积小，便于运输、保存。实施例3分别取Cα型肉毒梭菌毒素、明胶、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、蔗糖、青霉素、链毒素。按前法配制，并使该制剂每百毫升中含5×108MU毒素、6g明胶、6g磷酸氢二钠、2g磷酸二氢钾、10g蔗糖、5万单位青霉素、5万单位链霉素。再经真空冷冻干燥工艺，即制成饼块状生物化学杀鼠剂。制成的杀鼠剂使用效果与前例同。且体积小，重量轻，保存期长。实施例4分别取D型肉毒梭菌毒素、明胶、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、蔗糖、青霉素、链霉素。按前法配制，使该制剂每百毫升中含4×106MU毒素、0.2g明胶、0.3g磷酸氢二钠、0.1g磷酸二氢钾、1g蔗糖、2万单位青霉素、2万单位链霉素。即制成水状生物化学杀鼠剂。制成的杀鼠剂在无貂、牛及其反刍兽地区使用，效果与前例同。实施例5分别取D型肉毒梭菌毒素、明胶、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、蔗糖、青霉素、链霉素。依前法制取，使制成的杀鼠剂每百毫升中含2×109MU、8g明胶、7.5g磷酸氢二钠、2.5g磷酸二氢钾、10g蔗糖、20万单位青霉素、20万单位链霉素。即制成胶凝状生物化学杀鼠剂。效果与例4同，且体积小，便于运输，保存。实施例6分别取D型肉毒酸菌毒素、明胶、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、蔗糖、青霉素、链霉素。依前法配制，使制成的杀鼠剂每百毫升中含2×109MU毒素，6g明胶、6g磷酸氢二钠、2g磷酸二氢钾、20万单位青霉素、20万单位链霉素。制成的杀鼠剂呈胶凝状。再经真空冷冻干燥工艺，即制成饼块状生物化学杀鼠剂。效果与例4同，且体积小，重量轻，保存期长。权利要求1.一种生物化学杀鼠剂，含有Cα型肉毒梭菌毒素或D型肉毒梭菌毒素、絮凝剂、缓冲剂、醣和水。2.根据权利要求1所叙述的生物化学杀鼠剂，其特征在于还含有还原剂、防腐剂。3.根据权利要求1所叙述的生物化学杀鼠剂，其特征在于絮凝剂为明胶、果胶、淀粉、脱脂乳。4.根据权利要求1所叙述的生物化学杀鼠剂，其特征在于缓冲剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、谷氨酸钠。5.根据权利要求2所叙述的生物化学杀鼠剂，其特征在于还原剂为半胱氨酸、硫乙醇酸钠、维生素C。6.根据权利要求2所叙述的生物化学杀鼠剂，其特征在于防腐剂为山梨酸或青霉素、链霉素的混合物。7.根据权利要求1所叙述的生物化学杀鼠剂，其特征在于将絮凝剂、缓冲剂、醣配成水溶液，与毒素混合，每百毫升混合物中含0.1×107～20×108MLD毒素，0.2～8g絮凝剂、0.1～8g缓冲剂、0.5～10g醣。8.根据权利要求2所叙述的生物化学杀鼠剂，其特征在于每百毫升杀鼠剂中还含0.01～0.1g还原剂、0.01～0.1g(或2～20万单位)防腐剂。全文摘要一种生物化学杀鼠剂，含有Ca型肉毒梭菌毒素或D型肉毒梭菌毒素、絮凝剂、缓冲剂、醣和水。该杀鼠剂克服了单纯肉毒梭菌毒素只能在高寒、人迹稀少地区使用的局限性，具有高效、低毒、无残留的特性，不危及人畜，通过与基饵配制成的毒饵，可用于各种季节不同生境杀灭各类害鼠。文档编号A01N63/00GK1164331SQ9611712公开日1997年11月12日申请日期1996年10月9日优先权日1996年10月9日发明者崔生发申请人:崔生发