结合瓶外生根技术的月季组培快繁的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及月季的繁殖技术，具体涉及一种月季组培瓶内增殖加瓶外生根的快繁育苗方法。
【背景技术】
[0002]月季为蔷薇科蔷薇属多年生灌木，原产于我国，是我国十大名花之一，也是世界四大鲜切花之一，月季具有花色丰富、花期长、适应性强、管理容易等特点，是园林绿化和鲜花市场上十分重要的材料，具有极高的观赏价值和商业价值。目前月季繁殖技术多采用扦插、嫁接、压条等方法，受取材及繁育时节的限制，不能满足工厂化大生产发展的需要。
[0003]经过对现有技术的检索发现，现有月季组培存在增殖系数低，芽的持续增殖能力差，同时主要采取瓶内生根技术，存在繁殖速率低、成本高的缺陷。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于针对上述现有技术存在的不足，提供一种结合瓶外生根技术的月季组培快繁的方法。本发明建立了一种建立稳定高效的组培快繁体系，是月季组培瓶内增殖加瓶外生根的快繁育苗方法；利用组培技术繁殖月季具有速度快，质量高，遗传稳定性强的优势。而采用瓶外生根技术，可大大降低生产成本，进一步提高繁苗速率；在本专利技术下得到的再生苗可不经炼苗直接进行瓶外生根，繁殖快、操作简单、效率高、成本低；能够有效提高苗木繁殖速度。
[0005]本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
[0006]本发明涉及一种结合瓶外生根技术的月季组培快繁的方法，所述方法包括如下步骤:
[0007]I)以月季半木质化新梢为外植体制备成茎段；
[0008]2)将茎段接种到含有MS培养基、6-BA、NAA、蔗糖和琼脂的诱导培养基中培养，继代两到三次，然后切取新芽转入含有MS培养基、6-BA、CPPU、NAA、蔗糖和琼脂的增殖培养基进行增殖培养；
[0009]3)增殖后的芽苗不必经过炼苗，直接扦插于复合基质上，实现瓶外生根。
[0010]优选的，所述的月季半木质化新梢经消毒处理且优选为当年生长初期的月季新梢。
[0011]优选的，所述茎段具有至少一个腋芽，且茎段底部预先剪除2?3毫米。
[0012]优选的，所述诱导培养基的组分(每升)为:MS培养基、6-BA 2.0mg/L、NAA
0.lmg/L、蔗糖30g/L以及琼脂6.5g/L，该培养基的pH为5.4?5.6。
[0013]优选的，所述增殖培养基的组分(每升)为:MS培养基、6-BA 3.0mg/L, CPPU
1.0mg/L NAA 0.lmg/L、蔗糖 30g/L、琼脂 6.5g/L，该增殖培养基的 pH 为 5.4 ?5.6。
[0014]优选的，所述的增殖培养每30天继代一次，繁殖系数为3?5。
[0015]优选的，所述MS 培养基的组分为:KN03 1 900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、MgSO4.7H20370mg/L、KH2PO4 170mg/L、CaCl2 440mg/L、MnSO4.4H20 22.3mg/L、ZnSO4.7H20 8.6mg/L、H3BO3 6.2mg/L、KI 0.83mg/L、Na2MoO4.2H20 0.25mg/L、CuSO4.7H20 0.025mg/L、CoCl2.2H200.025mg/L、VB1 0.lmg/L、VB6 0.5mg/L VB3 0.5mg/L、甘氛酸 2mg/L、肌醇 100mg/L、FeSO4.7H20 27.8mg/L、Na2-EDTA 37.3mg/L。
[0016]优选的，所述芽苗须浸泡生根液。
[0017]优选的，所述生根液的组分为:IBA(吲哚丁酸)200mg/L、VB1(盐酸硫胺素)0.1g/
L0
[0018]优选的，所述浸泡时间为3分钟。
[0019]优选的，所述芽苗扦插于复合基质后置于小棚，20天可见明显生根，I月可见新芽生出，成活率超过90%。
[0020]优选的，所述的小棚内空气相对湿度为85%以上，温度在15?30°C。
[0021]优选的，所述复合基质为经800倍多菌灵消毒后的草炭、珍珠岩与蛭石(体积比为3:2:1)的混合基质。
[0022]与现有技术相比，本发明具有如下有益效果:
[0023]1、本发明在组培瓶内阶段，包括初代诱导及继代增殖中以6-BA、CPPU为植物生长调节剂，它们具有促进细胞分裂，促进细胞生长等作用；本发明中6-BA用量较高，并添加了CPPU，这既受品种的基因型决定，且，高剂量的6-BA和CPPU有利于提高芽的增殖系数；
[0024]2、本发明的方法增殖系数高，植株强壮，可不经炼苗直接进入瓶外生根程序；
[0025]3、本发明采用瓶外生根技术，相对瓶内生根速度快，效率高、成本低，进一步加快了繁殖速度。
【附图说明】
[0026]通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显:
[0027]图1为月季瓶内增殖情况示意图；
[0028]图2为月季生根成活情况示意图。
【具体实施方式】
[0029]下面结合实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干调整和改进。这些都属于本发明的保护范围。
[0030]实施例1
[0031]本实施例一种结合瓶外生根技术的月季组培快繁的方法，包括以下操作步骤:
[0032]I) 4月初于上海地区采集当年生长初期月季半木质化新梢(月季品种为贞德)，经消毒处理后(75%的乙醇消毒30秒后，无菌水冲洗2次，再用0.1%的升汞消毒处理6分钟，后有无菌水处理4次)，剪切成带I个腋芽的茎段，接种前剪除底端2?3毫米；
[0033]2)将茎段接种到初代培养基MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.lmg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L上，pH5.4?5.6 ;每30天继代培养一次，共培养2?3次，将新长出的芽茎接种到增殖培养基 MS+6-BA 3.0mg/L+CPPU 1.0mg/L+NAA 0.lmg/L+ 蔗糖 30g/L+ 琼脂 6.5g/L 上，可持续继代培养，繁殖系数在3?5之间，图1为瓶内增殖情况示意图，图1可见，月季瓶内增殖情况良好，植株形态正常，可连续继代增殖。培养条件:温度25°C，光照时间14小时/天，光强2000?30001x ；
[0034]上述MS 培养基的组分为:KNO3 1900mg/L、NH4NO3 1650mg/L,MgSO4.7Η20 370mg/L、KH2PO4 170mg/L、CaCl2 440mg/L、MnSO4.4H20 22.3mg/L、ZnSO4.7H20 8.6mg/L、H3B036.2mg/L、KI 0.83mg/L、Na2MoO4.2H20 0.25mg/L、CuSO4.7H20 0.025mg/L、CoCl2.2H200.025mg/L、VB1 0.lmg/L,VB6 0.5mg/L、VB3 0.5mg/L、甘氨酸 2mg/L、肌醇 100mg/L、FeSO4.7Η20 27.8mg/L、Na2-EDTA 37.3mg/L。
[0035]3)当芽苗增殖到一定数量时，将芽苗浸泡生根液(IBAZOOmg/L+VBi 0.lg/L) 3分钟后直接扦插于经800倍多菌灵消毒后的草炭、珍珠岩与蛭石(体积比为3: 2: I)的混合基质上，遮小棚以保湿(空气相对湿度为85%以上，温度在15?30°C ),20天可见明显生根，I月可见新芽生出，成活率超过90%，图2为瓶外生根成活情况示意图，可见新芽长出，生长正常。
[0036]以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。
【主权项】
1.一种月季组培快繁的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤: A、以月季半木质化新梢为外植体制备成茎段； B、将茎段接种到含有MS培养基、6-BA、萘乙酸、蔗糖和琼脂的诱导培养基中培养，继代培养两到三次，然后切取新芽转入含有MS培养基、6-BA、CPPU、萘乙酸、蔗糖和琼脂的增殖培养基进行增殖培养； C、增殖后的芽苗不必经过炼苗，直接扦插于复合基质上，实现瓶外生根。2.根据权利要求1所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述月季半木质化新梢为经消毒处理的当年生长初期的月季新梢。3.根据权利要求1所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述茎段具有至少一个腋芽，且茎段底部预先剪除2?3毫米。4.根据权利要求1所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述诱导培养基的组分为:MS培养基、6-BA 2.0mg/L、萘乙酸0.lmg/L、蔗糖30g/L以及琼脂6.5g/L ;该混合培养基的pH为5.4?5.6。5.根据权利要求1所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述增殖培养基的组分为:MS 培养基、6-BA 3.0mg/L,CPPU 1.0mg/L、萘乙酸 0.lmg/L、蔗糖 30g/L、琼脂 6.5g/L ;该增殖培养基的pH为5.4?5.6。6.根据权利要求4或5所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述MS培养基的组分为:KN03 1 900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、MgSO4.7H20 370mg/L、KH2PO4 170mg/L、CaCl2440mg/L、MnSO4.4H20 22.3mg/L、ZnSO4.7H20 8.6mg/L、H3B036.2mg/L、KI 0.83mg/L、Na2MoO4.2H20 0.25mg/L、CuSO4.7H20 0.025mg/L、CoCl2.2H20 0.025mg/L、VB1 0.lmg/L,VB6 0.5mg/L、VB3 0.5mg/L、甘氨酸 2mg/L、肌醇 100mg/L、FeSO4.7H20 27.8mg/L、Na2-EDTA37.3mg/L。7.根据权利要求1所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述芽苗是指:增殖产生的再生植株，每株浸泡生根液。8.根据权利要求7所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述生根液的组分为:IBA 200mg/L, VB1 0.lg/L。9.根据权利要求1所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述芽苗扦插于复合基质后置于小棚，所述小棚内空气相对湿度为85%以上，温度在15?30°C。10.根据权利要求1所述的月季组培快繁的方法，其特征在于，所述复合基质为经多菌灵消毒后的草炭、珍珠岩与蛭石的混合基质。
【专利摘要】本发明公开了一种结合瓶外生根技术的月季组培快繁的方法；以月季半木质化茎段为外植体，接种到含有MS培养基、6-BA、NAA、蔗糖和琼脂的诱导培养基中培养，继代培养两到三次，然后切取新芽转入含有MS培养基、6-BA、CPPU、NAA、蔗糖和琼脂的培养基中进行连续增殖培养；将再生苗浸泡生根液后扦插于复合基质上，实现瓶外生根。本发明在组培瓶内阶段，包括初代诱导及继代增殖中以6-BA为植物生长调节剂，它具有促进细胞分裂，促进细胞生长等作用，增殖系数高，植株强壮，可不经壮苗直接进用瓶外生根程序；同时采用瓶外生根技术，相对瓶内生根速度快，效率高、成本低，进一步加快了繁殖速度。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN104920220
【申请号】CN201510347453
【发明人】曾丽, 赵子刚, 丁国平, 刘晓丛, 彭勇政, 舒雅娟, 穆廷云, 王鹏, 林登贵, 王梦茹, 迪力达尔.依明, 徐佳琳
【申请人】上海交通大学
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年6月19日